袁榴娣 作品数:37 被引量:115 H指数:6 供职机构: 东南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 江苏省高等教育教改立项研究课题 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 文化科学 化学工程 更多>>
果蝇S2细胞中高表达荧光素酶重组质粒的构建及活性测定 被引量:2 2006年 目的:构建果蝇S2细胞中高表达荧光素酶的重组质粒。方法:用PCR方法扩增得到pac启动子的基因片段,经酶切亚克隆至pGL3-Basic的真核表达载体中,转染果蝇S2细胞,通过测定荧光素酶和β-半乳糖苷酶的活性计算荧光素酶的相对活性。结果:构建的重组质粒在S2细胞中荧光素酶的相对活性较pGL3-Control中增加了2.7万倍。结论:成功构建了果蝇S2细胞中高表达荧光素酶的重组质粒pGL3-pac。 丁洁 周静 袁榴娣关键词:荧光素酶 启动子 报告基因 转染 非小细胞肺癌中PTB对肿瘤抑制基因ceacam1选择性拼接的调控研究 被引量:1 2006年 目的:研究在非小细胞肺癌及癌旁组织中ceacam1通过选择性拼接而产生的两种转录产物的调控机制。方法:将用PCR方法获得ceacam1基因中从内含子5至外显子8长1 606 bp DNA片段插入到真核表达载体pCMV中,构建成ceacam1迷你基因模型并与ptb基因共转染,用PCR法鉴定转染后的产物变化;根据外显子7序列设计的探针GAE(16-nt)及ACE(8-nt)进行凝胶阻滞分析实验。分离与探针结合的蛋白并进行质谱分析。结果:ptb3种cDNA与ceacam1迷你基因共转染后,CEACAM lL表达水平下降,其中ptb4对迷你基因的表达产物影响最大。仅转染迷你基因的细胞中ceacam1L在两条带中所占比例为76.7%,而与ptb3种重组质粒共转染后,比例分别下降至58.3%、64.8%和54.0%。凝胶阻滞实验表明,探针GAE能与核蛋白结合,而ACE基本不能与核蛋白结合,与GAE结合的蛋白经质谱分析为PTB。结论:PTB过表达与ceacam1低表达有明显的相关性,拼接因子PTB参与ceacam1的选择性拼接。 袁榴娣 丁洁 缪峰关键词:凝胶阻滞分析 非小细胞肺癌 抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定 2008年 目的:制备兔抗果蝇Trio蛋白的抗体。方法:以RT-PCR扩增Trio的1 173 bp的基因片段并克隆入pET28a(+)和pGEX-4T-1(His)6C表达载体中,表达并纯化Trio-His、Trio-GST融合蛋白。用纯化的Trio-His融合蛋白免疫家兔产生抗Trio的抗体,用Trio-GST亲和层析法进行纯化并采用Western blot法检测抗体生物学活性。结果:表达的Trio-His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Trio-His融合蛋白,以纯化的Trio-His免疫家兔制备的兔抗Trio的抗体,经Western blot分析显示该抗体可与果蝇S2细胞Trio特异性结合。结论:获得具有良好特异性的兔抗Trio抗体,为进一步研究Trio的功能奠定了基础。 缪峰 吕雯雯 丁洁 袁榴娣关键词:原核表达 抗体制备 SR蛋白研究进展 被引量:10 2003年 在真核生物众多拼接因子中 ,SR蛋白家族是一类重要的成员 ,它们与一些特定的RNA序列结合 ,帮助识别并选择正确的 5′及 3′拼接位点 ,与其它的拼接因子共同完成拼接任务 ,在决定组织细胞的特异性及个体发育的阶段性方面发挥着关键作用。本文就近 10年来有关SR蛋白的结构和功能的研究进展作一综述。 王善治 袁榴娣关键词:SR蛋白 RNA 真核生物 分子组成 果蝇中miR274和其可能的靶基因Derailed 2(Drl2)相互作用的研究 MicroRNAS(miRNAs)是一类广泛存在于多细胞生物中,长约21~22 nt的单链小分子非编码RNA,它通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合引起靶mRNA的降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后的调控.本文的研... 吕雯雯 丁洁 袁榴娣关键词:靶基因 基因调控 基因表达 文献传递 基于创新能力培养的研究生“高级生物化学与分子生物学技术”课程体系的构建 被引量:4 2009年 研究生教育是培养高层次人才的主要途径,面对近年来不断扩大的研究生队伍,如何提高培养质量是近年研究生教育工作的重点。研究生的培养质量,主要是看毕业生能否为经济建设、科学进步发展做出应有的贡献。产生这种贡献的大小与研究生具有的创新精神和创新能力密切相关^[1],创新能力是衡量研究生教育质量的重要指标, 袁榴娣 李新荣 汪道涌 丁洁 邓湘蕾 毛晓华关键词:创新能力培养 研究生教育 分子生物学技术 生物化学 教育质量 教育工作 医学基础实验教学课程体系改革与实践 被引量:9 2009年 改革实验教学课程体系,改变实验教学依附于理论教学的传统观念,强化综合实验课程建设,加强教学实验创新、突出研学结合,建立实验教学新体系。加大综合性、设计性和创新性实验的比例,开设独立的医学基础实验课程,大学生课外研学训练和科研创新实验项目全面开展,全面提高了实验教学水平和学生的综合素质。 李新荣 董榕 史志英 袁榴娣关键词:实验教学 实验课程体系 DX16启动子序列的分析 目的:分析DX16基因的启动子序列.
方法:用PCR方法扩增得到含有DX16基因ATG上游不同长度的侧翼序列,经酶切亚克隆至pGL3-Basic的真核表达载体中,转染果蝇S2细胞,通过测定的荧光素酶和β-半乳糖... 丁洁 袁榴娣关键词:报告基因 荧光素酶 文献传递 基因工程原理与技术教学改革初探 被引量:6 2015年 基因工程是现代生命科学的核心,《基因工程原理与技术》是医学院生物工程专业本科生必须掌握的一门理论性和实践性都较强的基础课程。为更好地培养全球化、复合型、具有较高综合素质和较强国际视野的本科生,本课题组从2013年开始对《基因工程原理与技术》这门课程实行教学改革探索,取得了一定的成效。本文从教学内容优化、教学方法和手段革新、实验设计变革等几个方面对《基因工程原理与技术》课程的教学改革探索进行初步总结。 孔岩 赵金凤 缪峰 袁榴娣关键词:基因工程 教学改革 萃取法分离L-苯丙氨酸和反式-肉桂酸 本发明提供了一种在苯丙氨酸解氨酶的逆向催化反式-肉桂酸生物转化生产L-苯丙氨酸的酶促反应后,反应混合液在铵盐浓度5%-15%,pH6-10.6的条件下,直接用溶剂萃取法分离L-苯丙氨酸和反式-肉桂酸。本发明具有设备和工艺... 徐虹 刘浦 袁榴娣 杜肇宗文献传递