褚丽新
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：吉林大学人兽共患病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- A200711基因的真核表达及其对H7402细胞凋亡的影响
- 肝细胞癌(HCC)作为世界第6大常见癌症严重危害人类的健康,传统的肝癌治疗方法包括手术、化疗和放疗。毒副作用及靶向性问题一直是传统疗法无法回避的现实。近年来,随着分子生物学、分子肿瘤学、药物基因组学的发展,肝癌治疗取得了...
- 褚丽新
- 关键词：旋毛虫真核表达细胞凋亡
- 文献传递
- 旋毛虫A200711蛋白的原核表达、纯化及其对H7402细胞增殖的影响被引量：3
- 2012年
- 目的原核表达旋毛虫抗肿瘤基因A200711,并纯化该蛋白,CCK-8检测其对H7402人肝癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR获得A200711基因片段,构建重组表达载体pET-28a(+)-A200711,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)。SDS-PAGE及Western blot检测IPTG诱导后重组菌,采用Ni-NTA亲合层析柱纯化并柱上复性目的蛋白。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测A200711蛋白对H7402细胞的生长抑制作用。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-A200711,目的蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;SDS-PAGE及Western blot分析显示,相对分子量约22KD处出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲合层析柱获得了高纯度可溶性的A200711蛋白;H7402细胞增殖抑制率与A200711蛋白浓度存在量效关系,同时随作用时间的延长增殖抑制率也明显增加。结论成功克隆、表达并纯化了旋毛虫A200711蛋白。A200711蛋白可抑制H7402细胞的增殖,且呈现时效和量效关系,本研究表明旋毛虫A200711蛋白作为潜在的抗肝癌生物制剂有进一步研究的价值。
- 李慧萍刘学张馨月郭恒赵丽晶刘攀孙树民褚丽新刘娟刘明远王学林
- 关键词：旋毛虫抗肿瘤原核表达
