许昌声
- 作品数：174 被引量：670H指数：13
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省医学创新课题更多>>
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- 携带肾上腺髓质素基因腺病毒体外转染骨髓间充质干细胞及其蛋白的表达被引量：3
- 2011年
- 背景:肾上腺髓质素具有促进骨髓间充质干细胞增殖、生长及减少凋亡等作用。目的:观察携带肾上腺髓质素基因的腺病毒体外转染骨髓间充质干细胞及其蛋白的表达。方法:培养293A细胞,并扩增携带肾上腺髓质素基因的腺病毒(Ad-ADM),实验分为对照组、空载体组和Ad-ADM转染组,3组分别于细胞长满至50%～60%时加入等量的无血清L-DMEM、Ad-lacZ和Ad-ADM,噬斑法检测扩增后腺病毒的滴度;贴壁法体外分离、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞;Ad-GFP体外感染骨髓间充质干细胞后检测转染效率;RT-PCR检测Ad-ADM转染后肾上腺髓质素mRNA的表达。结果与结论:病毒扩增后噬斑试验测定Ad-ADM的病毒滴度为1.1×109pfu/mL。Ad-ADM感染骨髓间充质干细胞后,肾上腺髓质素mRNA的表达明显增加,对照组、空载体组未见ADMmRNA表达;量化结果表明其表达量从第1天开始逐渐增加,第7天达高峰,在11d时仍可检测其表达。提示腺病毒对骨髓间充质干细胞有较高的转染效率。感染Ad-ADM后,骨髓间充质干细胞可有效表达肾上腺髓质素。
- 林茂海苏津自蔡文钦郑礼裕许昌声王华军
- 关键词：肾上腺髓质素293细胞骨髓间充质干细胞腺病毒载体
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达及下游转录激活子3信号通路被引量：6
- 2012年
- 目的利用构建的血管紧张素转化酶（ACE）2慢病毒表达载体转染平滑肌细胞，探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）表达的影响。方法培养平滑肌细胞，并进行分组及干预：（1）空白对照组：仅加入无血清培养基。（2）慢病毒重组绿色荧光蛋白表达空载体（Lentiviral—GFP，GFP）组：加入感染复数（MOI）为10的Lentiviral—GFP空载体。（3）血管紧张素（Ang）Ⅱ组：加入终浓度为10^-2mol／L的AngU。（4）AngU＋慢病毒重组ACE2表达载体（Lentiviral—ACE2，ACE2）组：同时加入浓度为10^-2mol／L的AngII和MOI为10的Lentiviral—ACE2。（5）AngⅡ＋厄贝沙坦组：同时加入终浓度为10^-7mob/L的AngⅡ和厄贝沙坦。（6）AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组：同时加入终浓度为10。mol／L的AngⅡ和厄贝沙坦以及MOI为10的Lentiviral—ACE2。（7）ACE2组：仅加入MOI为10的Lentiviral—ACE2。将上述干预细胞提取RNA后运用实时PCR检测细胞ATlRmRNA的表达，Westernblot技术分别检测细胞ATlR蛋白表达，以及下游信号通路信号转导子和转录激活子3（STAT3）蛋白磷酸化水平。运用CCK-8试剂盒检测上述干预组的细胞增殖水平。结果（1）AnglI＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的ATIRmRNA表达均低于AngⅡ组（分别为0．39±0．02和0．24±0．01比I．80±0．08，P分别〈0．05和0．01）。（2）AngⅡ＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的ATIR蛋白表达均低于AngⅡ组（分别为0．83±0．07和0．52±0．07比1．10±0．13，P分别〈0．05和0．01）。（3）AngⅡ＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的STAT3蛋白磷酸化水平均低于AngⅡ组（分别为0．09±0．01和0．02±0．01比0．50±0．10，P分别〈0．05和0．01）。（4）AnglI＋ACE2组和An如＋ACE2＋厄贝沙坦组的细胞增殖水平均低于Angll组（分别为0．84±0．08和0．77±0．10比1．16±0．11，P分别〈0．05和0．01）。结论ACE2通过抑制ATIR和下�
- 龚晶婧卢卓强曹金龙许昌声王华军晋学庆
- 关键词：肽基二肽酶ASTAT3转录因子
- 自发性高血压大鼠血管结构与功能的观察被引量：4
- 1999年
- 观察１６周龄ＳＨＲ大鼠与同龄ＷＫＹ大鼠之间血管结构与功能的差异及其在高血压形成中的作用。用尾袖法测量大鼠动脉血压，动脉环实验测定主动脉与肠系膜动脉血管平滑肌的反应性，用肉眼数点计算法测定主动脉中膜腔壁厚度／管腔面积（Ｗ／Ｌ），图像分析仪摄像求积法测定肠系膜动脉Ｗ／Ｌ。结果：１６周龄ＳＨＲ大鼠血压明显高于ＷＫＹ大鼠（２８．２４±１．１２ｋＰａ与１７．１５±０．７５ｋＰａ，Ｐ＜０．０５）。ＳＨＲ大鼠主动脉和肠系膜动脉的Ｗ／Ｌ明显大于ＷＫＹ大鼠（０．３３±０．０３与０．２４±０．０５，Ｐ＜０．０５；及０．７５±０．０９与０．２６±０．０２，Ｐ＜０．０５）。硝普钠引起的ＳＨＲ大鼠血管舒张率明显低于ＷＫＹ，而去甲肾上腺素引起的ＳＨＲ大鼠血管收缩率明显高于ＷＫＹ。结果表明：ＳＨＲ大鼠阻力血管结构的改变可能是高血压形成的重要因素，ＳＨＲ大鼠血管功能改变与高血压形成密切相关。
- 许昌声王华军林志鸿
- 关键词：自发性高血压血管
- 人组织激肽释放酶基因转移对血管平滑肌细胞迁移的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨重组腺病毒介导的人激肽释放酶(hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)的血管平滑肌细胞(VSMCSHR)迁移的影响。方法自行构建携带目的基因hKLK1和强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的双顺反子重组腺病毒载体。采用组织贴块法培养SHR胸主动脉血管平滑肌细胞,接种第3～6代VSMCSHR于6孔板,分别加入含hKLK1重组腺病毒和对照病毒干预,3d后加入PDGF-BB诱导24h,采用改良Boyden微孔膜双槽法测定VSMCSHR迁移,并加入缓激肽受体B2特异性阻断剂Hoe140。RT-PCR法测定缓激肽B1受体、B2受体的mRNA表达。结果hKLK1基因转移可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR细胞迁移,抑制率为34.6%,且Hoe140干预不产生影响。PDGF-BB诱导的VSMCSHR缓激肽B2受体mRNA表达明显增加(P<0.001),而Hoe140可明显降低其表达(P<0.01)。结论重组腺病毒介导的hKLK1基因转移可抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR迁移,这一效应可能不通过B2受体途径介导。
- 余惠珍谢良地朱鹏立许昌声
- 关键词：基因转移血管平滑肌细胞细胞迁移缓激肽受体
- 肾上腺髓质素基因转染增强骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心室重构及心功能的影响被引量：7
- 2009年
- 目的:研究肾上腺髓质素(ADM)基因转染增强骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠心室重构及心功能的治疗作用。方法:贴壁法体外分离、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞,用X-gal染色测含ADM基因的重组腺病毒(Ad-ADM)对MSCs感染率,ELISA检测Ad-ADM转染后细胞上清液ADM的含量。通过结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型;以DAPI标记细胞通过心肌局部注射移植MSCs;采用生理记录仪测量大鼠的心功能,荧光显微镜观察移植细胞在心脏存活及分布,免疫组化检测ADM在心肌梗死区的表达及心梗区血管密度;天狼猩红染色检测胶原含量,用偏振光显微镜分析Ⅰ/Ⅲ型胶原比率。结果:重组腺病毒对MSCs的转染率与病毒感染复数(MOI)具有量效关系,MOI为150时细胞的感染率达95.4%;转染Ad-ADM后,MSCs可有效表达ADM,7 d时达到表达高峰,与对照组相比明显增加[(26.53±1.42vs1.34±0.08)ng/L,P<0.05],15 d后与空白对照组无差别[(2.20±1.44vs1.52±0.33)ng/L,P>0.05];在受体大鼠的心脏切片上有DAPI标记的移植细胞的存活;与对照组及其它组相比,ADM基因修饰的MSCs组心肌梗死区ADM的表达增加;与对照组比较,单纯细胞移植组心梗区新生血管密度增高(P<0.01);而与单纯MSCs移植组及单纯Ad-ADM注射组比较,ADM基因修饰的MSCs移植组梗死区血管密度增高更明显(P<0.05);单纯MSCs移植组能降低梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比率(P<0.01),并能改善左室功能;与单纯细胞组比较ADM基因修饰的MSCs移植组梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比率降低更明显(P<0.05),而左室功能改善更多。结论:ADM转染的MSCs移植可能通过局部ADM表达的增加,增强MSCs移植的血管新生作用及降低梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比率,从而增强单纯MSCs细胞移植改善心功能的作用。
- 林茂海苏津自许昌声
- 关键词：肾上腺髓质素重组腺病毒心室重构骨髓间充质干细胞移植
- 通心络对自发性高血压大鼠阻力血管功能和结构的影响被引量：8
- 2004年
- 目的 观察通心络对自发性高血压大鼠 (SHR)的血压、阻力血管功能和结构的影响。方法 3 0只 12周龄雄性SHR大鼠 ,随机分成 3组 :大剂量通心络组 (通心络1.5 g/kg·d-1) ;小剂量通心络组(通心络 0 .5 g/kg·d-1) ;SHR空白对照组 ,每组 10只。另选 10只同龄雄性正常血压WKY大鼠作为对照组。用无创法测定尾动脉收缩压及心率 ,至给药 12周处死。测定肠系膜动脉分支第三级血管壁 (中膜 ) /腔面积比 (W /L)。采用平衡记录仪记录离体的肠系膜一级动脉环对血管活性药物去甲肾上腺素和硝普钠反应的敏感性。结果 与SHR组相比 ,大小剂量通心络组均能在一定程度上抑制SHR血压升高 (P <0 .0 5 )。通心络组治疗后能使SHR大鼠的肠系膜三级血管的血管腔 /壁面积比 (L/W )减少 ,肠系膜动脉舒张敏感性及对NE收缩的敏感性与SHR组相比P <0 .0 5。结论 通心络可以抑制SHR阻力血管肥厚 ,具有改善血管的舒缩功能。
- 王华军谢良地姚恩辉许昌声
- 关键词：通心络自发性高血压血管功能肠系膜动脉
- siRNA干扰热休克蛋白27基因对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞骨架及迁移的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究靶向自发性高血压大鼠热休克蛋白27(HSP27)基因的小干扰RNA(siRNA)对血管平滑肌细胞(VSMC)骨架及迁移的影响。方法以携带siRNA的慢病毒感染VSMC,以FITC-鬼笔环肽标记F-actin,在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架的形态变化;采用改良的Boyden微孔膜双槽法进行细胞迁移实验。结果正常培养未使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的VSMC,细胞内无或仅存在少许无规则、散在分布的F-actin,经AngⅡ诱导后,VSMC内F-actin数量明显增加,纵向平行排列,且形成应力纤维丝。AngⅡ能够明显诱导VSMC细胞的迁移,pNL-HSP27-EGFP能明显抑制AngⅡ诱导的VSMC迁移,抑制率为40.0%(P<0.01)。结论靶向HSP27基因的siRNA能显著降低AngⅡ诱导的VSMC迁移,HSP27在细胞的迁移中起重要作用。
- 黄捷谢良地许昌声王华军
- 关键词：热休克蛋白27慢病毒血管平滑肌细胞细胞骨架
- AmgII、TGF-α和FN对高血压大鼠心肌成纤维细胞合成胶原的影响
- 观察血管紧张素Ⅱ(AmgII)、转移生长因子β1(TGF-β1）、洛沙坦(Losartan)、纤维粘连蛋白(FN)对培养SHR和WKY大鼠心股成纤维细胞(CFb)合成胶原的影响。
- 陈水龙谢良地许昌声
- 关键词：心肌成纤维细胞洛沙坦转移生长因子Β纤维粘连蛋白
- 文献传递
- RXRα激动剂蓓萨罗丁对STZ诱导APOE小鼠肝糖脂代谢调节蛋白FGF21表达的影响及其抗动脉硬化可能的机制
- 目的 观察RXRα激动剂蓓萨罗丁(Bexarotene,Bex)对链尿左菌素(STZ)诱导的APOE敲除小鼠的肝糖脂代谢调节蛋白纤维细胞生长因子21 (Fibroblast growth factor 21,FGF21)...
- 柴大军洪滢林金秀许昌声
- 关键词：脂代谢动脉硬化
- 自发性高血压大鼠主动脉血管功能的变化被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨自发性高血压大鼠 (SHR)血管舒缩功能变化及其可能机制。方法 以 32周龄SHR大鼠 (n =7)为研究对象 ,年龄、性别配对的WKY(n =7)大鼠作对照组。观察离体胸主动脉环对不同血管活性物质的舒缩反应。结果 SHR主动脉环对乙酰胆碱 (ACh)诱导的内皮依赖性舒张反应明显减弱 ;对ACh的内皮依赖性收缩反应明显高于WKY。L NAME加强ACh的收缩作用 ;对硝普钠 (SNP)的收缩反应在两组间无差别。结论 SHR大鼠存在内皮功能障碍 ,表现为内皮依赖性舒张作用减弱 ,其机制与内皮合成NO减少及内皮依赖性收缩作用增强有关。
- 徐尚华谢良地吴可贵许昌声王华军
- 关键词：自发性高血压大鼠
