谷春娇
- 作品数：9 被引量：4H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一种Exendin-4类似物
- 本发明属于基因工程制备活性肽领域，公开一种Exendin-4类似物Pro-Pro-Exendin-4(1-35)-Asp肽及其制备方法和应用。采用本实验室的融合表达制备技术平台，构建在大肠杆菌细胞内高效融合表达Pro-P...
- 李泰明谷春娇刘景晶葛晓宇张美由郭凯
- 文献传递
- 重组人胰高血糖素样肽-1类似物的制备及活性分析
- 2011年
- 通过重叠PCR的方法获得重组人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物PP-h[Gly8]GLP-1的目的基因片段,将该基因与融合表达载体pED连接,并在融合伴侣的N末端插入6×His标签,转入E.coli BL21(DE3),构建出重组GLP-1类似物融合表达菌。PP-h[Gly8]GLP-1通过Ni离子亲和色谱和酸水解等步骤分离纯化得到,其纯度大于90%,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量与理论分析结果一致。ICR小鼠经口给予耐血糖及血浆胰岛素测定的结果表明,PP-h[Gly8]GLP-1具有明显的降血糖活性和促胰岛分泌作用(P<0.01),为开发潜在的治疗糖尿病药物提供了理论基础。
- 李泰明马艳红徐舒刘涛谷春娇徐辰刘景晶
- 关键词：分离纯化生物活性2型糖尿病
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：2
- 2012年
- 目的构建糖类标记载体筛选克隆。方法以pPIC9K-βGl2为模板,通过PCR扩增得到全长的Bgl2基因片段,克隆至pET-28a载体,转化E.coli BL21(DE3),Cel-M9培养基筛选阳性克隆,经DNA测序分析,成功构建pET28a-Bgl2表达载体。SDS-PAGE显示,重组菌经IPTG诱导后表达了目的蛋白,其相对分子质量与预期结果相符。结果 PCR扩增得到Bgl2基因片段,SDS-PAGE显示蛋白以包涵体形式表达,克隆可用Cel-M9培养基筛选。结论用Cel-M9培养基筛选出阳性克隆为构建食品级载体奠定基础。
- 李泰明庄舰峰Jean Louis Didier MEKOO谷春娇邢芸刘景晶
- 关键词：黑曲霉Β-葡萄糖苷酶纤维二糖
- 人胰高血糖素相关肽-1类似物
- 本发明属于基因工程领域，公开两种人胰高血糖素相关肽-1的类似物的工程菌构建、表达、目的肽的制备方法。通过双酶切后插入目的序列，并在融合蛋白前端加入His标签，通过获得融合蛋白，用酸切割融合蛋白获得目的肽，等电点沉淀后再次...
- 李泰明马艳红刘景晶徐辰刘涛谷春娇
- 文献传递
- 一种Exendin-4类似物
- 本发明属于基因工程制备活性肽领域，公开一种Exendin-4类似物Pro-Pro-Exendin-4(1-35)-Asp肽及其制备方法和应用。采用本实验室的融合表达制备技术平台，构建在大肠杆菌细胞内高效融合表达Pro-P...
- 李泰明谷春娇刘景晶葛晓宇张美由郭凯
- 一种Exendin-4类似物及其制备方法和应用
- 本发明属于基因工程制备活性肽领域，公开一种Exendin-4类似物Pro-Pro-Exendin-4-Asp肽及其制备方法和应用。利用本实验室的融合表达制备技术平台，构建在大肠杆菌细胞内融合表达Pro-Pro-Exend...
- 李泰明谷春娇李苹苹平菡樊妮刘景晶屠致力冯如杰
- 文献传递
- 人胰高血糖素样肽-2类似物基因串联体构建及原核细胞表达被引量：2
- 2011年
- 利用同尾酶法构建人胰高血糖素样肽-2类似物{PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)}基因串联体重组质粒,实现目的基因在大肠杆菌中高效表达。通过PCR扩增获得PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)基因片段,利用同尾酶BamHⅠ和BclⅠ产生相同的粘性末端,经连接、转化、筛选等操作构建其基因串联体。经DNA测序分析,成功构建PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)的二、四、六、八拷贝基因串联体。SDS-PAGE显示,各重组菌经D-乳糖诱导后均表达目的融合蛋白,其相对分子质量与预期结果相符,目的肽含量并非随串联个数增加而明显增加,改变融合伙伴后,目的肽的表达量从0.106 g/L提高到0.372 g/L,为大量制备和纯化PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)奠定了基础。
- 李泰明刘涛张美由马艳红周哲谷春娇庄舰峰刘景晶
- 关键词：串联体同尾酶
- Exendin-4类似物1的分离纯化与体内生物活性研究
- 李泰明张美由刘景晶谷春娇樊妮李丽葛晓宇李哲哲王丹马艳红刘涛
- Exendin-4类似物的克隆、表达与体内生物活性检测
- 2012年
- 为研究Exendin-4类似物的克隆,融合表达及在体内的生物活性,在pED载体融合伴侣序列中插入利于下游分离纯化的序列成为5#载体,将Exendin-4类似物基因与5#载体中的融合伴侣基因通过酸水解位点连接,转化至E.coli BL21中并诱导表达融合蛋白,酸水解将目的肽与融合伴侣分开后,经阴离子交换树脂分离得到目的肽。6周～8周正常雄性ICR小鼠皮下注射Exendin-4类似物后,口服糖耐量实验检测在不同时间段小鼠血液中葡萄糖及胰岛素含量的变化。结果表明:融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,Exendin-4类似物纯度达91.8%。Exendin-4类似物的活性与对照组相比,具有显著的降低血糖和显著促进胰岛素分泌的活性(P<0.01)。
- 李泰明谷春娇葛晓宇李哲哲王丹马艳红刘涛张美由李丽刘景晶
- 关键词：生物活性血糖胰岛素
