贺庆芝
- 作品数：54 被引量：125H指数：6
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金湖南省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的采用p GEX-6p载体原核表达沙眼衣原体(Ct)巨噬细胞感染增强因子(MIP),进一步纯化后免疫小鼠,评价该蛋白作为Ct疫苗候选抗原的可行性。方法聚合酶链反应技术从Ct D型基因组扩增MIP编码基因,构建p GEX-6p-1/MIP重组质粒并转化大肠杆菌,IPTG诱导重组菌表达GST-MIP融合蛋白,Pre Scission蛋白酶切除GST标签后免疫Balb/c小鼠,ELISA法检测MIP的免疫学特性。结果 MIP编码基因正确插入p GEX-6p-1载体,核苷酸序列与Gen Bank登陆的Ct D型MIP基因完全一致;重组融合蛋白在E.coli中稳定高效表达,酶切后纯度达90%以上;MIP蛋白具有良好的免疫原性,诱导小鼠产生高滴度特异性Ig G型抗体,亚型以Ig G2a为主;MIP免疫组小鼠脾淋巴细胞受MIP蛋白刺激,分泌高水平IFN-γ。结论重组表达的Ct MIP蛋白具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生高特异性的体液及细胞免疫应答,可进一步探讨其作为Ct亚单位疫苗的可行性。
- 彭昕珂彭波陈超群贺庆芝陈丽丽孙豫辉陆春雪
- 关键词：沙眼衣原体MIP免疫原性
- 鹦鹉热嗜衣原体CPSIT_0018融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其在Hela细胞中的定位被引量：1
- 2014年
- 目的构建鹦鹉热嗜衣原体(Cps)CPSIT_0018原核表达载体,表达并纯化该融合蛋白,观察其在感染的Hela细胞中的定位。方法采用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT_0018基因,并构建pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT_0018融合蛋白表达,进一步用该融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,间接免疫荧光法分析His-CPSIT_0018蛋白在Hela细胞中的分布特征。结果成功构建了pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;在Cps感染的Hela细胞中CPSIT_0018的分布与主要外膜蛋白MOMP相似,而与包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同。结论成功克隆表达了His-CPSIT_0018,该蛋白定位在Cps包涵体内。
- 贺庆芝曾怀才陆春雪胡艳群陈芝喜王川吴移谋
- 关键词：克隆表达细胞定位
- PBL在《细胞生物学》教学中的应用被引量：1
- 2011年
- 细胞生物学的传统教学模式由教师通过讲授、板书及教学媒体的辅助,将教学内容灌输给学生。在此过程中,老师主宰整个教学过程,而学生被动接受老师灌输知识。其主要的弊端是,课堂教学与实践应用相脱节,造成学生"高分低能"、缺乏创新能力,不利于其综合素质的发展。基于问题的学习(Problem-based Learning,PBL)教学模式对此提出了一个有效的解决方案。
- 贺庆芝郑济芳易岚李国庆秦志峰
- 关键词：细胞生物学PBL教学
- 与云南烟草丛顶病害病原相关的病毒粒体性质的初步研究
- 2003年
- 目的 对与云南烟草丛顶病害病原相关的病毒粒体进行初步定性。方法 应用电子显微镜、PAGE -SDS电泳和甲醛变性电泳。结果 发现该病毒为一直径在 2 6nm左右的球状粒体 ,病毒外壳由 1种分子量在 5 5kDa左右的蛋白组成 ,病毒壳内核酸由 3种RNA组成。
- 祖旭宇陈海如秦志峰游绍阳刘运莲彭翠英贺庆芝刘俊易岚殷杰
- 关键词：RNA
- CPSIT_0851重组蛋白免疫原性检测及其在Hela细胞中的定位
- <正>目的构建鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophilapsittaci,Cps)CPSIT_0851原核表达载体,表达并纯化CPSIT_0851重组蛋白,检测其免疫原性,并观察其在Cps感染的Hela细胞中的定位。方法...
- 贺庆芝吴移谋
- 文献传递
- 鹦鹉热嗜衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白的预测、筛选及表达时相研究
- 目的：预测、筛选鹦鹉热嗜衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白基因，并研究其在感染了Cps的Hela细胞中的表达时相情况。方法：通过生物信息学分析结合相关文献报道，预测Cps T3SS效应蛋白编码基因，原核表达纯化GST-预测基因融...
- 黎知青刘良专贺庆芝宋颖伍海英彭菁吴移谋
- 关键词：分泌系统蛋白表达致病机制
- 文献传递
- 鹦鹉热嗜衣原体CPSIT-0531融合蛋白原核表达载体的构建、表达及免疫原性检测被引量：1
- 2014年
- 目的构建鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,Cps)CPSIT-0531原核表达载体,表达并纯化该融合蛋白,检测其免疫原性。方法采用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT-0531基因,并构建pET30a-CPSIT-0531原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT-0531融合蛋白表达,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA分析His-CPSIT-0531蛋白的免疫原性。结果成功构建了pET30a-CPSIT-0531原核表达载体,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;GST-CPSIT-0531免疫小鼠后,ELISA检测免疫小鼠的血清特异性抗体效价为1:640 000。结论成功克隆表达了His-CPSIT-0531,该蛋白具有较好的免疫原性。
- 贺庆芝曾怀才陆春雪王川吴移谋
- 关键词：克隆表达免疫原性
- 鼠衣原体在制备抗溃疡性结肠炎药物中的应用
- 本发明通过实验表明，鼠衣原体(Chlamydia muridarum，CM)能拮抗右旋葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的野生型小鼠溃疡性结肠炎，提示CM具有抗溃疡性结肠炎的作用，可...
- 贺庆芝
- 文献传递
- 红鲫Sox4基因保守区的克隆与序列分析
- 2007年
- 目的为进一步全面理解鱼类Sox基因的复制与进化,从红鲫基因组DNA中克隆Sox基因HMG盒保守区。方法参照Sox基因HMG盒保守区的氨基酸序列设计一对兼并引物,以红鲫基因组DNA为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行亚克隆和测序。结果获得2个序列(序列Ⅰ和序列Ⅱ)。同源性比较显示,序列Ⅰ和序列Ⅱ编码的氨基酸序列均与小鼠Sox4的同源性最高,分别为88.9%和90.7%;氨基酸序列排序比较,序列Ⅰ和序列Ⅱ也都与人Sox4的同源性最高。结果表明,红鲫序列Ⅰ和序列Ⅱ均是小鼠、人Sox4基因的直向同源基因,分别命名为RcSox4-1和RcSox4-2。结论Sox4基因在红鲫进化过程中发生了基因复制,Sox4基因复制可能发生在红鲫、斑马鱼及草鱼分化之前。
- 龙黎南贺庆芝刘运莲杨露青殷杰郑济芳
- 关键词：红鲫SOX基因基因复制进化
- 姜黄素致HepG-2细胞的凋亡作用及对bcl-2／bax表达的影响被引量：14
- 2010年
- 目的:研究姜黄素致人肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及bax与bcl-2mRNA表达的变化,为姜黄素的临床应用提供实验依据。方法:当HepG-2细胞处于对数生长期时,分别加入不同浓度(0、2.5、5、10、20、30mg/L)的姜黄素处理48h,MTT试验检测细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测bax和bcl-2mRNA的含量。结果:随着姜黄素浓度的增高,其对HepG-2细胞的抑制作用逐渐增强。当姜黄素浓度为30mg/L时,其抑制率达到(58.23±2.56)%,IC50=25.44mg/L,而细胞的凋亡率由对照组的(1.1±0.3)%上升到(38.4±1.5)%;bax和bcl-2分别是对照组的(5.00±0.55)倍和(0.28±0.05)倍。结论:姜黄素能抑制HepG-2细胞的生长,诱导细胞凋亡,它的分子机制可能是上调bax基因和下调bcl-2基因的表达。
- 贺庆芝曾怀才于伟霞李国庆易岚
- 关键词：姜黄素凋亡BAXBCL-2
