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赵国芬

作品数:67 被引量:170H指数:7
供职机构:内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
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67 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
应用融合标签技术提高乳糖酶在毕赤酵母中的分泌表达被引量:2
2012年
双歧杆菌来源的乳糖酶具有催化效率高,安全性好等优点,在乳糖水解和低聚半乳糖生产等领域中应用潜力巨大。以来源于动物双岐杆菌(Bifidobacterium animalis B106)的乳糖酶基因bg42-106m为对象,将4种标签蛋白基因cherry、cbd(cellulose-binding domains)、gst(glutathione S-transferase)、mbp(maltose-bindingprotein)分别与bg42-106m基因连接,然后以pPIC9为载体构建融合蛋白重组表达载体,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达。结果表明,当融合Cherry标签蛋白基因后,可显著提高bG42-106M在毕赤酵母中的蛋白分泌表达量,培养基中乳糖酶活力可达到7.42 U/mL。与未融合标签的野生型菌株相比,乳糖酶bG42-106M的分泌表达量提高了290%。而其他3种标签蛋白没有提高bG42-106M的分泌表达量。
聂春明宁晓彦张宇宏樊晓虎赵国芬张伟
关键词:乳糖酶双歧杆菌毕赤酵母
产CLA植物乳杆菌P8的离子束诱变与筛选被引量:5
2011年
本实验以植物乳杆菌P8为出发菌株,采用N+离子注入的方法进行诱变处理,注入能量为50keV,注入剂量为30、50、70、901、10、1301、50、1701、90×2.6×1013N+/cm2。结果显示,菌体的存活率随离子注入剂量的增加呈"马鞍型"曲线,"鞍脊"出现在70×2.6×1013N+/cm2~110×2.6×1013N+/cm2之间,此时菌体的存活率在21%~50%之间。综合考虑存活率、总突变率和突变幅度等因素,推荐90×2.6×1013N+/cm2作为离子注入植物乳杆菌P8的适宜诱变剂量。此菌株经N+离子束诱变,得到产共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)正突变菌株共36株,负突变菌株共66株,其中最高产CLA正突变菌株CLA浓度为0.2751mg/ml,转化率为27.51%。最低产CLA负突变株CLA浓度为0.0330mg/ml,转化率为3.30%。菌株的遗传稳定性正在进一步鉴定,若可以稳定遗传,将为研究植物乳杆菌P8产CLA的分子机理和生产出营养价值更高的保健食品奠定基础。
慈志敏赵国芬陈剑包秋华张和平
关键词:高产菌株
浑善达克沙地榆树生长状况与根际土壤微生物的关系研究被引量:4
2017年
从浑善达克沙地三个不同地点、三种不同立地类型区采集榆树根际土壤样品,在实验室对土壤中微生物进行培养、分离,力求探索榆树疏林的生长状况与土壤微生物之间的关系。结果是:总体上讲三大类微生物细菌、放线菌、真菌数量上差异显著,平均值分别为细菌46.84(10~6·g^(-1))、放线菌34.69(10~6·g^(-1))、真菌5.49(10~6·g^(-1))。在榆树的生长状况较好的丘间地和阴坡上,三大类微生物细菌、放线菌、真菌数量比榆树生长较差的沙丘阳坡上明显多;细菌在丘间地上、阴坡、阳坡上的数量分别为59.46(10~6·g^(-1))、42.82(10~6·g^(-1))、38.25(10~6·g^(-1))。榆树各项生长指标均较高的沙地中部正蓝旗,土壤三大类微生物数量明显多于西部的正镶白旗和东部的克什克腾旗,细菌数量在正蓝旗、正镶白旗、克什克腾旗分别为59.87(10~6·g^(-1))、49.10(10~6·g^(-1))、41.54(10~6·g^(-1))。由此可见,榆树的生长状况与微生物的数量呈正比关系。
马媛李钢铁梁田雨麻云霞赵国芬姚庆智潘羿壅王少雄
关键词:土壤微生物数量微地形浑善达克沙地
癌症早期诊断纳米传感器
张峰赵国芬
癌症的早期诊疗长期以来一直是医学领域试图攻克的难题,功能纳米颗粒在生物医学分析中的迅猛发展让人类重新树立了战胜癌症的信心。发展超灵敏的蛋白质检测技术对于阐明疾病发生的分子机制以及疾病的早期诊断治疗具有极其重要诊断价值。 ...
关键词:
关键词:癌症诊断纳米传感器生物医学
利用PCR介导的基因定点突变技术构建L.plantarumP-8亚油酸异构酶突变体被引量:1
2015年
以植物乳杆菌P-8(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum P-8)亚油酸异构酶为研究对象,通过http://swissmodel.expasy.org/,http://smart.embl-heidelberg.de/和vecter NTI等在线工具与软件,对亚油酸异构酶进行生物信息学分析并预测与酶活性相关的位点,预测亚油酸异构酶的3个氨基酸可能为第68位甘氨酸、第107位精氨酸和第172位组氨酸。设计1对含突变的引物,以重组质粒p QE30-LAI为模板,利用PCR介导的定点突变技术构建突变体。经序列比对表明,成功构建了突变体G68A(甘氨酸突变为丙氨酸)、R107L(精氨酸突变为亮氨酸)和H172P(组氨酸突变为脯氨酸),为进一步研究LAI的结构和功能奠定了基础。
贾丽赵国芬李晨曦张和平包秋华
关键词:共轭亚油酸亚油酸异构酶必需氨基酸定点突变
植物乳杆菌P8产共轭亚油酸条件的优化被引量:5
2012年
以植物乳杆菌P8菌株为研究对象,系统研究了发酵条件对共轭亚油酸生成的影响。分别研究了培养条件和培养基成分对共轭亚油酸产量的影响。通过单因素和正交试验表明:植物乳杆菌P8产共轭亚油酸的最佳条件为:培养时间为22 h、亚油酸(LA)添加量为0.9 mg/mL、接种量为1.5%、氮源采用2 g/L的胰蛋白胨,碳源采用3 g/L的葡萄糖。
杜美婷陈慧泽赵国芬
关键词:植物乳杆菌共轭亚油酸发酵条件
马铃薯卷叶病毒中国株(PLRV-Ch)ORF2a基因特征分析被引量:1
2002年
According to the genomic sequence of foreign four PLRV isolates, three pairs of specific primer were designed and synthesized.The cDNA of the ORF2a gene of PLRV-Ch was synthesized by reverse transcription and followed by Polymerase Chain Reaction amplication.The synthesized 3′and 5′cDNA fragment of the PLRV-Ch ORF2a gene were inserted into pUC19 and cloned in E.coli JM109 and were sequenced respectively.The middle cDNA fragment were directly sequenced.The homology of nucleotide sequence of PLRV-Ch compared with PLRV-S (Scotland,UK),PLRV-N(Netherlands),PLRV-A(Australia) and PLRV-C(Canada) were 98.96%、98.70%、94.79%、97.5%,the homology of putative amino acid sequence are 97.97%、97.97%、89.69%、95.94%.In 3′region of ORF2a gene a slippery sequence for-1 frameshift and its downstream “stem-loop"or“pseudoknot"and upstream nucleotide sequence repeats were found.Authors suggested that the nucleotide repeat sequences charateristic for PLRV could form a tight successively folded complementary double stranded regions and hairpins.This structure possibly has something to do with-1 frameshift.The amino acid sequence of C terminus region of 70kD protein translated by motif Ⅳ has a protease charateristic motif and a helicase motif Ⅳ.The amino acid sequence of polypeptide translated by ORF2a gene undergoing frameshift has a single-stranded nucleic acid binding protein-like charateristic motif.
赵国芬张鹤龄哈斯阿古拉
关键词:基因克隆
植物乳杆菌P-8羟基脂肪酸脱氢酶的克隆表达及活性鉴定被引量:3
2019年
以植物乳杆菌P-8的基因组DNA为模板扩增出其羟基脂肪酸脱氢酶基因,对其进行生物信息学分析,结果表明该基因共编码286个氨基酸,蛋白质理论分子质量约为32 k Da,理论等电点为5. 15,不含跨膜区,是1个亲水性的细胞质蛋白。Ser、Thr、Tyr磷酸化位点个数分别为3、3、7。蛋白质的二级结构主要构成方式为α螺旋、无规则卷曲和β折叠。将此基因连接到p ET-28a(+)质粒载体中构建重组质粒p ET28a-DH,并转化入大肠杆菌E. coli Transetta (DE3)中获得重组大肠杆菌。重组菌在16℃条件下,经0. 1 mmol/L IPTG诱导16 h有可溶性表达,经Western Blot验证确定为重组羟基脂肪酸脱氢酶。通过镍柱亲和层析,得到纯化的重组酶。重组酶经初步活性检测,结果显示重组酶可以转化10-羟基-顺-12-十八碳烯酸为10-氧代-顺-12-十八碳烯酸,本研究为进一步探明植物乳杆菌P-8转化共轭亚油酸的机制奠定了基础。
赵彤彤赵微王丹赵国芬刘扬张和平包秋华
关键词:共轭亚油酸
嗜酸乳杆菌的亚油酸异构酶基因克隆及其pMG36e表达载体的构建
2010年
以嗜酸乳杆菌基因组为模板,对亚油酸异构酶基因进行PCR,PCR产物克隆到pMD-19T质粒中,经菌落PCR、酶切分析和DNA测序鉴定克隆成功后,亚克隆入乳酸菌表达质粒pMG36e,构建乳酸菌表达载体pMG36e-LAI并转化到大肠杆菌DH5α中,经菌落PCR和酶切分析初步证明表达载体pMG36e-LAI构建成功。该研究为利用工程菌工业化生产高产量、高活性亚油酸异构酶制剂来生产CLA奠定基础。
郎建华赵国芬李志刚郑婷包秋华
关键词:亚油酸异构酶基因克隆嗜酸乳杆菌
A facile method to build a proton nanosensor with neutral to basic pH sensitive range
Bio-nanosensors(Bio-NSs)have attracted much attention recently due to their uniqueproperties.Among allof the b...
钟睿博刘雨双张萍赵国芬魏建民张峰
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