赵晶晶
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
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- 日本血吸虫源性TGF-β1的鉴定
- 研究背景日本血吸虫病仍是严重的人畜共患病。转化生长因子β(Transform growth factorβ1,TGF-β)与其受体结合后可影响细胞的发育并起免疫抑制作用,同时TGF-β1与肝纤维化(包括晚期血吸虫病的肝纤...
- 李孜朱郇悯赵晶晶陈姗麦璟莹陈晓湘马长玲黄俊
- 关键词：转化生长因子Β1
- 文献传递
- 重组日本血吸虫FKBP12基因的酶活性及其转录水平鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的对日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)FK506结合蛋白12(FKBP12)进行肽基脯氨酸顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase,PPIase)活性鉴定,并比较它与26 000 Mr的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)基因在成虫、尾蚴和虫卵的转录水平。方法从成虫RNA中RT-PCR扩增SjFKBP12基因,将其克隆入pGEX-4T-1载体中,诱导表达重组融合蛋白,经纯化后进行PPIase活性测定。利用RT-PCR半定量分析SjFKBP12基因与Sj26GST基因的转录水平。结果将SjFKBP12基因成功克隆入pGEX-4T-1载体中后,表达、纯化的重组融合蛋白有PPIase活性。SjFKBP12在尾蚴与虫卵期的转录水平相仿,都高于Sj26GST基因,是成虫期转录水平的1.5倍左右。结论成功鉴定了重组SjFKBP12酶活性,SjFKBP12在尾蚴和虫卵期较高的转录水平,为将其进行疫苗等研究提供了依据。
- 麦璟莹朱郇悯马长玲陈晓湘赵晶晶陈姗李孜
- 关键词：PPIASE
- 日本血吸虫TβRII样基因胞外段的克隆、表达及初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的获得日本血吸虫TGF-β受体II(TβRII)样基因的cDNA完整序列,克隆、原核表达其胞外段蛋白序列,并进行初步免疫学分析。方法应用RACE方法获得SjTβRII样基因cDNA全长序列,构建其胞外段(即N端)原核表达载体,在大肠埃希菌中IPTG诱导表达,表达产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。纯化重组蛋白并免疫大鼠制备抗血清,应用Western Blotting方法初步鉴定重组蛋白。结果获得日本血吸虫SjTβRII样基因的cDNA全长序列,为2283bp,编码760个氨基酸,其中胞外段长531bp,编码177个氨基酸。构建的重组质粒在大肠埃希菌中成功表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性和抗原性。结论首次获得日本血吸虫TβRII样基因的cDNA全长序列,其胞外段可在原核表达系统中获得具有免疫原性和抗原性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
- 陈姗马长玲高志岩麦璟莹赵晶晶朱郇悯李小敏李孜
- 关键词：日本血吸虫克隆基因表达
- IL-12对BALB/c小鼠Th17细胞的分化的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:观察细胞因子IL-12对Th17细胞分化的影响。方法:小鼠脾淋巴细胞经抗CD3单克隆抗体(mAb)和不同浓度的重组小鼠IL-12刺激,3d后使用ELISA方法观察培养物上清液中IL-17的产生情况。并使用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞术观察CD3mAb和重组小鼠IL-12刺激对Th1和Th17细胞分化的影响。结果:Th17细胞不分泌IFN-γ、IL-5、IL-10等细胞因子,不表达Foxp3,是一个独立的细胞亚群。不同浓度的重组小鼠IL-12可以诱导抗CD3mAb的T细胞分泌IFN-γ,并向Th1细胞方向分化。同时,IL-12可以抑制活化的T细胞分泌IL-17,抑制T细胞向Th17细胞分化。结论:IL-12可以抑制Th17细胞的分化。
- 黄俊赵晶晶李剑李孜
- 关键词：T淋巴细胞IL-12TH17细胞
- Th17细胞的分化与临床研究被引量：2
- 2008年
- 近年来，研究发现机体的免疫系统中还存在着一种新的不同于Th1、Th2和Treg的CD4^＋T细胞—Th17细胞。Th17细胞具有独立的分化、发育过程，主要分泌前炎性细胞因子IL-17，在风湿性关节炎、实验性变应性脑炎等自身性免疫性疾病，曼氏血吸虫感染，某些病毒、细菌等感染性疾病以及肿瘤疾病中起着重要的调节作用（Weaver CT，
- 赵晶晶黄俊李孜
- 关键词：CD4^+T细胞前炎性细胞因子风湿性关节炎实验性变应性IL-17
- 日本血吸虫TGF-β1成熟肽编码序列的克隆、表达及其转录水平
- 2008年
- 目的获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)成熟肽基因的DNA,进行原核克隆和表达,并比较它与Sj26kd的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)在成虫和虫卵期的转录水平。方法根据美国国立生物信息学中心(NCBI)上登录的小鼠TGF-β1基因的全长序列,设计两条位于保守区的寡核苷酸作为引物,利用RT-PCR从日本血吸虫成虫的mRNA中扩增SjTGF-β1基因的部分序列,并利用生物信息学进行分析和鉴定。克隆SjTGF-β1成熟肽基因的cDNA到原核表达载体pGEX-6p-3,将重组载体转化大肠杆菌BL21株并诱导表达。利用RT-PCR半定量分析SjTGF-β1基因与Sj26GST基因在成虫和虫卵期的转录水平。结果成功获得并构建了SjTGF-β1成熟肽基因的原核表达载体。融合表达后的重组融合蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为35000,与目的基因编码蛋白的预测分子量相符。SjTGF-β1在成虫与虫卵期的转录水平都低于Sj26GST基因,但虫卵期的转录水平比成虫高。结论SjTGF-β1成熟肽基因的获得为其编码序列全长的获得奠定了基础;重组融合蛋白的成功表达为进一步的功能研究提供保障;虫卵期该基因的转录水平高提示该基因在血吸虫虫卵与宿主的相互作用中可能具有一定的作用。
- 朱郇悯麦璟莹赵晶晶马长玲陈晓湘张雪雁杨英张惠球李孜
- 关键词：日本血吸虫
- 日本血吸虫感染BALB/c小鼠脾脏细胞学的变化被引量：7
- 2009年
- 目的观察BALB/c小鼠感染日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)6～8周后脾脏细胞学的改变情况。方法用日本血吸虫尾蚴腹贴法建立日本血吸虫感染的小鼠模型。6～8周后观察肝脏、脾脏大小,称重;做脾脏淋巴细胞计数;用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞的大小、密度和T、B细胞分类以及Th细胞亚群情况;用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)所诱导的特异性抗体IgG的产生情况。结果日本血吸虫感染BALB/c小鼠6～8周后,脾脏体积明显增大,重量增加,细胞数量明显增多。流式细胞仪检测发现脾脏中出现一群体积明显增大的细胞群,该群细胞表达少量的CD4、CD8、CD19和DX-5分子;Th1/Th2轴发生偏移,Th17细胞数量增多;ELISA结果表明血清中SEA特异性抗体IgG水平明显升高。结论日本血吸虫感染的BALB/c小鼠脾脏出现明显的细胞学改变,尤其是Th1细胞数目下降,浆细胞、Th2细胞及Th17细胞数目增多,为研究日本血吸虫感染后期虫卵肉芽肿形成的免疫病理机制奠定了基础。
- 赵晶晶黄俊麦璟莹朱郇悯李孜
- 关键词：日本血吸虫脾脏淋巴细胞亚群
