邵陆宁
- 作品数:4 被引量:12H指数:1
- 供职机构:北京大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- CMTM5:一个新的潜在抑癌基因
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- 邵陆宁刘雅楠王彧李婷张培孙嘉明韩文玲马大龙
- 文献传递
- 抗CMTM4多克隆抗体的制备、纯化和鉴定被引量:11
- 2008年
- 目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能。方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联。其中第1、2、3条多肽为3种剪接体共有,混合后免疫家兔,制备Ab1;而第4条多肽为CMTM4-v1所特有,单独免疫家兔,制备Ab2。ELISA法检测抗体效价。免疫亲和层析法纯化后,进行West-ern blot和免疫组织化学检测,鉴定这2种抗体的特异性与适用范围。结果:得到兔抗人CMTM4多肽抗体Ab1和Ab2,效价分别达1∶105和1∶106。纯化后的Ab1用于Western blot可特异识别超表达的CMTM4-v1和v2,并可用于免疫组织化学实验;而Ab2仅可用于Western blot,特异性识别超表达的CMTM4-v1。Ab1还可特异识别小鼠内源性Cmtm4。结论:用多肽免疫家兔制备的2种抗CMTM4抗体不仅具有较高的效价以及特异性,并且Ab1还可以特异识别小鼠Cmtm4,为CMTM4的功能研究提供了有力的支持。
- 李婷郭晓欢王彧Markus Plate邵陆宁宋泉声马大龙韩文玲
- 关键词:多肽抗体
- CMTM3在单核细胞来源的树突状细胞中的表达研究
- CKLFSF(Chemokine-like Factor Super Family,趋化素样因子超家族)是我室于2003年在国际上首次报道的一个新基因家族。在人类,该家族包括9个成员,即:CKLF(Chemokine-l...
- 邵陆宁莫晓宁李婷王彧马大龙韩文玲
- 文献传递
- 鼠抗人CMTM7单克隆抗体的制备和鉴定被引量:1
- 2008年
- 目的:制备鼠抗人CMTM7(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 7)蛋白的单克隆抗体,探讨CMTM7蛋白的分子结构和生物学功能。方法:通过生物信息学对CMTM7的蛋白序列进行分析,选取了3段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,混合后免疫Balb/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行常规融合,间接ELISA方法进行筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗CMTM7蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用Westernblot、免疫荧光以及免疫细胞化学等方法对其特性进行鉴定。结果:成功地建立了2株稳定分泌抗CMTM7蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为MC9和2C9,其免疫球蛋白亚类均为IgG1。MC9单抗识别的抗原表位位于CMTM7氨基酸残基163~175区域(CMTM7163-175),可用于Western blot、免疫荧光和免疫细胞化学分析(immunocytochemistry,ICC)。2C9单抗识别的抗原表位位于CMTM7氨基酸残基19~44区域(CMTM719-44),该单抗只能用于Westernblot分析。初步的功能研究提示,CMTM7蛋白在植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)活化早期的外周血淋巴细胞中表达上调。结论:获得了特异性好、能够识别不同抗原表位以及不同用途的鼠抗人CMTM7蛋白的单克隆抗体,为研究CMTM7蛋白的分子结构以及功能特性奠定了基础。
- 许兰俊张婷邵陆宁宋泉声韩文玲陈英玉
- 关键词:趋化因子类抗体单克隆肽类杂交瘤