邹俊涛
- 作品数：51 被引量：95H指数：6
- 供职机构：中山大学中山医学院人体解剖学教研室更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 髂内动脉及其分支的观察被引量：1
- 2001年
- 邓兆宏陈家强邹俊涛
- 关键词：髂内动脉输尿管
- 新生期小鼠卡介苗接种后免疫因子的增龄性变化被引量：4
- 2013年
- 目的检测卡介苗免疫后小鼠脑组织匀浆液和血清中细胞因子的变化,为进一步研究新生期卡介苗接种影响小鼠中枢神经系统神经发生的分子机制研究做准备。方法实验分1周、2周、3周3个时间点,将新生24 h内的SPF级C57BL/6小鼠随机分为卡介组和对照组,每组12只,分别在新生24 h内背部皮下注射卡介苗和PBS。分别在生后1周、2周、3周采用摘眼球法采血,之后冰上无菌取海马组织并匀浆。用ELISA酶联免疫吸附法,分别测各时间点各实验组小鼠脑组织匀浆和血清中的IL-1β、IL-4、IL-10和TNF-α含量。结果 (1)与对照组相比,接种后1周、2周、3周时,卡介组小鼠海马中细胞因子IL-4和IL-10均多于对照组(P<0.05),血清中IL-4多于对照组(P<0.05);IL-10在第1周和第2周多于对照组(P<0.05)。与对照组相比,接种后1周、2周、3周时,卡介组小鼠海马中细胞因子IL-1β和TNF-α均少于对照组,血清中TNF-α少于对照组;IL-1β在第1周和第2周于对照组(P<0.05)。(2)同一时间点海马中的细胞因子含量远多于血清中含量。(3)随时间的推进,海马和血清中IL-4和IL-10有降低趋势;而小鼠海马和血清中IL-1β和TNF-α有增加趋势。结论新生期接种卡介苗成功后,可致小鼠海马和血清中的细胞因子浓度发生动态改变:与对照组相比,海马和血清中IL-4和IL-10的含量升高,且随时间有下降趋势,但IL-1β和TNF-α的含量降低,且随时间有增加趋势。
- 孙安邦邹俊涛杨俊华李清清祁方窻杨扬姚志彬
- 关键词：卡介苗细胞因子海马
- Aβ_(42)及GM-CSF双基因重组腺病毒的构建和免疫原性
- 2012年
- 目的构建含有β-淀粉样蛋白(Aβ42)及核糖体进入位点(IRES)引导的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)双表达重组腺病毒疫苗。方法 PCR法扩增带有IgGк轻链信号肽序列的Aβ42基因、IRES基因和小鼠GM-CSF基因,定向克隆于穿梭质粒pAdTrack-CMV中。通过与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在细菌内同源重组形成重组腺病毒质粒Ad-Aβ42-IRES-GMCSF,转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(AD-Aβ42)。重组腺病毒经氯化铯密度梯度离心纯化后感染293细胞及Hela细胞,用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测Aβ42及GM-CSF在细胞内和培养液中的分泌表达。免疫动物鉴定其免疫原性。结果 pAdTrack-Aβ42-GMCSF测序结果和预期一致,纯化的AD-Aβ42感染Hela细胞后,免疫细胞化学证实Aβ42基因在Hela细胞内表达。AD-Aβ42感染293细胞后,ELISA检测培养上清中Aβ42含量为(159.87±33.26)ng/mL,GM-CSF含量为(205.45±38.20)ng/mL。免疫动物能诱导机体产生高滴度的抗Aβ抗体。结论成功制备了AD-Aβ42,核糖体进入位点(IRES)成功引导的GM-CSF的表达,感染细胞证实其呈分泌表达,接种动物能诱导高滴度抗Aβ抗体。为老年性痴呆(AD)的基因治疗做好铺垫。
- 何芬靳晓宇邹俊涛牛道立杨俊华魏旋李建锋姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样蛋白重组腺病毒
- Aβ_(42)重组多价DNA疫苗的构建及诱导Aβ抗体的产生被引量：7
- 2005年
- 目的:构建β-淀粉样蛋白(Aβ42)的多价重组DNA疫苗,确定是否诱导较高滴度Aβ抗体的产生.方法:PCR法从Tg2576转基因鼠基因组DNA中扩增人Aβ42基因片段;在Aβ42基因的5′端引物延伸连接IgGк轻链信号肽序列;利用GSGGSGlinker基因串连两段Aβ42基因片段;将产物克隆入pcDNA3.1表达载体,分别构建pcDNA3.1Aβ42,一价分泌型pcDNA3.1-sAβ42,二价分泌型pcDNA3.1-s2×Aβ42载体;转染COS-7细胞,免疫印迹检测Aβ42的表达;im接种BALB/c鼠,ELISA法测定抗体效价;免疫组织化学和Aβ42肽抗原的中和实验检测抗体与Tg2576鼠脑切片中的老年斑的结合.结果:测序证实所构建的pcDNA3.1-Aβ42,pcDNA3.1s-Aβ42,pcDNA3.1-s2×Aβ42载体插入序列正确;WesternBlotting证实在COS-7细胞中表达相应的蛋白.经6轮,22wk加强免疫后,pcDNA3.1-Aβ42疫苗不能产生Aβ抗体、pcDNA3.1sA-β42接种后产生较低的Aβ抗体(<1∶1000),pcDNA3.12×Aβ42第1次加强免疫后即产生抗体,抗体滴度随接种次数增多而升高,22wk时抗体平均滴度达1∶5000以上,可以与转基因鼠Tg2576脑切片中的老年斑结合,并能被Aβ42肽抗原特异性中和.结论:二价分泌型pcDNA3.1-s2×Aβ42疫苗,可在动物体内产生高效价的特异Aβ抗体.
- 张革邹俊涛汪华侨李国营姚志彬
- 关键词：淀粉样Β蛋白疫苗DNA
- 重组四价Aβ_(1-15)蛋白的表达及免疫原性鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的:制备重组人四价串联Aβ1-15老年性痴呆二代蛋白疫苗,探讨其免疫原性。方法:以本室前期制备的含四价Aβ1-15基因(4×Aβ15)的重组质粒pcDNA-4×Aβ15为模板,PCR扩增4×Aβ15基因并克隆至pGEX-4T-2质粒中,转化大肠杆菌,诱导表达GST-4×Aβ15。经thrombin酶切去除GST后得到纯化的4×Aβ15蛋白。将4×Aβ15免疫BALB/c小鼠,观察其诱导体液免疫反应的能力。结果:经鉴定、测序,获取重组质粒pGEX-4×Aβ15,诱导表达后Western blotting显示在相对分子质量约35×103处有GST-4×Aβ15表达带,thrombin酶切去除GST后得到相对分子质量约9×103的4×Aβ15蛋白。4×Aβ15蛋白免疫小鼠诱导出(964.6±401.3)mg/L抗Aβ抗体。结论:成功构建了pGEX-4×Aβ15原核表达质粒并表达人重组4×Aβ15蛋白,免疫动物证实该蛋白疫苗有较强的免疫原性。
- 邹俊涛姚志彬张革汪华侨徐杰谢瑶袁群芳
- 关键词：阿尔茨海默病原核表达免疫力
- 慢病毒介导的shRNA沉默PTTG基因表达对人生长激素型垂体腺瘤细胞生长的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察慢病毒介导shRNA沉默PTTG基因表达对人生长激素型垂体腺瘤细胞生长的影响。方法原代培养人生长激素型垂体腺瘤细胞,分为正常对照组、阴性对照组和实验组。实验组构建PTTG-shRNA的慢病毒表达载体并转染肿瘤细胞,阴性对照组转染空慢病毒载体,正常对照组细胞不转染。流式细胞仪分析细胞转染效率,RT-PCR和Western blot检测肿瘤细胞PTTG mRNA和蛋白的表达水平,MTT检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果与正常对照组和阴性对照组比较,实验组细胞转染PTTG-shRNA慢病毒载体后,PTTG mRNA和蛋白表达显著下降(均P<0.01),细胞生长显著变慢(均P<0.05),G0/G1期细胞比例显著增高(均P<0.05),凋亡率明显增加(均P<0.05)。结论慢病毒介导shRNA沉默PTTG基因表达可显著抑制人生长激素型垂体腺瘤细胞的生长,为进一步研究垂体腺瘤的发病机制和肿瘤的基因治疗提供实验基础。
- 沈云龙崔玉婷朱剑峰吕兰海邹俊涛郭开华武凤鸣
- 关键词：垂体肿瘤短发夹RNA
- 醋酸格拉默免疫介导影响神经干细胞的增殖及分化
- 2018年
- 目的观察体外状态格拉默(GA)免疫后刺激机体产生的细胞因子对神经干细胞增殖及分化的影响。方法分离和培养新生SD大鼠脑室下区神经干细胞。4周龄雄性SD大鼠10只随机分为格拉默组(GA免疫组)及对照组,每组5只。格拉默免疫结束后2周,GA免疫组及对照组SD大鼠静脉血清分别加至已培养的脑室下区神经干细胞,培养3～4 d后计数增殖的神经球数目及直径大小。细胞分化完成后进行免疫细胞荧光染色。结果加入格拉默刺激后的血清神经干细胞球数目较对照组增加40%,且神经球直径较对照组大。神经球经免疫细胞化学鉴定为神经干细胞。格拉默免疫组血清较对照组血清更加促进神经干细胞向神经元方向分化。结论格拉默免疫通过特异性T细胞激活分泌的细胞因子有助于神经干细胞的增殖及向神经元方向的分化。
- 何芬魏旋孙建聪莫威袁婷宫庆娟邹俊涛
- 关键词：神经干细胞免疫增殖分化
- 新生期接种乙肝疫苗联合丰富环境对小鼠神经发生及行为的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探究新生期接种乙肝疫苗联合丰富环境对小鼠神经发生及行为的影响,为其更深入的机制研究奠定基础。方法新生小鼠均等的随机分为两组,其中半数小鼠出生24 h内腹腔注射乙肝疫苗(100μg/m L),于出生后第1、3周分别加强免疫一次,其余注射无菌PBS作对照。待出生后第4周,子代小鼠再次被均等的随机分为两组,分别为丰富环境组和普通环境组。利用水迷宫实验检测小鼠海马依赖型的学习记忆能力;免疫荧光技术检测小鼠海马的神经发生;ELISA方法检测小鼠血清中的IL-4、IFN-γ以及海马中的BDNF含量。结果乙肝疫苗联合丰富环境组小鼠的学习记忆能力、神经发生及海马的BDNF水平高于乙肝疫苗组小鼠,差异具有统计学意义(P<0.05),但与对照组小鼠相比无显著差异(P>0.05);联合组小鼠血清中的IFN-γ/IL-4比值较乙肝疫苗组小鼠明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与对照组小鼠相比并无显著差异(P>0.05)。结论新生期接种乙肝疫苗损害小鼠的神经发生和海马依赖型的学习记忆能力,并使得小鼠Th1/Th2平衡向Th2偏移,青春期进行丰富环境干预后可使其恢复到与对照组相近的水平。
- 孔洁琛祁方昉邹俊涛姚志彬
- 关键词：丰富环境乙肝疫苗神经发生小鼠
- 舌咽神经阻滞入路相关结构的应用解剖被引量：10
- 2000年
- 目的 :为舌咽神经阻滞的进针入路和预防并发症的发生提供解剖学基础。方法 :观测了30侧成人头、颈部标本舌咽神经的毗邻结构。结果 :舌咽神经阻滞进针的深度 :乳突尖端与下颌角之间连线的中点至颈静脉孔的距离 ,左侧为 (2 3 .2± 0 .4)mm(17.0～ 30 .1mm) ,右侧为 (2 3.0± 0 .4)mm(16 .5～33 .3mm)。获得了舌咽神经的毗邻结构的观测结果。结论 :为舌咽神经阻滞的进针深度和预防并发症提供了解剖学依据。
- 邓兆宏邹俊涛
- 关键词：颈静脉孔
- 环孢素A对新生小鼠的海马神经发生和认知能力的影响
- 2015年
- 目的检测免疫抑制剂环孢素A对小鼠行为和神经发生的影响,为进一步研究免疫对小鼠中枢神经系统神经发生的分子机制研究做理论依据。方法实验随机分为环孢素A组和对照组。新生C57BL/6小鼠于出生24 h内背部皮下接种环孢素A,对照组皮下注射等量的生理盐水。14 d时用免疫荧光的方法检测海马Brd U+、DCX+/Brd U+、Neu N+/Brd U+细胞数量的变化,28 d时用矿场和水迷宫的方法检测其行为学的变化。结果与其对照组相比,环孢素A组小鼠的探索,自发性活动和学习记忆能力明显降低;Brd U+、DCXA/Brd U+、Neu N+/Brd U+细胞数量的明显下降表明海马神经发生受抑制。结论新生期给予环孢素A可以抑制新生小鼠的认知能力和海马神经发生。
- 王阁张雨微祁方窻许云龙姚志彬胡丹丹何芬邹俊涛
- 关键词：环孢素A学习记忆神经发生海马
