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郭泽
作品数:
5
被引量:8
H指数:2
供职机构:
江苏省人民医院
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相关领域:
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合作作者
骆丹
江苏省人民医院
周炳荣
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方晓波
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尹慧彬
江苏省人民医院
胡燕燕
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PTEN基因与皮肤肿瘤
2011年
皮肤肿瘤是一类最常见的肿瘤,在引起皮肤肿瘤发生的诸多原因中,紫外线照射是主要影响因素之一。PTEN是近年来研究较多的一个肿瘤抑制基因,位于染色体10q23,3。目前研究证实,PTEN在多种皮肤肿瘤,如基底细胞癌、鳞状细胞癌、恶性黑素瘤中都起着抑制基因的作用,发现在皮肤肿瘤形成过程中,紫外线照射可引起PTEN失活,对肿瘤的形成可能起着促进的作用。
郭泽
周炳荣
李巍
骆丹
关键词:
皮肤肿瘤
紫外线
自噬促进剂西罗莫司对中波紫外线诱导成纤维细胞提早衰老的影响
被引量:4
2013年
目的研究自噬促进剂西罗莫司对反复亚毒性中波紫外线诱导提早衰老(UVB—SIPS)的影响。方法人皮肤成纤维细胞分为6组,对照组、10mg/L西罗莫司组、UVB组、UVB+0.1mg/L西罗莫司组、UVB+1.0mg/L西罗莫司组、UVB+10.0mg/L西罗莫司组。UVB照射剂量10mJ/cm2每日1次共5次,对照组用含1%小牛血清的DMEM培养基培养5d;西罗莫司组在每次换液后加入西罗莫司;西罗莫司+UVB组在每次照射UVB后加入西罗莫司过夜。CCK-8检测细胞活性,β半乳糖苷酶化学染色法检测衰老细胞,吖啶橙染色检测细胞自噬,Western印迹检测衰老相关分子信号p53及自噬相关蛋白LC3-B及beclin1的表达水平。数据用SPSS16.0软件分析,多组间均数行单因素方差分析,结合t检验和LSD法。结果UVB+0.1、1.0、10mg/L西罗莫司组的细胞活性(A450值)分别为0.2±0.02、0.36±0.04、0.39±0.04,呈浓度依赖性升高,与UVB组(0.26±0.01)比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05);3个组B半乳糖苷酶染色阳性细胞分别为92.50%±0.34%、42.40%±0.53%、6.20%±0.39%,与UVB组(95.10%±0.32%)比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);3组吖啶橙染色荧光定量分别为36.43±0.24、45.25±0.33、48.69±0.37,与UVB组(33.99±0.32)比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);3组p53、LC3-B及beclin1的表达与UVB组比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论自噬促进剂西罗莫司在提高细胞自噬率的同时,可抑制UVB诱导的成纤维细胞提早衰老。
方晓波
周炳荣
骆丹
郭泽
尹慧彬
胡燕燕
关键词:
成纤维细胞
细胞衰老
紫外线
西罗莫司
自噬
黄芩苷抑制长波紫外线诱导的人成纤维细胞氧化损伤和凋亡
被引量:1
2013年
目的探讨黄芩苷对长波紫外线(UVA)诱导的人二倍体成纤维细胞(HDF)氧化损伤和凋亡的抑制作用及其可能机制。方法CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度。将成纤维细胞分成对照组、UVA照射组、UVA+6.25mg/L黄芩苷组、UVA+12.5mg/L黄芩苷组、UVA+25m∥L黄芩苷组。利用荧光显微镜和流式细胞仪检测各组细胞中活性氧、超氧化物阴离子和一氧化氮含量的变化;流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞凋亡率的变化。Western印迹法检测凋亡相关蛋白caspase3含量。以上多组间比较均采用单因素方差分析。结果UVA照射组的活性氧、超氧化物阴离子和一氧化氮含量分别为813.1±30.29、353.3±19.13、107.1±11.44,较对照组(442.5±29.45、223.4±10.67、42.17±2.59)明显上升,均P〈0.05);同时,UVA照射组较对照组线粒体去极化增强,凋亡率上升。与UVA组比较,各浓度黄芩苷作用组氧化产物包括活性氧、超氧化物阴离子及一氧化氮含量均有明显下降,线粒体去极化减弱,细胞凋亡率也显著下降,均P〈0.01。UVA组凋亡相关蛋白caspase3相对含量为1.2680±0.0091,明显高于对照组(0.3675±0.1115),6.25、12.5和25mg/L黄芩苷组(0.5588±0.1705、0.5365±0.1718、0.5454±0.2083)较UVA组有显著下调(均P〈0.01)。结论黄芩苷可以减轻UVA诱导的人成纤维细胞氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与清除活性基团、抑制线粒体膜去极化、阻止下游凋亡蛋白caspase3的激活和表达有关。
尹慧彬
周炳荣
骆丹
吴维
方晓波
张倩
郭泽
张家安
胡燕燕
关键词:
紫外线
成纤维细胞
黄芩甙
氧化性应激
棕榈酸对HaCaT细胞增殖及产生炎症因子的影响
被引量:1
2013年
目的探讨棕榈酸对HaCaT细胞增殖及产生炎症因子的影响。方法将不同浓度棕榈酸(0、25、50、75、100、125、150、175、200μmol/L)刺激HaCaT细胞3~24h,用细胞计数试剂盒CCK8检测HaCaT细胞增殖情况。选取一定浓度棕榈酸(0、75、100、125、150μmol/L)刺激HaCaT细胞24h后,分别用免疫组化荧光染色法在共聚焦显微镜下观察核因子(NF)-κBp65细胞核转位情况。酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中自介素6(IL-6)分泌量,实时PCR法检测过氧化物酶增殖体激活受体(PPARa)mRNA及IL-6mRNA的表达,免疫印迹法检测PPARa、总蛋白NF—κBp65及核蛋白NF—κBp65表达量。用GraphPadPrism5,0软件进行单因素方差分析。结果与空白对照组相比,50~175μmoVL棕榈酸均可刺激HaCaT细胞增殖(均P〈0.05)。75、100、125、150μmol/L棕榈酸可剂量依赖性增强HaCaT细胞NF—κBp65向细胞核内转位,各浓度组核蛋白的相对表达量分别为0.4536±0.0173、0.5184±0.0206、0.5333±0.0231、0.6160±0.0297,与空白对照组相比,差异有统计学意义(均P〈0.01)。PPARamRNA及其蛋白产物、IL~6mRNA及分泌量呈剂量依赖性增加,各浓度组IL-6分泌量分别为(31.5677±0.2268)、(32.3773±0.4156)、(32.9837±0.0029)、(33.6890±0.0936)ng/L,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05或0.()1)。结论棕榈酸可促进HaCaT细胞增殖,并在一定浓度内剂量依赖性增强NF—κB核转移、IL-6及PPARa表达量,在激活和促进相关炎症因子表达中起到一定作用。
张倩
周炳荣
骆丹
方晓波
尹慧彬
郭泽
吴唯
关键词:
棕榈酸
角蛋白细胞
细胞增殖
翻译控制肿瘤蛋白在鳞状细胞癌和细胞株A431及SCL-1中的表达
被引量:2
2012年
目的探讨翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)在人皮肤鳞状细胞癌(scc)组织及其细胞株A431及SCL-1中的表达,观察其对SCC细胞凋亡及增殖的影响。方法免疫组化法观察TcTP蛋白在SCC组织中的表达。Western印迹法检测TCTP蛋白在SCC细胞株A431及SCL-1中的表达情况。继而构建针对编码TCTP的基因TPT1的siRNA序列,通过脂质体转染法转入A431细胞中,RT-PCR法检测TPT1的表达,Western印迹法检测TcTP蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT法检测A431细胞增殖情况。结果免疫组化结果显示,在SCC中存在着TCTP的高表达,且其表达水平与癌组织的分级有着正相关关系(P〈0.05)。Western印迹结果证实,在A431细胞及SCL-1细胞株中都存在着TCTP的表达,以A431细胞表达为最高。荧光检测siRNA转染效率可达到90%-95%。RT-PCR及Western-Blot结果显示合成的siRNA可以有效下调A431细胞中TPT1及TCTP的表达(P〈0.05)。结论合成的siRNA可以有效下调A431细胞中TP及TCTP的表达,这种下调可引起A431细胞凋亡率的上升和细胞增殖的抑制。
郭泽
吴迪
周炳荣
李明娜
骆丹
关键词:
TCTP
鳞状细胞
RNA干扰
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