钱焜 作品数:14 被引量:37 H指数:4 供职机构: 中国海洋大学水产学院海水养殖教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 公益性行业(农业)科研专项 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
花鲈类胰岛素生长因子及结合蛋白基因的克隆与表达调控 花鲈(Lateolabrax japonicus)是我国广泛养殖的经济鱼类,本文以山东省青岛市沿海网箱养殖花鲈为对象,利用分子生物学方法研究了花鲈类胰岛素生长因子(Insulin-like growth factors)... 钱焜关键词:结合蛋白 基因克隆 文献传递 海产花鲈IGFBP-1、2基因的克隆及表达分析 被引量:8 2014年 利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆得到花鲈的IGFBP-1和IGFBP-2基因cDNA全长序列,IGFBP-1全长1 779bp,编码248个氨基酸,IGFBP-2全长815bp,编码267个氨基酸。花鲈的IGFBP-1和IGFBP-2氨基酸序列同其他硬骨鱼类一样都包括C-端结构域、N-端结构域和多变的中央L-结构域。二者均存在18个保守的半胱氨酸残基以维持氨基酸二级结构的稳定,同时也都拥有N-端结构域的CGCCXXC-box和C-端结构域的CWCV-box,它们都是与IGF配体结合的重要结构。此外,IGFBP-2的C-端结构域还存在一个RGD结构,它能够与整合素相互作用,介导细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的黏附作用。利用荧光实时定量PCR技术对花鲈的脑、垂体、心脏、鳃、胃、盲肠、肠、头肾、肾脏、肝脏、性腺(雄)、脾脏和肌肉这13个组织的IGFBP-1和IGFBP-2mRNA的相对表达水平进行分析。结果显示,花鲈IGFBP-1mRNA表达量较为广泛,在肝脏中的转录水平最高,在肌肉和脾脏有较多的表达。花鲈IGFBP-2mRNA仅在肝脏中的表达水平最高,在肌肉中表达水平较高,其他组织表达量较低。 钱焜 温海深 迟美丽 倪蒙 张冬茜 丁玉霞关键词:荧光实时定量PCR 盐度调控对花鲈(Lateolabrax maculatus)生长相关基因表达的影响 被引量:4 2015年 生长激素受体(GHR)作为GH/IGF轴的中心环节,在内分泌调控中发挥重要作用。本实验采用c DNA末端快速扩增法(RACE)技术克隆出花鲈GHR1和GHR2的c DNA全长序列。急性低盐度调控实验设为海水组、半海水组和淡水组。测定了急性低盐度调控24、48、96、144、192h后,花鲈肝脏中GHRs、IGF-1及垂体GH表达情况。结果表明,GHR1 c DNA全长序列2436bp,编码637个氨基酸;GHR2 c DNA全长序列2940bp,编码582个氨基酸。GHR1与GHR2由信号肽、胞外区、跨膜区、胞内区组成,且结构存在差异。脑、肾、鳃中GHR1表达明显高于GHR2;而在肌肉、垂体、肝脏、盲肠、胸腺、心脏中,GHR2表达明显高于GHR1。24h时,各组GHR1表达不变,GHR2、GH、IGF-1显著下降。之后,相对于海水组,淡水组和半海水组GHRs和IGF-1表达升高,而GH下降,GH与GHR负相关。据结果推测,花鲈GHR2可能为SL受体,GH/IGF轴参与低渗调控可能是通过增加GHRs,进而激活下游IGF-1表达而实现。 张沛 迟美丽 温海深 钱焜 倪蒙 张亚晨 黄政举 宋志飞 柴森浩关键词:盐度 生长激素受体 生长激素 胰岛素样生长因子1 外源激素对花鲈(Lateolabrax japonicus)血清IGF-1含量及肝脏IGF-1和IGFBP-1 mRNA表达的影响 被引量:3 2014年 对花鲈(Lateolabrax japonicas)成鱼腹腔注射促黄体激素释放激素类似物(LHRH-A3)和人体绒毛膜促性腺激素(HCG),利用放射性免疫激素测定方法(RIA)检测了花鲈血清中类胰岛素生长因子(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)在注射后6、12、24、48 h内的变化情况,同时还利用荧光实时定量PCR技术检测了花鲈肝脏中IGF-1和类胰岛素生长因子结合蛋白1(Insulin-like growth factor-binding protein 1,IGFBP-1)mRNA的相对表达量的变化情况。结果表明,注射LHRH-A3的花鲈血清中IGF-1的含量在24 h后出现了明显的降低(P<0.05),而花鲈肝脏中IGF-1 mRNA的相对表达量在注射6 h后较对照组明显升高(P<0.05),而肝脏中IGFBP-1 mRNA的相对表达量则呈现下降趋势。注射HCG的花鲈血清中IGF-1的含量在注射后12 h出现了明显降低(P<0.05),24 h后血清中IGF-1含量持续降低。肝脏中IGF-1 mRNA的相对表达量在注射后的24 h内均保持稳定,而在处理后的48 h出现了显著上升(P<0.05)。肝脏中IGFBP-1 mRNA的相对表达量在注射后12h检测到显著升高(P<0.05)。研究结果表明,LHRH-A3和HCG均可以通过直接或间接的刺激作用来触发花鲈IGF系统的应答反应,但是其中具体机制尚不明了。 钱焜 温海深 迟美丽 倪蒙 张冬茜 丁玉霞花鲈GTHs基因克隆以及其在激素处理后表达量特征分析 促性腺激素是(Gonadotropin Hormone,GTH)是由垂体前叶细胞合成和分泌的一类糖蛋白激素,主要生理作用是刺激生殖细胞的生长、发育和成熟.两种促性腺激素,FSH和LH,它们都是由α和β两个亚基组成的,其中... 迟美丽 温海深 钱焜 倪蒙关键词:促性腺激素 克隆 激素 壳聚糖-LHRHA缓释制剂对鱼类生殖内分泌机能的影响 2013年 以壳聚糖为材料制备了新型的壳聚糖-促黄体激素释放激素类似物(Chitosan-LHRHA)缓释制剂。在缓释制剂埋植于实验鱼第0、2、6、14、21和30天后,采用放射免疫法、RT-PCR方法检测了实验鱼的基础生物学指标、血清睾酮(T)和雌二醇(E2)含量、芳香化酶(CYP19A)、雌激素受体(ERα)、生长激素(GH)基因mRNA的表达。结果表明:在缓释制剂埋植2~21d,壳聚糖-LHRHA缓释制剂埋植组中,实验鱼的各项生理指标显著的高于对照组和LHRHA埋植组(P<0.05)。说明壳聚糖-LHRHA缓释制剂在埋植21d内可以在实验鱼体内稳定释放,并通过正反馈途径调节鱼体血清中T和E2水平,调节鱼体生殖相关基因mRNA的表达。研究表明,壳聚糖-LHRHA缓释制剂对调节鱼类的生殖机能有良好的促进效果。 尹相菡 温海深 刘晨光 倪蒙 步艳 迟美丽 钱焜 张冬茜 丁玉霞关键词:缓释制剂 LHRHA 壳聚糖 性类固醇激素 基因表达 鱼类两种缓释催产激素载体临床性能的比较研究 2013年 采用组织切片技术和RT-PCR技术研究了海藻酸钠微球和壳聚糖微球作为缓释激素载体在临床上对金鱼基础生物学指标以及CYP19A、GH基因mRNA表达的影响,以检测两种缓释激素载体对鱼类生殖和生长的影响。研究结果表明:缓释材料埋植0、7、14、30、48d后,雌性和雄性金鱼处理组与对照组(埋植0.7%生理盐水组)比较,海藻酸钠微球埋植组和壳聚糖微球埋植组在基础生物学方面没有出现显著性差异;不同处理组中实验鱼性腺组织切片卵巢和精巢的发育均处于同一时期(按照Мейен分期原则);海藻酸钠微球埋植组和壳聚糖微球埋植组中,各次采样组的CYP19A基因表达均没有出现明显性差异;海藻酸钠微球埋植组GH基因各次取样时间均未出现显著性差异,雌性金鱼壳聚糖微粒埋植组GH基因的表达在0、7、14、30采样后显著上升(P<0.05),埋植48d差异消失,雄性金鱼壳聚糖埋植组未出现明显差异。综合显示:作为缓释载体,海藻酸钠微球在临床上的性能较壳聚糖微球更为稳定,而壳聚糖微球对雌性金鱼的GH基因mRNA表达的促进作用更为明显。 尹相菡 温海深 倪蒙 步艳 迟美丽 钱焜 张冬茜 丁玉霞关键词:金鱼 GH基因 花鲈繁殖生理及人工养殖模式探析 被引量:10 2013年 论述了我国人工养殖和野生花鲈繁殖周期,以及养殖花鲈注射外源激素后生理应答性;侧重阐述了花鲈南北接力繁育养殖模式及其可行性,并对未来发展提出了合理化建议。 温海深 钱焜 张美昭 迟美丽关键词:生殖周期 繁殖 养殖模式 花鲈遗传育种与繁殖及养殖产业发展研究 本文依据近10余年国内外相关资料,结合作者多年关于花妒的研究基础,侧重阐述了国内外有关花鲈遗传与育种、繁殖生理、苗种繁育、养殖模式等研究进展。结果表明:花鲈是中国海水与淡水池塘和网箱养殖的重要对象,适合高密度精养,广东地... 温海深 张美昭 李吉方 迟美丽 钱焜关键词:遗传育种 繁殖性能 养殖模式 花鲈精子发生相关基因及其在外源激素处理后的表达特征分析 促性腺激素是由垂体前叶细胞合成和分泌的一类糖蛋白激素,主要生理作用是刺激生殖细胞的生长、发育和成熟.两种促性腺激素(FSH和LH)它们都是由相同的α亚基和两个特异的β亚基组成的.StAR、AMH和FTZ-F1基因也在发育... 迟美丽 温海深 钱焜 倪蒙关键词:克隆 精子发生 激素