- 微米级硅胶微球的合成及其在色谱饼蛋白分离中的应用
- :建立一种微米级硅胶微球的合成方法并研究其在色谱饼蛋白分离中的应用。 方法:将颗粒直径为1.1 μm硅胶微球键合反相固定相后装填于色谱饼中，在常规色谱仪上对标准蛋白混合物进行了快速分离，流速为10mL/min，泵压...
- 闵一耿信笃
- 关键词：液相色谱
- 液相色谱快速分离整体蛋白的新进展
- 自有色谱以来快速分离就一直是色谱工作者追求的目标。在蛋白质组学中，高效液相色谱法对复杂样品中低丰度蛋白的快速富集和分离显得尤为重要。虽然一维液相色谱可以经济有效地分离蛋白，但是会碰到一些复杂样品，峰重叠现象严重现象存在。...
- 王斐闵一耿信笃
- 关键词：高效液相色谱法分离蛋白
- 亚2μm无孔硅胶填料的制备及用其在色谱饼上进行蛋白快速分离
- 本文探索了粒径小于2微米(亚2μm)无孔硅胶在色谱快速分离中的应用。将高效的亚2μm无孔硅胶色谱介质装填在色谱饼中,在数分乃至数秒内对整体蛋白进行了快速分离。随着色谱填料粒径的减小,柱效会随而增大；若将如此小粒度色谱介质...
- 闵一
- 关键词：液相色谱
- 文献传递
- 动力学因素对液相色谱分离整体蛋白的影响被引量：4
- 2009年
- 依据液相色谱分离整体蛋白的效果与色谱柱柱长基本无关的事实,研究了动力学因素对疏水相互作用色谱（HIC）分离整体蛋白的影响。首次提出了用于线性梯度洗脱条件下蛋白分离的“条件板高”（H）概念,并将其用于动力学因素对分离整体蛋白的影响的表征。分别用常用的色谱柱和色谱饼对标准蛋白进行了分离,绘制了类似于van Deemter的“条件板高”对流动相线速（u）的曲线图。发现对应于色谱柱最低“条件板高”的适合线速约为色谱饼的1/5～1/15,且色谱饼的适合线速范围也较色谱柱宽得多。据此,用装填有HIC填料的色谱饼（10mm×20mm i.d.）在12min内便可完全分离7种标准蛋白。还用装填有HIC填料的色谱饼对重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）进行了复性并同时纯化,在50min内,仅用一步色谱法就可获得纯度≥97%的rhG-CSF,其质量回收率为39%,比活〉1×10^8IU/mg。可以预计,装填极细颗粒的刚性色谱填料的色谱饼可在高负荷条件下进行整体蛋白的高速和高分离度的分离、纯化并同时复性,达到“三高”。
- 闵一陈刚耿信笃
- 关键词：分离度生物工程粒细胞集落刺激因子
