陈康
- 作品数：9 被引量：97H指数：6
- 供职机构：安徽中医药大学更多>>
- 发文基金：中医药行业科研专项国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学理学更多>>
- 基于高分辨熔解曲线技术贵细中药材鉴别的示范应用
- 目的针对中药材市场上存在的贵细中药材基源混乱、掺伪现象,构建基于高分辨熔解曲线技术的贵细中药材正品鉴定模型的检测方法,为未来建立中药材鉴定数据库提供基础,更为中药分子鉴定提供一种新的技术方法。方法采集不同产地、市场的贵细...
- 陈康
- 关键词：中药材分子鉴定
- 文献传递
- 高分辨率熔解曲线技术及其在中药DNA分子鉴定中的应用被引量：21
- 2015年
- 高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是建立在熔解曲线分析的基础上,通过一类新型饱和荧光染料和更高分辨率的检测仪器,主要应用于突变扫描、基因分型和序列匹配等的一项新技术。该技术因简便、精确、快速、闭管、低成本、高通量、对样本无污染等优点而受到广泛关注。本文对高分辨率熔解曲线的原理、影响因素、优势、不足及在中药材HRM分析应用现状等进行系统总结,并对其在中药分子鉴定中的应用前景进行展望。
- 陈康蒋超袁媛黄璐琦
- 关键词：高分辨率熔解曲线中药材分子鉴定
- 人参属中药材高分辨率熔解曲线鉴定及其方法学考察被引量：8
- 2017年
- 目的:建立基于高分辨率熔解曲线鉴别人参属中药材的方法,并进行系统性方法学考察。方法:采集不同产地的人参属中药材人参、西洋参、三七以及市场上常见混伪品竹节参、珠子参、羽叶三七。所有样品提取总DNA,筛选合适的引物,构建人参属正品中药材熔解曲线。同时对不同比例混合样品进行了鉴别,对该方法的灵敏性与特异性、重复性、稳健性、检出限进行了系统性考察。结果:选择psbA-F/trnH-R引物,在模板质量浓度1.6~200 ng·μL^(-1),退火温度为54~60℃,引物浓度为0.1~0.3)μmol·L^(-1)范围内,对人参属中药材共75份样品进行高分辨熔解曲线分析人参、西洋参、三七、羽叶三七、竹节参、珠子参等均获得正确稳定的分析结果。结论:高分辨熔解曲线依据分型分析可以区分人参属中药材,并对其混伪品进行检测。在此基础上本文提出了中药分子鉴定方法学研究标准程序,为进一步规范中药分子鉴定方法学研究提供依据。
- 陈康蒋超金艳赵玉洋黄璐琦袁媛
- 关键词：中药材DNA分析人参属掺伪品分子鉴定高分辨率熔解曲线
- 人参皂苷调控根尖干细胞稳态及人参皂苷自身合成与内源性激素空间相关性的研究
- 目的:以模式植物拟南芥中根尖干细胞微环境以及药用植物人参本身作为研究平台,通过正反向遗传学,结合转录组学分析,深入探索人参皂苷调控根尖干细胞以及人身皂苷自身合成和内源性激素空间相关性的机制研究,揭示人参皂苷在植物生长发育...
- 陈康
- 关键词：人参皂苷
- 基于DNA熔解曲线技术的金银花种质鉴定被引量：3
- 2016年
- 将高分辨率熔解曲线(high resolution melting curve analysis,HRM)技术应用于金银花种质鉴定中,对已知7对SSR(简单重复序列,simple sequence repeats)引物进行筛选,通过熔解曲线峰型及Tm差异,确定适合鉴别引物并考察其DNA模板浓度、退火温度及循环数的适宜范围。结合SIMCA-P软件对荧光信号进行处理分析,结果表明利用其中4对引物的熔解曲线可以区分金银花的3个主栽种质,为进一步完善金银花种质鉴定方法提供了依据。
- 陈媞颖蒋超袁媛陈康周骏辉赵玉洋黄璐琦
- 关键词：高分辨率熔解曲线金银花种质鉴定
- 基于熔解曲线分析技术的鹿茸药材分子鉴别被引量：23
- 2015年
- 高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景.文章将高分辨率熔解曲线技术应用于鹿茸真伪鉴别,利用COⅠ序列,在退火温度为60 ℃,45个循环数的条件下,建立正品鹿茸药材熔解曲线模型,并筛选确定其DNA模板浓度、引物浓度、Mg2＋浓度的适宜范围.结果表明,鹿茸药材在模板DNA质量浓度为 10~100 mgL-1、引物浓度0.2 μmolL-1,Mg2＋浓度2.0 mmolL-1的条件下,梅花鹿熔解曲线为双峰,其Tm分别为（81.960.07）,（84.510.03） ℃;马鹿熔解曲线为双峰,其Tm为（82.580.13）,（85.950.05） ℃.该方法可以实现简单、快速、高通量、可视化的鹿茸药材真伪鉴定.
- 陈康蒋超袁媛黄璐琦金艳
- 关键词：分子鉴定
- UPLC-MS/MS测定人参花中5种内源植物激素含量被引量：8
- 2018年
- 目的:探究人参花中内源激素分布规律,为后期研究内源性植物激素调控人参皂苷合成奠定基础。方法:采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)对人参花中5种内源性植物激素(生长素,赤霉素,脱落酸,茉莉酸,水杨酸)含量进行测定分析。结果:人参花中5种内源性植物激素含量测定结果都具有专属性,与抗逆相关的激素脱落酸(ABA)和水杨酸(SA)含量较高,分别为1 126.17±232.52 ng·g^(-1)和3 929.43±898.52 ng·g^(-1);与促生长相关的激素生长素(IBA)和赤霉素(GA3)含量较低,分别为516.70±138.55 ng·g^(-1)和692.33±228.50 ng·g^(-1);茉莉酸(JA)合成途径中,茉莉酸前体12-氧植物-二烯酸(OPDA)含量极高,为47 158.84±12 910.55 ng·g^(-1);茉莉酸(JA)并未检出,茉莉酸活性形式异亮氨酸(JA-ile)为22.08±6.27 ng·g^(-1)。结论:本研究首次检测了人参花中5种内源性植物激素的分布规律,并深入挖掘人参花中茉莉酸途径相关成分的合成,为后期深入研究内源性植物激素调控人参皂苷合成奠定基础。
- 陈康刘娟周修腾纪瑞锋童宇茹陈同陈同
- 关键词：UPLC-MS/MS植物激素
- 快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用被引量：40
- 2014年
- 为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材（乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇）真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础，采用碱裂解法提取基因组总DNA，加人特异性PCR引物，采用两步法进行PCR扩增，从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化，并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察，分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBRGreenI染料，正品显示出明亮绿色荧光，而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30—45min完成，为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。
- 陈康蒋超袁媛黄璐琦李曼
- 关键词：分子鉴定荧光检测
- 碱裂解法快速提取中药炒制品DNA的研究被引量：7
- 2014年
- 该文旨在探索一种适用于中药炒制品DNA快速提取的方法。以氢氧化钠,1%PVP40和1%Triton X-100配制成碱裂解缓冲液,Tris-HCl为中和液,经加热裂解和中和2步提取不同炒制方法制备的中药炮制品的DNA,选择2种方法对DNA进行纯化,并以纯化后DNA作为模板利用通用引物进行PCR扩增。结果表明优化碱裂解法可简单快速的提取出药材DNA,槐米炒制品DNA质量浓度为(420.61±123.91)g·L-1,且使用5%Chelex-100树脂纯化可以提高DNA提取浓度。研究结果证明优化碱裂解法适用于中药炒制品的DNA快速提取。
- 郑琪蒋超黄璐琦张志杰李娆娆陈康袁媛金艳
- 关键词：DNA快速提取碱裂解法
