陈清轩
- 作品数：84 被引量：360H指数：12
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- 流感病毒H3N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达
- 2010年
- 目的克隆、表达和鉴定流感病毒H3N2血凝素基因(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA)序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆流感病毒H3N2全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA(52 bp～1 549 bp)、pMET A/NA(121 bp～1 260 bp),电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了流感病毒H3N2 HA、NA基因序列,为流感病毒H3N2诊断试剂和疫苗开发等进一步研究奠定了基础。
- 李梓张烨唐启慧陈禹宝于在江辛丽陈永坤陈清轩舒跃龙
- 关键词：血凝素神经氨酸酶酵母菌
- 禽流感病毒H9N2血凝素基因和神经氨酸酶因在大肠杆菌中的表达
- 2010年
- 克隆、表达和鉴定禽流感病毒H9N2 HA,NA基因序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。在成功克隆禽流感病毒H9N2全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pET32a(+)上,全基因序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pET32a(+)/HA(截短)、pET32a(+)/NA(截短)、pGEX4T-1/HA、pGEX4T-1/NA,转化大肠杆菌BL21/rosetta,IPTG诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱和GSTrap4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致。ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H9N2 HA、NA基因序列。为禽流感病毒H9N2诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础。
- 张烨于在江辛丽陈永坤唐启慧陈禹保陈清轩舒跃龙
- 关键词：血凝素神经氨酸酶克隆表达
- 转基因猪外源基因染色体定位的研究被引量：6
- 1998年
- 转基因猪外源基因染色体定位的研究ＥＸＯＧＥＮＯＵＳＧＥＮＥＬＯＣＡＬＩＺＡＴＩＯＮＯＮＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＳＯＦＴＲＡＮＳＧＥＮＩＣＰＩＧ关键词基因定位染色体原位杂交转基因猪ＫｅｙｗｏｒｄｓＧｅｎｅＬｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ，Ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄ...
- 何新刘桂生陈清轩魏庆信陈永福
- 关键词：基因定位染色体原位杂交转基因猪生长激素
- 转OMT/PGH基因猪外源基因整合及遗传特性研究被引量：3
- 1999年
- 实验以转OMT／PGH基因猪的G0、G1、G2和G3代共8头猪为材料，应用同位素和非同位素标记的染色体原位来交技术，对外源OMT／PGH基因在猪染色体上整合位点进行研究。结果表明：（1）外源基因可以整合在染色体上，整合的位点是随机的；（2）整合在染色体上的外源基因可以遗传给子代；（3）整合在染色体上的外源基因在转基因动物世代过程中整合的位点是相对稳定的。
- 樊俊华魏庆信陈清轩李奎
- 关键词：原位杂交染色体整合位点转基因猪
- 带有猪生长激素基因的转基因鼠被引量：1
- 1992年
- 为研究外源基因在转基因动物中的整合及表达调控的机制,我们首先进行了转基因鼠的研究。(a)外源基因片段的制备:把羊金属硫蛋白启动基因(SMT)和猪生长激素基因(PGH)与载体质粒pUC19相连接,构建成psMTPGH表达质粒。
- 陈清轩刘雷曹颉宋德秀
- 关键词：PCR转基因鼠生长激素基因
- 高效液相色谱法测定酶的活性被引量：2
- 1992年
- 3β,20α-羟基甾体脱氢酶(3β,20α-HSD)是和胚胎的发育密切相关的;我们于1987年首次从胎羊血中得到该酶的纯品,并对其有关性质进行了研究。但是繁杂的测酶活方法常常延误研究工作的顺利进行,因此寻求一种简便有效的测定方法是很有意义的。经多次实验,我们成功地将高效液相色谱技术(HPLC)用于3β,20α-HSD的活性测定,大大缩短了测定时间,促进了有关研究工作的顺利进行。本文将介绍这种新的测酶活方法。
- 陈清轩Leonard O.RosikFrederick Sweet
- 关键词：活性HPLC3Β-HSD
- 后生遗传修饰及其对动物克隆的影响被引量：5
- 2003年
- 近年来 ,不断有新的哺乳动物和两栖类动物被成功克隆 ,但这并不能掩盖克隆效率过低和克隆动物异常的现实 ,为了解决这一问题 ,人们对克隆机理进行了大量研究。高度分化的体细胞核在去核的卵质中去分化和再程序化不完全是导致动物克隆失败的主要原因 ,而去分化和再程序化不完全主要是由于基因组去甲基化不充分和过早再甲基化引起克隆胚中甲基化水平比正常胚中偏高所至 ,这可引起一些重要基因的异常表达 ,尤其是印记基因。这些机制的研究对提高克隆效率有着重要意义。
- 李文雍郁卫东陈清轩
- 关键词：动物克隆再程序化甲基化基因组印记
- 萝卜色素的提取及其性质被引量：32
- 1992年
- 从“心里美”萝卜中提取出一种天然红色色素。本文研究了该色素的提取工艺及理化性质。依据花色素定性试验、光谱鉴定等方法,初步认为“心里美”萝卜中红色色素的主要成份为天竺葵色素,并通过小鼠急性毒性实验对该色素做出了毒理学评价。
- 张志红陈清轩
- 关键词：食用色素
- 转基因猪体内外源基因的整合鉴定被引量：1
- 1996年
- 外源猪生长激素基因被导入湖北白猪．为避免羊、猪之间在金属硫蛋白启动上的同源性而造成ＰＣＲ检测结果的假阳性，分别将ＰＣＲ合成反应的两个引物设计在羊金属硫蛋白基因启动子一侧和猪生长激素一侧，使ＰＣＲ合成反应的结果特异地反映外源基因的整合性，准确地鉴定出转基因猪．ＤＮＡ印迹分析结果表明，４３头待检仔猪中有６头呈外源基因整合阳性．
- 刘桂生陈清轩王菁魏庆信陈永福
- 关键词：生长激素基因转基因猪
- 转基因动物简介
- 2000年
- 转基因动物研究作为一个崭新的学科,已经成为生命科学研究和讨论的热点。为了普及和增加人们对这一领域的了解,本文对转基因动物的制作方法和转基因动物研究的作用进行了介绍。随着转基因动物研究不断完善,转基因动物定会在生物学研究、畜牧业的发展、医疗卫生的进步等方面显示出巨大应用潜力。
- 陈清轩
- 关键词：转基因动物外源基因导入
- 全文增补中
