黄建华
- 作品数：39 被引量：71H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 放射治疗对小鼠肾癌细胞凋亡和Bcl-2与Bax蛋白表达的影响
- 2007年
- 目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌的抑制作用及对Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:建立BALB/c小鼠的肾癌细胞移植瘤放射治疗模型;HE染色测定肿瘤细胞死亡面积;采用免疫印迹法(Western blot法)检测肿瘤组织的凋亡相关蛋白表达。结果:放疗组小鼠移植瘤生长速度较肿瘤对照组明显减慢。放疗组小鼠肿瘤组织中抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调。结论:经放射治疗后,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,可能与放疗引发肿瘤细胞凋亡相关蛋白表达变化相关。
- 王瑶黄建华吕海燕郭佳杨军马林
- 鼠伤寒沙门菌stn基因突变株的构建与毒力检测被引量：4
- 2001年
- 作者构建了鼠伤寒沙门菌肠毒素 (stn)基因插入失活型与缺失型突变的重组自杀载体质粒 ,通过重组自杀质粒中的突变stn基因与鼠伤寒沙门菌株 2 0 0 0染色体上野生型stn基因发生同源交换 ,筛选获得stn基因突变的同源突变菌株。在小鼠体内检测菌株stn基因产物生物活性的结果表明 ,突变菌株诱发小鼠肠液分泌的能力较野生菌株明显减弱 ,而小鼠口服突变菌株的半致死剂量较野生株明显增高 ,提示stn基因是鼠伤寒沙门菌致病机制中一个较为重要的毒力因子。
- 黄建华徐心晶
- 关键词：沙门氏菌伤寒突变菌株毒力作用
- 内皮前体细胞移植对新血管形成的促进作用被引量：2
- 2006年
- 目的:观察体外培养的内皮前体细胞自体移植后在缺血肢体新血管形成和改善血液灌注过程中的形态学变化及其作用。方法:①实验于2002-08/2003-04在解放军总医院心内科实验室完成。选用成年雄性新西兰白兔20只。随机将动物分为2组,分别为细胞移植组和对照组(肌肉注射磷酸盐缓冲液1mL),各10只。实验2个时间点3,5周各5只。②细胞移植组兔抽取骨髓,分离单个核细胞,采用内皮细胞专用培养基(添加体积分数0.2胎牛血清,肝素1×104U/L和青霉素1×105U/L)体外培养扩增内皮前体细胞并给予鉴定。细胞移植组动物肌肉注射内皮前体细胞悬液,移植细胞数量为(7.4±1.7)×106,共注射5个点。③分别饲养3和5周后行激光多普勒灌注显像显示缺血肢体血液灌注情况;行腹主动脉造影计数右侧大腿自腹股沟韧带至膝关节的血流时间,以股骨中点的垂直线为标准,计数侧支血管数目;行组织学和免疫组织化学检测观察缺血肌肉组织标记细胞是否整合至血管壁内。④采用t检验比较计量资料间差异。结果:①内皮前体细胞贴壁后呈纺锤体形,原代细胞呈集落生长,生长速度较慢,传代以后分布较均匀,生长迅速。原代细胞培养时可见较多杂细胞存在,但传代2次以后细胞形态非常单一。Ⅰ型荆豆凝集素、乙酰化低密度脂蛋白和抗Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体鉴定均为阳性,细胞纯度达100%。②内皮前体细胞移植后3周,激光多普勒灌注显像检测显示细胞移植组缺血肢体血液灌注显著改善(t=5.96,P<0.01),血管造影显示细胞移植组侧支血管生成增多(t=5.28,P<0.01),血流速度增快(t=-6.85,P<0.01)。细胞移植后5周,切开动物缺血肢体皮肤发现,细胞移植组皮肤、皮下组织和肌肉基本不形成粘连,而对照组粘连严重,此时激光多普勒灌注显像检测显示细胞移植组和对照组血液灌注检测无显著差别(P>0.05),但造影检测显示
- 张端珍盖鲁粤黄建华刘宏伟钟大光
- 关键词：细胞移植侧支循环动脉闭塞性疾病
- 胰岛素对人肺腺癌细胞A549化疗增敏作用机制的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨胰岛素对化疗药物顺铂(DDP)敏感性的影响和机制。方法选用人肺腺癌细胞A549为靶细胞,采用MTT法检测顺铂对A549细胞抑制率达30%时的药物浓度(IC30),检测胰岛素不同浓度或作用不同时间后,对A549细胞化疗敏感性的影响。流式细胞仪检测不同加药处理组的周期时相变化情况。Western Blot印迹方法检测不同加药处理组的细胞周期蛋白CyclinA和CyclinD1的表达情况。结果顺铂的IC30约为36.87μg/mL;胰岛素(2.0～16.0mU/mL;8h～16h)可增强顺铂(36.87μg/mL)的细胞毒作用(P<0.01)。流式分析显示DDP能引起A549的S期细胞阻滞,胰岛素可增加DDP对A549的S期细胞阻滞。Western Blot印迹方法检测显示单用顺铂组较对照组比较,CyclinA的表达明显增强,CyclinD1的表达变化不明显。胰岛素联合顺铂组较单用顺铂组比较,CyclinA、CyclinD1的表达变化均不明显。结论胰岛素具有化疗增效作用,胰岛素用药的时机选择是实现增效的关键。其机制可能为:胰岛素能够使A549的S期细胞比例增加,与DDP有协同作用。顺铂对人肺腺癌细胞株A549细胞周期的影响表现为S期的阻滞,CyclinA的表达增强在其作用机制上起着重要的作用。
- 王雅娟俞森洋黄建华李建雄
- 关键词：胰岛素顺铂化疗敏感性细胞周期蛋白
- 四肢脉压总和与臂踝脉搏波传导速度以及传统的动脉硬化风险因素的关系
- 目的 探讨四肢脉压总和与臂踝脉搏波传导速度的相关性以及在动脉硬化中的应用前景.方法 选取 2009年5月至2012年2月在解放军总医院健康医学中心接受全部检查项目者，共计20748人为研究对象.我们详细记录了研究对象的资...
- 郑延松刘敏燕舒画陈志来黄建华
- 关键词：臂踝脉搏波传导速度动脉硬化
- 鼠伤寒沙门菌肠毒素基因功能与毒力作用的研究被引量：7
- 2001年
- 目的 研究确定肠毒素基因 (enterotoxingene ,stn)在鼠伤寒沙门菌致病机理中的功能和毒力作用。方法 以鼠伤寒沙门菌株 2 0 0 0为研究对象 ,在克隆的stn基因SfiⅠ位点拼接入Km抗性标记基因以形成stn基因的插入失活 ,以此构建带有突变stn基因的重组自杀载体质粒 ,使重组自杀载体质粒与菌株 2 0 0 0染色体的同源基因发生交换 ,以突变stn基因置换其野生型拷贝 ,造成菌株 2 0 0 0stn基因位点的专一突变 ,筛选获得同源突变菌株。利用stn基因、Km抗性基因和自杀载体作探针进行菌株染色体Southernblot杂交 ,检测菌株对小鼠肠腔结扎攻毒实验和小鼠口服菌株半致死量的指标。结果 菌株 2 0 0 0染色体上野生型stn基因已被突变stn基因取代 ,同源突变菌株造成小鼠肠腔分泌能力比野生菌株明显减弱 (P <0 0 1) ,小鼠口服突变菌株的致死剂量较野生菌株明显增高 (P <0 0 1)。结论 stn基因产物能够诱发小鼠肠腔液体分泌反应 。
- 黄建华徐心晶
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌突变菌株毒力
- 嵌和体水平及供受者基因配型相合程度对小鼠移植物抗宿主病的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨小鼠半相合、异基因骨髓移植后受体嵌和体水平及供受者基因配型相合程度对小鼠移植物抗宿主病影响。方法以BALB/C小鼠为受鼠,以CB6F1小鼠为供鼠,A组给予全身照射4.0 Gy预处理方案,B组给予全身照射8.0 Gy,所有受鼠在第0天经尾静脉注射CB6F1小鼠骨髓细胞细胞悬液(5×106),C组以CB6F1小鼠为供鼠,D组以C57BL/6小鼠为供鼠,均给予全身照射(8.0 Gy),观察所有受鼠移植后的嵌合体水平及GVHD的情况。结果A组形成混合型嵌合体,移植2周达高峰,随后有下降趋势,B、C及D组为完全供者型嵌合体(>90%),且持久稳定;A、B两组间临床GVHD评分有显著差异(P<0.05);D组临床GVHD评分和死亡率明显高于A、B及C组(P<0.05)。结论嵌和体水平与移植后GVHD的发生有关;供受者基因配型相合程度对嵌合体水平无影响,但与GVHD的发生有关。
- 王希友杨勇黄建华洪宝发李峤陈新静马林郭业磊翟飞
- 关键词：造血干细胞移植动物模型移植物抗宿主病
- 抗CD133/CD3双特异性抗体装载的CIK细胞对高表达CD133结直肠癌细胞杀伤效应的探讨
- 2015年
- 目的：探讨抗CD133/CD3双特异性抗体装载的CIK（BsAb-CIK）细胞对高表达CD133结直肠癌细胞的杀伤效应。方法通过化学偶联制备抗CD133和抗CD3的双特异性抗体。利用CCK8试剂盒检测CIK和BsAb-CIK对高表达CD133结直肠癌细胞系（SW620和HT29）和低表达CD133结直肠癌CIK和BsAb-CIK细胞系（LOVO）的杀伤能力，并检测培养上清中细胞因子分泌水平。构建裸鼠皮下移植瘤模型，随后从腹腔进行CIK和BsAb-CIK细胞输注，1个月后取瘤称重并统计组间肿瘤生长的差异。结果在不同效靶比条件下（1∶5，1∶10，1∶20），BsAb-CIK细胞对高表达CD133的结直肠癌细胞系SW620和HT29的杀伤作用均明显强于单纯CIK组（P＜0.05），而BsAb-CIK细胞对低表达CD133的结直肠癌细胞系LOVO的杀伤作用与单纯CIK组相比，没有显著性差异（P＞0.05）。BsAb-CIK细胞INF-γ分泌明显高于单纯CIK组（P＜0.05）。与单纯CIK治疗组比较，BsAb-CIK细胞对移植瘤的生长抑制作用更加显著（P＜0.05）。结论 BsAb-CIK细胞能够有效杀伤高表达CD133的结直肠癌细胞。
- 吕海燕刘传杰黄建华
- 关键词：结直肠癌双特异性抗体CD133CD3CD133CD3
- 放射治疗荷肾癌小鼠肿瘤生长抑制与脾细胞及肿瘤组织IL-2,IFN-γ和IL-10的关系被引量：6
- 2009年
- 目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌移植瘤的抑瘤作用与细胞因子IL-2,IFN-γ和IL-10表达分泌的关系.方法:建立BALB/c小鼠的Renca肾癌细胞移植瘤放射治疗的模型;采用ELISA试剂盒检测小鼠脾淋巴细胞的细胞因子IL-2,IL-10和IFN-γ分泌水平.RT-PCR法检测肿瘤组织IL-2,IL-10和IFN-γ基因的表达水平.结果:治疗组小鼠肾癌移植瘤生长速度较肿瘤对照组明显减慢.放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ及肿瘤组织IL-2,IFN-γ的表达较肿瘤对照组明显升高,IL-10较肿瘤对照组降低.结论:经放射治疗后,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,与放疗引发小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ和肿瘤组织IL-2,IFN-γ表达分泌增强,IL-10细胞因子降低有关.
- 王瑶吕海燕郭佳俞伟马林汪涛黄建华
- 关键词：IL-2IL-10IFN-Γ肾肿瘤
- ^(19)F磁共振波谱分析CD基因在人结肠癌细胞的表达被引量：1
- 2004年
- 为了研究^(19)F-NMR波谱分析胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在人结肠癌细胞中表达的可行性,通过逆转录病毒介导方法,将编码大肠杆菌的CD基因转染到人结肠癌细胞系SW1116。通过RT-PCR、MTT方法和^(19)F-NMR波谱分析了 CD基因在人结肠癌细胞中的表达状况。结果显示转基因的肿瘤细胞SWCD_2 中表达CD基因,对前药 5-氟胞嘧啶(5-FC)的敏感性较亲本肿瘤细胞 SW1116明显增高,50％细胞生长抑制率(IC_(50))为 66 μmol/L,而 SW1116细胞IC_(50)为16 mmol/L。^(19)F-NMR波谱分析显示,转导CD基因细胞在774μmol/L 5-FC浓度培养24 h后的样品,在δ-91.7和δ-93.3显示了2个双峰,分别是5-FC和5-氟尿嘧啶(5-FU)的^(19)F-NMR的信号,提示5-FU是 SWCD_2细胞内的 CD酶催化 5-FC的代谢产物。这些结果表明^(19)F-NMR分析是一种能够用于检测CD基因在人结肠癌细胞中表达的新方法,它将有助于对临床基因治疗方案实施监测。
- 黄建华王瑶李崇辉邱本胜钟大光吕海燕
- 关键词：结肠癌细胞基因治疗5-氟胞嘧啶CD基因
