黄雅琼
- 作品数：55 被引量：129H指数：6
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划广西教育厅科研项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学自然科学总论更多>>
- 猪体细胞核移植相关技术研究
- 1．探讨了猪卵母细胞体外成熟过程中减数分裂进程和卵母细胞的发育潜力。(1)不同直径卵泡内的卵母细胞的成熟进程及各时相出现的时间存在差异。直径>2mm的卵泡内的卵母细胞体外培养16 h，大部分发生GVBD(germinal...
- 黄雅琼
- 关键词：体细胞核移植卵母细胞体外培养体外成熟激素
- 文献传递
- 猪卵母细胞体外成熟和孤雌培养体系的建立和优化被引量：2
- 2007年
- 试验系统探讨了猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活方法。结果表明:在成熟液中分别添加FSH(促卵泡素:0.1ng/mL)和hMG(人绝经期促性腺激素:0.01IU/mL)的卵母细胞成熟率差异显著,但2组间的分裂率和囊胚率差异不显著。在成熟液中添加0、10、30、50、70ng/mL或90ng/mL的EGF(表皮生长因子),50ng/mLEGF组的分裂率达到84.90%,囊胚率达到30.20%,显著高于其余各组。分别使用以TCM-199和NCSU-23为基础液的成熟液来成熟培养猪卵母细胞,NCSU-23组的分裂率,成熟率和囊胚率均高于TCM-199组。使用离子酶素激活方法和电激活方法进行对比,离子酶素激活后孤雌胚胎发育效果好,差异极显著(P<0.01)。
- 黄雅琼石德顺谭世俭陆凤花韦精卫
- 关键词：体外成熟体外培养孤雌胚胎
- 水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达被引量：5
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定。序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质。将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达。在1 mmol/L IPTG中,37℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达。将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku。
- 谢体三农微张新民黄雅琼崔奎青石德顺
- 关键词：水牛原核表达
- 猪卵母细胞体外成熟的发育潜力及核移植重构胚构建方法的研究被引量：3
- 2009年
- 为了提高猪体细胞核移植重构胚发育潜力,本研究对体外成熟28h、32h、36h、40h、44h、48h、52h和56h的猪卵母细胞分别进行去核构建重构胚。研究结果表明,成熟44h的卵母细胞核移植后有较高的融合率(58.99%)、卵裂率(67.52%)和囊胚率(22.78%),而成熟48h的卵母细胞则分别为56.51%、65.73%和15.96%;且卵龄为44h的卵母细胞核移植后分裂率与囊胚率显著高于卵龄为40h、36h、32h、28h的卵母细胞的分裂率与囊胚率(P<0.05)。卵龄为48h的卵母细胞融合率高于卵龄为52h卵母细胞的融合率(P<0.05)。同时我们还探讨了不同去核方法(盲吸法、Hochest33342染色法和Spindle-view system)对猪体细胞核移植重构胚发育能力的影响。研究结果发现,盲吸法、Hoechest33342染色法和Spindle-view system法的去核率分别达到76.33%,100.00%和98.40%。Hoechest染色法去核率显著高于盲吸法的去核率(P>0.05),而与Spindle-view法去核率没有差异(P>0.05)。三种方法在融合率和囊胚率方面差异不显著(P>0.05),但Hoechest染色法的分裂率较低,差异显著(P<0.05)。进一步的研究表明,细胞质内注射进行核移植构建重构胚的分裂率和囊胚率分别为68.13%和6.44%;透明带下注射法则为60.37%和8.08%,两者差异不显著(P<0.05);两者均可运用于猪体细胞的核移植,这为建立有效的猪体细胞核移植体系提供了参考。
- 黄雅琼石德顺张晓溪张顺谭世俭陆凤花王晓丽杨素芳蒋建荣刘庆友
- 关键词：卵母细胞核移植重构胚发育潜力
- B超诊断技术在母牛繁殖生产和胚胎移植工作中的应用被引量：4
- 2007年
- 黄雅琼石德顺陈静波谭世俭张震
- 关键词：B超诊断仪畜牧生产胚胎移植母牛生殖系统
- 水牛卵母细胞体外成熟及体外受精过程中的皮质颗粒变化
- 2009年
- 用异硫氰荧光素联接的小扁豆凝集素(Fluorescein isothiocyanate-labelled Lens culinaris,FITC-LCA)标记不同体外成熟时间和不同体外受精时间的水牛卵母细胞的皮质颗粒,用激光共聚焦显微镜检测其分布情况。结果发现,皮质颗粒在水牛卵母细胞体外成熟培养前,70.1%卵母细胞的皮质颗粒呈现中间分布;培养24 h后,皮质颗粒皮层分布的卵母细胞达59.8%,分布形式由完全聚合向完全分散逐步转变。对不同体外成熟时间的卵母细胞进行体外受精时发现,体外成熟12 h的卵母细胞仅在受精后3 h有12.9%的皮质颗粒外排。随着成熟时间的增加,皮质颗粒的排放也趋于明显,成熟24 h的卵母细胞受精后3 h皮质颗粒外排率可达100%。结果表明,在水牛卵母细胞的成熟过程中,皮质颗粒的分布由中间分布逐渐向皮层分布转变,最后在卵母细胞的质膜下排列成单层;体外受精过程中卵母细胞皮质颗粒的排放速度取决于其在卵母细胞中的分布情况,故而与体外成熟时间呈正相关。
- 王晓丽黄雅琼杨娟石德顺韦精卫陆凤花农垚峰
- 关键词：体外成熟皮质颗粒卵母细胞水牛
- 不同激活方法对猪卵母细胞体外发育的影响
- 猪在畜牧业生产中地位举足轻重,与人们的生活联系紧密,牛、羊等动物体细胞核移植的成功极大促进了猪细胞核移植等相关技术的研究。卵母细胞的有效激活是动物克隆技术的关键环节。目前,猪的体细胞克隆效率比牛等其它动物低,除了由于其卵...
- 黄雅琼王晓丽陆凤花陈自洪崔奎青杨素芳谭世俭石德顺
- 关键词：猪卵母细胞体外发育核移植体细胞克隆
- 猪核移植供体细胞的分离培养及传代的研究
- 通过对猪的卵丘细胞和胎儿成纤维细胞的分离、培养和传代的研究，摸索出一套猪体细胞的分离、培养和传代的方法，建立了猪的供体细胞系。研究结果表明：猪的卵丘细胞单层的生长需要5～6 d;运用组织块法和酶消化法获得胎儿成纤维细胞，...
- 黄雅琼石德顺谭世俭陆凤花王晓丽苏文昌
- 关键词：供体细胞细胞培养细胞分离
- 文献传递
- 基础生物化学实验的教学方法探讨被引量：6
- 2010年
- 基础生物化学是生物科学的一门基础实验性学科,随着生物化学技术的迅速发展,这门学科渗透到生命科学的各个领域,成为其它实验性学科和专业的基础学科,基础生物化学在现代基础学科发展中的地位越来越重要.从玉林师范本科生的实际情况出发,本人整合了基础生物化学的实验教学课程方案,在实验教学中着力培养学生的实验思维能力和综合实践能力,为进一步提高生物化学实验课的教学质量,培养具有实践能力和创新能力的人才创造有利条件,并打下坚实的基础。
- 黄雅琼李桂芬曾诗媛谢秋季甘耀坤
- 关键词：生物化学教学方法
- 影响胚胎移植成功率的主要因素被引量：6
- 2006年
- 本文针对在胚胎移植过程中可能预见的各种影响胚胎移植技术的实施的因素进行了较为全面的分析,并针对不同影响因素提出了自己独特的见解,以期在生产实践中对胚胎移植技术的应用和推广有所借鉴。
- 张震黄雅琼吴奇喜王利宁蒋如明
- 关键词：胚胎移植受体牛成功率影响因素
