于浩然
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:天津大学化工学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学文化科学更多>>
- 理性设计改造荧光素酶的热稳定性
- 与传统的化学催化剂相比,生物酶因具有特殊的优势,正在渐渐成为工业领域的主要工具。然而在工业生产苛刻的环境下,大部分生物酶不能够保持很高的活性。因此为了提高生物酶的工业价值,有必要通过蛋白质工程技术对其进行改造以提高热稳定...
- 于浩然
- 关键词:荧光素酶热稳定性
- 文献传递
- 一种萤火虫荧光素酶及其编码基因及获取方法
- 本发明涉及一种萤火虫荧光素酶及其编码基因及获取方法;克服原有北美萤火虫荧光素酶热稳定性差,尚不能满足高温下应用的缺陷,对原有北美萤火虫荧光素酶进行突变,得到热稳定性显著提高的突变酶,提高其应用价值。氨基酸序列为SEQ I...
- 黄鹤于浩然王玥肖天雄
- 一种萤火虫荧光素酶及其编码基因及获取方法
- 本发明涉及一种萤火虫荧光素酶及其编码基因及获取方法;克服原有北美萤火虫荧光素酶热稳定性差,尚不能满足高温下应用的缺陷,对原有北美萤火虫荧光素酶进行突变,得到热稳定性显著提高的突变酶,提高其应用价值。氨基酸序列为SEQ I...
- 黄鹤于浩然王玥肖天雄
- 文献传递
- 理性设计改造牛肠激酶的热稳定性被引量:3
- 2016年
- 以牛肠激酶作为研究对象,利用理性设计的方法提高其热稳定性。首先通过分子动力学模拟软件Gromacs v 4.5.5,Flex Service以及B-FITTER软件预测出了肠激酶的柔性区Fragment 64~69,Fragment 85~90;然后结合β-转角序列统计学信息以及引入位置原有的残基不参与形成氢键的原则,确立了3个突变位点S67P,R87P以及Y136P;通过Quik Change^(TM)定点突变的方法引入突变位点,并进行了酶热稳定性分析。结果表明,R87P突变体酶的失活半衰(t_(1/2))和T_(50)^(10)较野生型分别提高了3.1 min和11.8℃,同时,动力学常数(K_m/k_(cat))测定结果显示酶活未受到显著影响。该策略有潜力应用于其他工业酶分子的热稳定性改造,为推动生物酶的工业化应用奠定基础。
- 郭超王志彦甘一如李丹邓勇于浩然黄鹤
- 关键词:肠激酶热稳定性脯氨酸