付培芬
- 作品数:6 被引量:7H指数:2
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金黑龙江省科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 鸭肠炎病毒gD基因胞外区的原核表达及在感染鸭胚成纤维细胞中的定位
- 2012年
- 以本实验室获得的鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株US区基因序列(GenBank登录号EU714267)为基础PCR扩增出gD基因胞外区(gDw),将其定向克隆至原核表达载体pET-30a(+)并转化至大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLys。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明gD基因胞外区在大肠杆菌中获得与预期大小相符的表达蛋白。重组蛋白纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,血清琼扩效价达1∶16,噬斑减数中和试验测定血清中和抗体效价达1∶64。通过免疫荧光技术首次对gD进行亚细胞定位检测,结果表明DEV感染鸭胚成纤维细胞(DEF)后4h近核区域细胞质内首先开始出现荧光,12h以后显著增加,明显的点状绿色荧光广泛存在于胞质中。本研究为进一步开展DEV gD的功能研究提供了重要数据和材料。
- 刘琰徐凝付培芬母晓宇董井泉马波王君伟
- 关键词:鸭肠炎病毒原核表达
- 牛病毒性腹泻病毒基因Ⅱ型HLJ-10分离株全基因组克隆及其序列特征分析被引量:4
- 2012年
- 为研究牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的分子特征,本研究参考GenBank中登录的BVDV基因Ⅱ型病毒株全基因组序列,设计多对引物,通过RT-PCR方法,对一株分离自某商品化血清中的BVDV分离株HLJ-10全基因组进行分段克隆及序列测定,获得了该分离株的全基因组序列。生物信息学分析表明,该分离株为BVDV基因Ⅱ型,全长12 284 nt,编码区为11 694 nt,共编码3 897个氨基酸,5'和3'非编码区分别为385 nt和205 nt。与其它BVDV参考株序列比对分析表明,HLJ-10与SH-28和KZ91CP进化关系较密切,预测该分离株含有22个潜在糖基化位点,氨基酸差异性分析表明E2蛋白的氨基酸序列在瘟病毒属中变异性较大。
- 刘华付培芬李岩温凯贾莹刘晓玫张海丽商云鹏高明春马波张文龙王君伟
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒基因组
- 表达1型鸭肝炎病毒VP1基因重组鸭肠炎病毒的构建及其生物学特性初步研究
- 1型鸭病毒性肝炎(Duck Virus Hepatitis,DVH)是幼龄雏鸭的一种高度致死性、急性传染病。该病以发病急速、传播快速、死亡率高为主要特征,以肝炎和出血为主要病理变化,临诊表现角弓反张。VP1蛋白含有多个与...
- 付培芬
- 关键词:鸭肝炎病毒VP1基因鸭肠炎病毒生物学特性
- 1型鸭肝炎病毒E53株VP1基因的原核表达及多克隆抗体的制备
- 利用RT-PCR技术扩增1型鸭肝炎病毒(DHV-1)E53株VP1基因序列,将其连入pET-30a载体中,构建原核表达载体pET-30a-VP1,并转化至宿主菌Rosetta(DE53)plysS中,经IPTG诱导后,S...
- 付培芬李鑫母晓宇董井全何召庆马波王君伟
- 关键词:VP1基因原核表达多克隆抗体免疫原性
- 小肽对动物生产性能和免疫功能的影响
- 2007年
- 蛋白质的消化代谢一直是动物营养学的研究热点之一。人们依据传统的蛋白质营养理论进行研究发现,动物并不能达到最佳的生产性能;而许多试验证明.在日粮中增加一定量的肽能够改善动物生产性能,增强动物的免疫功能,为此,本文就小肽对动物生产性能和免疫功能的作用进行综述。
- 金赛勉李玉才付培芬
- 关键词:动物生产性能小肽蛋白质营养动物营养学消化代谢日粮
- 1型鸭肝炎病毒E53株VP1基因在昆虫细胞中的表达及产物分析
- 2012年
- 根据1型鸭肝炎病毒E53株基因组序列设计并合成一对特异性引物,RT-PCR扩增VP1基因,将其定向克隆至pFastBacTMHTB载体,转化至DH10BacTM感受态细胞中,蓝白斑筛选获得重组穿梭质粒rBacmid-VP1,重组质粒在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。结果表明VP1蛋白在昆虫细胞中获得表达,表达产物能够与兔抗1型鸭肝炎病毒VP1蛋白多抗血清和鸭肝炎病毒阳性血清发生特异性反应。在昆虫细胞中表达VP1蛋白为VP1功能的研究及鸭肝炎病毒抗体的检测提供了物质材料。
- 付培芬刘华刘琰母晓宇董井泉刘晓玫马波王君伟
- 关键词:VP1基因昆虫细胞