付慧
- 作品数：11 被引量：13H指数：3
- 供职机构：西安医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)调节糖脂代谢抑制小鼠肝细胞脂肪沉积和肝纤维化被引量：4
- 2020年
- 目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型小鼠发病过程的作用及其作用机制。方法将60只小鼠按体质量分为野生小鼠空白对照组、NAFLD模型组、PPARδ基因敲除小鼠模型组和PPARδ激动剂组。采用实时定量PCR检测肝脏组织中PPARδmRNA水平,Western blot法检测肝脏组织中PPARδ蛋白水平。采用试剂盒检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)含量以及血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、球蛋白(G)水平和白蛋白(A)/球蛋白(A/G)比率;采用试剂盒检测血清中胰岛素和葡萄糖的含量;采用HE染色检测肝组织病变情况,油红O染色检测脂肪沉积情况,α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色结合天狼星红染色观察肝纤维化程度。结果NAFLD模型小鼠肝脏组织PPARδmRNA和蛋白高表达;当给予NAFLD模型小鼠PPARδ激动剂后,其PPARδmRNA和蛋白表达量显著升高。此外,PPARδ激动剂能够降低TC、TG、LDL、G和葡萄糖水平,升高HDL水平,降低ALT、AST水平,A/G比值增加;此外,还可减轻肝组织的病变;抑制α-SMA表达以及胶原纤维沉积。结论PPARδ激动剂可调节NAFLD小鼠的糖脂代谢,抑制肝细胞脂肪沉积和肝纤维化。
- 黄伟潘瑾付慧
- 关键词：纤维化小鼠
- 丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2007年
- 目的克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再亚克隆到原核表达载体pET-28a中;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达;采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平。结果成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体,并得以表达。结论成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件。
- 付慧楚雍烈张丽莉曹美茹成凡茹小荣王勇健
- 关键词：丙型肝炎病毒基因表达
- 丙型肝炎病毒NS5A基因的克隆及序列比对分析
- 2006年
- 目的:研究HCV N S5A区基因的结构与功能,为提高干扰素(IFN)治疗HCV感染的有效性提供依据,及为建立以N S5A蛋白做抗原的新一代诊断试剂盒,提高HCV感染检出率作出有益的尝试。方法:以含HCV 1b全长cDNA的质粒HCV 17为模板,利用巢式PCR扩增出一段长约500bp的cDNA片段,以此基因片段作为目的基因,进行T-A克隆,构建PMD 18-T-N S5A。结果:经酶切及测序证实,PMD 18-T-N S5A质粒中的插入基因片段为HCV 1b N S5A区部分基因,与HCV标准株HCV J序列进行比对分析,核苷酸和氨基酸序列的同源性均为90%以上,并且该区段包含了干扰素敏感决定区(ISDR)。结论:建立HCVN S5A基因片段稳定的无性繁殖系,并进行同源性分析对研究ISDR序列与IFN疗效的关系是非常重要的;通过基因重组表达N S5A蛋白,可用于HCV诊断试剂盒的研究。
- 付慧楚雍烈成凡
- 关键词：RNA
- 谈如何提高医学检验专业生物化学教学效果
- 2007年
- 生物化学是医学检验专业的一门重要的基础课程,该文从进行具有专业特点的生物化学教学、改进教学方法和重视实践教学等三个方面,探讨如何提高医学检验专业生物化学教学效果,为培养高素质的检验医学人才打下基础。
- 付慧
- 关键词：生物化学教学效果
- 丙型肝炎病毒NS3基因真核表达载体的构建及表达
- 2009年
- 目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因NS3的真核表达载体,并分析其在HeLa细胞中的表达。方法:以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得全长NS3基因,将其插入克隆载体pMD18-T中,鉴定后与真核表达载体pcDNA3.1(+)重组,用脂质体介导法转染HeLa细胞,间接免疫荧光法及Western blot鉴定转染后HCVNS3蛋白的表达。结果:PCR扩增的NS3序列正确,构建的真核表达载体成功转染HeLa细胞,表达的NS3蛋白相对分子量为70kD。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)/NS3,并在HeLa细胞中获得表达。
- 孙菊楚雍烈安润付慧姜凤良柴长斌胡志芳
- 丙型肝炎病毒1bDY株ns5a基因的克隆及其所表达融合蛋白的免疫原性分析
- 2007年
- 目的:克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因,为进一步研究和应用该基因及其表达产物奠定基础。方法:采用基因重组技术完成实验。设计特异的引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出目的片段,约480bp;将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再与原核表达载体pET-28a重组;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白表达水平。结果:含有HCV 1b DY株ns5a基因的重组体构建成功,并得以表达蛋白,并且NS5A蛋白具有与HCV患者阳性血清中的多克隆的结合活性,具有很好的免疫原性。结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了HCV 1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造条件。
- 付慧楚雍烈张丽莉曹美茹成凡茹小荣王勇健
- 在《医学生物化学》教学中如何突出专业特点被引量：5
- 2007年
- 在《医学生物化学》教学中结合各专业特点进行有针对性的教学，是教学改革的一个非常重要的方面。本文就生物化学教学为什么要突出专业特点、如何突出专业特点等问题进行讨论，以期优化教学效果，提高学生专业素质。
- 付慧张丽莉曹美茹肖赞英
- 关键词：生物化学教学改革
- 鞘脂激活蛋白C通过上调雄激素受体的表达与活性促进LNCaP细胞的增殖被引量：1
- 2013年
- 目的构建含有鞘脂激活蛋白C(Saposin C)的真核表达载体,探讨Saposin C在前列腺癌雄激素依赖性前列腺细胞(LNCaP)中对雄激素受体(AR)及细胞增殖的影响。方法通过cDNA法构建含有TAT和Saposin C的真核表达载体,并将其转染至前列腺癌LNCaP细胞。通过MTS、RT-PCR、Western blot等实验,分别检测TAT-Saposin C与Saposin C的AR基因表达与其转录激活功能,以及对前列腺癌细胞增殖的影响。结果在不依赖雄激素的情况下,Saposin C能够上调AR与PSA基因mRNA和蛋白质水平的表达,增加AR的转录激活活性,刺激LNCaP细胞的增殖。结论 Saposin C通过雄激素非依赖性上调AR的表达与转录激活活性,促进LNCaP细胞的增殖。
- 任凯丁岩成凡付慧张雅利
- 关键词：雄激素受体前列腺特异性抗原
- 提高成人专升本《医学生物化学》教学质量之探索
- 2006年
- 成人专升本教育是比较特殊的教育形式,在医学专业课程中生物化学是难度较大的课程之一,但又是非常重要的课程。如何提高成人专升本《医学生物化学》教学质量,是本文探索的焦点。通过选择合适的教材,强化知识点教学,采取多种教学方法,以及加强素质教育等方面来达到提高教学质量的目的。
- 付慧曹美如
- 关键词：成人专升本生物化学知识点教学方法素质教育
- 鞘脂激活蛋白C抑制LNCaP细胞雄激素受体降解的研究
- 2013年
- 目的:探讨Saposin C对LNCaP细胞雄激素受体(AR)蛋白降解的影响。方法:通过转染实验,将Saposin C、TAT-Saposin C真核表达载体转染至LNCaP细胞,MTS检测Saposin C对LNCaP细胞增殖的影响,Western blot检测Saposin C对AR蛋白水平的影响及其在细胞中降解的调节作用。结果:Saposin C抑制LNCaP细胞AR蛋白的降解,上调胞内AR蛋白水平,促进LNCaP细胞增殖。结论:Saposin C增强AR蛋白的稳定性抑制其在细胞中的降解。
- 任凯付慧陈鹏成凡茹晓荣郭慧芳
- 关键词：前列腺肿瘤生物学
