刘新军
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 供职机构：石河子大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
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- SCF对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞超微结构的影响
- 2011年
- 目的探讨干细胞因子(SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(ICCs-like)超微结构的影响。方法胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs样细胞。实验分组:正常对照组(葡萄糖浓度为5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为15 mmol/L),培养基培养72 h后高糖组分为高糖对照组、SCF 50 ng/ml组、SCF 100 ng/ml组,继续培养24 h及72 h。透射电镜观察各组不同时间段ICCs样细胞超微结构。结果随着培养时间延长,正常对照组ICCs样细胞内超微结构无明显变化;高糖对照组ICCs样细胞内细胞器明显减少,线粒体肿胀、大小不等、空泡样变甚至溶解;内质网扩张,胞质广泛溶解,胞周突起变短乃至消失;而SCF组ICCs样细胞超微结构得到逐步改善,细胞器增多、形态趋于正常对照组,胞周突起增多。结论外源性SCF干预后对高糖环境造成的ICCs样细胞超微结构破坏有一定的修复或逆转作用。
- 刘新军王勤章丁国富刘永国周建民李应龙王江平钱彪
- 关键词：CAJAL样间质细胞干细胞因子糖尿病膀胱超微结构
- 人SCL基因pDC315-EGFP真核表达载体的构建及意义被引量：1
- 2010年
- 目的构建含有人SCL基因的pDC315-EGFP真核表达载体,为糖尿病膀胱病变(DCP)的治疗提供新思路。方法从含有人SCL基因的质粒中,采用PCR方法扩增SCL基因,将目的载体pDC315-EGFP进行酶切后交换,其产物转化细菌感受态细胞,对克隆产物进行菌落PCR鉴定,对阳性克隆产物进行测序和比对分析,比对正确的克隆即为构建成功的质粒。结果 PCR扩增的基因片段长度为1 036 bp,测序结果以及重组质粒pDC315-EGFP-SCL阳性克隆凝胶电泳鉴定均证明SCL基因成功克隆到真核表达载体中。结论成功构建了真核表达载体pDC315-EGFP-SCL,该载体有望用于DCP的治疗。
- 周建民丁国富王勤章刘新军刘永国
- 关键词：PCR鉴定
- SCF对高糖环境下膀胱Cajal样间质细胞形态及电生理功能的影响
- 目的：观察干细胞因子(stem cell factor，SCF)干预后高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICCs)形态、超微结构及电生理的变化，探讨SCF对高...
- 刘新军
- 关键词：CAJAL样间质细胞SCF钙离子超微结构
- 应用AdMax载体系统构建SCL基因重组腺病毒表达载体被引量：7
- 2011年
- 目的用AdMax载体系统构建人SCL基因重组腺病毒载体,为研究SCL基因对ICC样细胞功能恢复奠定基础。方法采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-EGFP/SCL,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1、3Cre共转染293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pDC315-SCL经HEK293细胞扩增,纯化后测定病毒滴度。结果 PCR结果和Western blotting检测证实pDC315-SCL重组腺病毒载体构建成功,滴度达到1×1010PFU/mL。结论 AdMax载体系统可成功构建pDC315-SCL重组腺病毒载体。
- 周建民丁国富王勤章刘新军刘永国
- 关键词：重组腺病毒载体转染
- 干细胞因子对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞形态及电生理的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨干细胞因子(SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(ICCs-like)形态及电生理的影响。方法胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs样细胞。实验分组:正常对照组(葡萄糖浓度为5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为15 mmol/L),培养基培养72 h后高糖组分为高糖对照组、SCF 50 ng/mL组、SCF 100 ng/mL组,继续培养24 h及72 h。激光共聚焦显微镜下测量细胞长度并获得每个时间点细胞内钙离子荧光强度值。结果随着培养时间延长,高糖对照组较正常对照组细胞长度明显缩短、钙离子荧光值显著降低(P<0.01)。SCF 50 ng/mL作用72 h后钙离子荧光值较高糖对照组增高(P<0.05)。SCF 100 ng/mL作用24 h后较高糖对照组细胞长度增长、钙离子荧光值增高(P<0.05),而作用72 h后细胞长度明显增长、钙离子荧光值显著增高(P<0.01)。结论外源性SCF干预后对高糖环境造成的ICCs样细胞形态及电生理功能异常有一定的改善或逆转作用。
- 刘新军王勤章丁国富刘永国周建民李应龙王江平钱彪杨兰
- 关键词：CAJAL样间质细胞干细胞因子糖尿病膀胱钙离子
- 干细胞因子对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察干细胞因子(stem cell factor,SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA及蛋白的表达影响。方法胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,培养24 h后分别加入葡萄糖浓度为5 mmol/L(正常对照组)、15 mmol/L(高糖组)培养基培养72 h后,高糖组分为高糖对照组、SCF干预组(50 ng/ml、100 ng/ml),分别继续培养24 h、72 h,应用RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)分别检测膀胱Cajal样间质细胞c-kit mRNA和蛋白表达变化。结果高糖对照组较正常对照组c-kit mRNA及蛋白表达均明显下降。24 h组中,SCF50 ng/ml较高糖对照组c-kit mRNA(P>0.05)和蛋白表达(P>0.05)差异不大,SCF100 ng/ml较高糖对照组c-kit mRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.05)升高;72 h组中,SCF50 ng/ml组、SCF100 ng/ml组较高糖对照组c-kit mRNA(P<0.01)和蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论高浓度SCF可促进已发生形态、机能变化的离体膀胱Cajal样间质细胞c-kit表达上调。
- 刘永国王勤章丁国富刘新军周建民李应龙王江平钱彪杨兰
- 关键词：CAJAL样间质细胞高糖环境
