刘浩飞
- 作品数:14 被引量:55H指数:3
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金动物营养学国家重点实验室开放课题基金更多>>
- 相关领域:农业科学理学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 猪流行性腹泻病毒FQ-PCR检测方法的建立及四个毒株全基因测序和进化分析
- 猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)是猪流行性腹泻病(porcineepidemicdiarrhea,PED)的病原,属于冠状病毒科,为有囊膜,单股正链RNA病毒。该病是...
- 刘浩飞
- 关键词:猪流行性腹泻病毒实时荧光定量PCR系统进化分析
- 文献传递
- 鸭黄病毒病的临床病理学观察及病原学检测
- 2013年
- 本试验通过病理解剖、组织学检查、电镜观察及RT-PCR等方法对一起鸭产蛋下降性疾病进行初步研究。解剖病鸭发现,脾脏肿大,卵泡膜出血、变性;组织学检查结果表明,病鸭肝细胞呈现严重的脂肪变性,脾脏淋巴细胞数量减少;病料细菌分离结果为阴性;黄病毒RT-PCR检测阳性;电镜下可观察到直径为40~60 nm的病毒粒子;参照黄病毒属NS5基因设计合成引物,扩增得到360 bp的目的片段;遗传进化分析表明:该核酸序列与黄病毒科黄病毒属恩塔亚病毒群(Ntaya virus group)的巴格扎病毒(Bagaza virus)的NS5核酸序列同源性最高。
- 刘浩飞黄显明张小飞杨倩
- 关键词:鸭黄病毒病理学RT-PCR
- 猪流行性腹泻病毒的研究进展被引量:33
- 2014年
- 猪流行性腹泻是一种急性、接触性、高度传染性消化道疾病,近年来给我国养猪业带来巨大经济损失。本文就近年来国内外对猪流行性腹泻病毒的研究进展(包括猪流行性腹泻病毒的结构蛋白和非结构蛋白、病毒的细胞培养特点、病毒感染的宿主受体、遗传变异和疫苗的开发等)进行综述,以期为猪流行性腹泻的预防和控制提供帮助。
- 高君恺刘浩飞杨倩
- 关键词:猪流行性腹泻病毒结构蛋白疫苗开发
- 我国华东地区猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传变异分析被引量:3
- 2015年
- 为了确定猪流行性腹泻病毒的流行特点及变异规律,本研究对我国华东地区分离到的14株PEDV的ORF3基因进行了克隆和序列测定,并与国内外代表毒株的ORF3基因进行了比较分析。结果表明:我国华东地区检测的PEDV流行毒株的ORF3基因之间的同源性为92.4%~100%,与经典毒株CV777同源性为92.0%~96.4%,与PEDV变异株的同源性为95.1%~100%。根据ORF3基因的遗传进化分析,分离的14个PEDV毒株与CV777的遗传进化距离较远,与PEDV变异株的遗传进化距离较近,表明我国PEDV流行毒株以变异株为主,较以往的疫苗株CV777发生了较大的变异,因此需要开发新的疫苗,制定更具针对性的防控措施。
- 邓小红余伟权李彬孙冰徐向伟刘浩飞何孔旺郭容利俞正玉李桃梅刘远佳秦爱建
- 关键词:猪流行性腹泻病毒ORF3基因遗传变异分析
- 2011—2012年我国部分地区猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传变异分析被引量:12
- 2013年
- 应用RT-PCR方法对江苏、安徽、山东、江西、河北、上海、北京等省市的146份腹泻仔猪的小肠组织和粪便样本进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测。结果:146份腹泻病料中共检出82份PEDV阳性样品,阳性率为56.2%;对其中14份阳性病料的ORF3基因进行测序,将所测序列与GenBank中PEDV参考毒株的ORF3序列进行分析比较,并绘制了系统进化树。所测14个PEDV ORF3序列与GenBank中的38个参考毒株ORF3核苷酸序列同源性为93%~100%;ORF3基因系统进化树分析表明PEDV分为3组,13个病毒属于PEDV 3组,另外1个属于PEDV 1组。ORF3遗传变异分析表明:中国最近流行的PEDV野毒株与韩国野毒株关系密切,但与欧洲株以及中国目前使用的疫苗株基因差异较大。
- 郭容利何孔旺茅爱华刘浩飞俞正玉倪艳秀温立斌李彬王小敏张雪寒吕立新周俊明
- 关键词:ORF3基因
- 产链孢红素枯草芽孢杆菌增强仔猪肠道黏膜免疫功能的研究
- 由不同病原引起的仔猪腹泻是养猪场普遍存在的肠道传染病。近几年该病的频繁发生已给我国乃至世界养猪业造成了极大的经济损失。仔猪肠道黏膜免疫系统发育不健全是仔猪发生腹泻性疾病的重要原因。因此,促进仔猪黏膜免疫系统的发育,提高黏...
- 刘浩飞
- 关键词:仔猪腹泻类胡萝卜素肠黏膜免疫枯草芽孢杆菌树突状细胞
- 表达C<sub>30</sub>类胡萝卜素的重组枯草芽孢杆菌
- 本发明涉及能够合成30个碳原子(C<Sub>30</Sub>)的类胡萝卜素4,4′‑二脱辅基链孢红素(4,4’‑diaponeurosporene)重组枯草芽孢杆菌,属于生物技术基因工程领域。本发明成功构建了含有C<Su...
- 杨倩刘浩飞徐文雯朱立麒
- 文献传递
- C30类胡萝卜素通过CD36和NF-κB信号活化树突状细胞
- 类胡萝卜素是人和动物必需的营养物质之一.根据分子结构不同,类胡萝卜素可分为C30类胡萝卜素和C40类胡萝卜素.对于C40类胡萝卜素的免疫功能已有许多报道,而我们对于C30类胡萝卜素免疫功能的认识却很少.本研究首次对重组枯...
- 刘浩飞杨倩
- 猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用被引量:5
- 2014年
- 为定量检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),建立了检测PEDV的TaqMan荧光定量PCR方法.根据PEDV基因组中保守的N基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有N基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应.结果表明,该试验建立的荧光定量PCR方法在1μl 10^1 ~ 10^9拷贝之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.99以上,扩增效率在90%与100%之间.该方法的检测灵敏度为10拷贝,与常规RT-PCR方法相比,该方法敏感性更高,而且该检测方法特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应,批内和批间的变异系数均低于3%,表明该方法的重复性较好.对华东地区采集的130份临床样品进行检测,结果显示,PEDV的阳性率为63.1%.
- 李彬刘浩飞孙冰茅爱华杜露平何孔旺郭容利温立斌张雪寒倪艳秀周俊明吕立新俞正玉王小敏胡屹屹祝昊丹于洋
- 关键词:猪流行性腹泻病毒TAQMAN荧光定量PCR流行病学调查
- PCV2感染对仔猪NO-NOS系统的动态影响
- 2011年
- 将19头PCV2和PRRSV血清抗体阴性的普通断奶仔猪分为对照组(4头)和攻毒组(15头),攻毒组每头仔猪滴鼻接种PCV2病毒悬液4mL(5×105 TCID50/mL)并用KLH刺激,分别在攻毒后14、21、35d各扑杀5头仔猪采集血清和脾脏、淋巴结、胸腺(对照组4头在攻毒当天扑杀)。检测各种组织中NO、TNOS和iNOS的含量。结果显示,攻毒猪各组织中NO含量均在攻毒后14d显著升高(P<0.05),然后缓慢下降;血清和3种免疫器官中NOS(包括TNOS和iNOS)活性的变化趋势比较一致,均表现出先升高然后再逐渐降低的特点。此外,iNOS活性变化与其相应的组织中NO含量呈显著正相关(P<0.01)。结果表明,PCV2在感染早期(1~14d)可激活仔猪多种组织中NO-NOS系统,中后期逐渐恢复,这种变化与PCV2所致的组织损伤密切相关,因此,NO-NOS系统可能是PCV2相关疾病发生发展的重要信号。
- 陈耿刘浩飞王兆飞张亚群陈鸿娟郭昊张书霞
- 关键词:仔猪一氧化氮一氧化氮合酶