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植物激素脱落酸的信号转导被引量：41: 2000年; 介绍了与ABA信号转导直接相关的ABA结合蛋白。; 刘璞陈珈; 关键词：脱落酸信号转导植物激素第二信使

拟南芥PKA催化亚基基因的克隆、原核表达及其催化活性的鉴定(英文): 2003年; 蛋白质的磷酸化与脱磷酸化是生物体内存在的一种普遍的调节方式 ,几乎参与所有的生命活动过程。利用Blast2 .0分析拟南芥基因组序列发现存在一个与动物蛋白激酶cDNA同源性的序列 ,在GenBank中比较发现它与动物的依赖cAMP的蛋白激酶 (PKA)的催化亚基 (C亚基 )有相似的特征序列。提取拟南芥 (Arabidopsisthaliana(L .)Heynh .)的总RNA ,通过RT_PCR克隆得到这一cDNA片段 ,经序列测定证实它具有完整的阅读框架 ,将其克隆至pET30a原核表达载体 ,结果表明在大肠杆菌 (E .coli)BL2 1 (DE3)中该表达质粒在IPTG诱导下表达产生大量带寡聚组氨酸标记的重组蛋白 ,该蛋白在 37℃表达时主要以包含体形式存在 ,而在 2 2℃表达时主要以可溶性蛋白形式存在。经过与组氨酸结合金属螯合树脂亲和柱层析纯化后 ,得到纯化的目的蛋白 ,其纯度达到 87%以上。活性鉴定表明其具有依赖于cAMP的蛋白激酶活性 ,而加入PKA的抑制剂 (H_8)后 ,其活性显著下降。从而证实它确实是拟南芥的PKA催化亚基。Westernblot结果显示它几乎不受ABA、NaCl等逆境的诱导。; 刘璞陈珈张会霞王学臣; 关键词：活性测定拟南芥原核表达

ABA调节基因启动子的表达活性分析及PKA催化亚基的克隆、功能分析: 脱落酸（abscisic acid,ABA）是上个世纪六十年代鉴定出的一种天然存在的植物激素.它可能存在于所有高等植物中,参与调控许多重要的生理过程,如：气孔的关闭,胚胎发育,种子休眠与萌发以及叶片的脱落等.研究发现它都...; 刘璞; 关键词：信号转导 GUS报告基因 CAMP 蛋白激酶; 文献传递

cAMP参与烟草悬浮细胞的ABA信号转导(英文)被引量：2: 2002年; ABA诱导型启动子 (rd2 9A)重组到报告基因 (GUS)的上游构建表达载体。通过农杆菌介导转化烟草 ,获得转基因植株。将转基因植株诱导愈伤组织 ,建立稳定、均一的转rd2 9A_GUS融合基因的悬浮培养细胞系。用ABA处理悬浮细胞 2 4h后GUS活性显著升高 ,说明外源ABA能够诱导rd2 9A启动子的表达 ,获得了用于ABA信号转导研究的实用细胞系。在ABA激活表达的细胞介质中加入尼克酰胺 (cADPR合成酶的抑制剂 )或U73 12 2 (PLC抑制剂 )只能部分抑制ABA的效应 ,但如果加入蛋白激酶抑制剂K2 5 2a ,抑制效果达 95 %以上。用可跨膜的cAMP的类似物8_Br_cAMP处理细胞发现 ,它能代替ABA的作用 ;当介质中加入 1mmol/LIBMX(磷酸二酯酶的抑制剂 )增加cAMP的稳定性 ,发现低浓度的 8_Br_cAMP与ABA相同的效应。以上结果表明cAMP参与了烟草悬浮细胞中ABA信号的传递。; 刘璞孟令军张会霞陈珈王学臣; 关键词：CAMP 烟草悬浮细胞信号转导脱落酸报告基因

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刘璞