刘红梅
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：重庆市高等教育教学改革研究项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
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- miR-199a-5p在血管紧张素Ⅱ致心肌肥大细胞中的表达变化
- 2014年
- 目的研究miR．199a-Sp在血管紧张素Ⅱ（AngII）导致肥大心肌细胞中的表达变化。方法雄性sD大鼠30只，采用完全随机方法将其分为假手术组、模型组、氯沙坦组[10mg／（kg·d）]，每组10只。制备腹主动脉缩窄致心肌肥大模型，在术后第28天，检测心脏质量指数和左心室质量指数，HE染色观察左心室心肌细胞肥大情况，qRT—PCR方法测定左心室miR-199a-Sp表达。取10只1-3dSD乳鼠，消化获得心肌细胞，分为对照组、模型组（1×10^-7mol／LAngII）和氯沙坦组（1×10^-7mol／LAngⅡ＋1×10“mol／L氯沙坦钾），qRT．PCR方法测定心肌细胞miR-199a-Sp表达；分别转染miR-199a-Sp模拟物或者抑制物，观察[^3H]-亮氨酸的掺人情况。结果腹主动脉缩窄大鼠左心室心肌细胞明显肥大，左心室miR-199a-5p表达显著升高（P〈0．05），AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦可显著逆转上述变化。体外实验发现氯沙坦可显著降低AngII刺激致乳鼠心肌细胞所致的miR-199a-5p显著升高（P〈0．05），采用转染miR-199a-Sp抑制物的方法抑制miR-199a-Sp表达可显著抑制AngII刺激所致的心肌细胞[^3H]-亮氨酸掺入（P〈0．01）；且转染miR-199a-Sp模拟物增加miR-199a-Sp表达可显著增加[^3H]．亮氨酸掺入（P〈0．01）。结论miR-199a-Sp是介导AngⅡ致心肌细胞肥大的重要调节分子，可能在该信号通路中发挥重要作用。
- 刘红梅陈新孙丹云唐渊李晓辉
- 关键词：腹主动脉缩窄心肌肥大血管紧张素II心肌细胞
- G蛋白抑制多肽汇利欣康对心肌肥大microRNA表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨G蛋白抑制多肽汇利欣康(HLXK)对心肌肥大时microRNAs表达的影响。方法 36只成年♂昆明小鼠,随机分为对照组、模型组、HLXK组,每组12只。去甲肾上腺素(NE,1.5 mg·kg-1)腹腔注射造模,每日两次;HLXK组在造模同时给予HLXK(90μg·kg-1,ip,Bid);对照组注射给予等体积的生理盐水。在造模后d 20,称量小鼠体重和左心室重量,计算左心室重量指数。将消化培养的大鼠乳鼠心肌细胞接种于96孔板,分为对照组、模型组(NE 1μmol·L-1)、HLXK组(NE 1μmol·L-1+HLXK 11.30 mg·L-1),用[3H]-亮氨酸参入法检测蛋白质合成。以qRT-PCR测定心肌组织中microRNAs的表达。结果与模型组相比,HLXK治疗组小鼠左心室重量指数明显降低,心肌细胞肥大明显减轻,[3H]-亮氨酸参入量明显减少。NE可使小鼠心脏中和培养的大鼠心肌细胞中miR-199、miR-1-2-5p和miR-499的表达量明显增加,HLXK可明显抑制以上效应。结论 HLXK可抑制NE导致的小鼠心肌肥大,其机制可能与调节miR-199、miR-1-2-5p和miR-499的表达有关。
- 孙丹云刘红梅唐渊李晓辉
- 关键词：去甲肾上腺素心肌肥大心肌细胞
- 半乳糖上调内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平抑制巨噬细胞活性
- 2024年
- 目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该聚糖配体末端糖苷键类型;分别用左旋葡萄糖、葡萄糖、N-乙酰基葡萄糖、甘露糖、N-乙酰基甘露糖、半乳糖、唾液酸、蔗糖处理内皮细胞48 h,采用流式细胞术检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体的表达;将内皮细胞分为对照组和半乳糖组(n=3),Western blot、流式细胞术、免疫荧光分析半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体表达的影响;α2-3,6,8唾液酸酶处理内皮细胞后,Western blot检测半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体恢复时间的影响;半乳糖处理内皮细胞后,Western blot检测分析细胞内唾液酸合成关键酶(GNE、NANS、NANP、CMAS、NPL以及ST3Gals)表达水平,并用RT-qPCR验证相关蛋白的mRNA表达;siRNA敲低NANP、CMAS及ST3Gal-Ⅲ,Western blot检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平变化;巨噬细胞与内皮细胞共培养实验分析Siglec-9聚糖配体的增加对巨噬细胞的凋亡与吞噬能力的影响。结果内皮细胞上表达有Siglec-9聚糖配体且该配体为末端结构为α2-3连接的唾液酸糖蛋白;与对照组比较,半乳糖组内皮细胞上该聚糖配体表达水平显著增加(P<0.01),但半乳糖的添加对该配体的自我恢复时间无影响;与对照组比较,半乳糖处理的内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ表达水平升高(P<0.05,P<0.01),且RT-qPCR验证结果与其一致;抑制内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ的表达后,内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平下降(P<0.01)。共培养实验中,与未处理组比较,半乳糖处理的内皮细胞促进巨噬细胞凋亡增加(P<0.01),并导致其吞噬能力减弱(P<0.05)。结论半乳糖通过NANP-CMAS-ST3Gal-Ⅲ通路上调内皮细胞上Siglec-9聚糖配体水平,从而抑制巨噬细胞�
- 吴妮婷摄渊婷刘红梅李瑾贾乙
- 关键词：半乳糖内皮细胞巨噬细胞
- miR-135a-5p抑制肺动脉平滑肌细胞中TRPC1的表达降低大鼠肺动脉高压
- 肺动脉高压(PAH)以肺血管重构为显著特征,其中肺动脉平滑肌细胞异常增殖是构成肺动脉血管重构的主要病理基础.TRPCs是PASMCs细胞膜上的非选择性阳离子通道超家族,对维持细胞内外钙离子浓度具有重要作用,抑制其表达可抑...
- 刘红梅唐渊李晓辉
- 缺氧下调血小板表面Siglec-9聚糖配体导致血小板功能异常活化被引量：2
- 2022年
- 目的探讨血小板表面Siglec-9聚糖配体表达水平在缺氧条件下的变化及其对血小板活化功能的影响。方法鉴定血小板表面表达的Siglec-9/E聚糖配体,并加入唾液酸酶处理血小板,分为对照组和唾液酸酶组;对24只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠和血小板进行缺氧处理,分为对照3 d组、缺氧3 d组、对照7 d组和缺氧7 d组(n=6);将健康志愿者全血分离提取血小板放置于缺氧箱,分为对照组、缺氧48 h组、唾液酸神经节甘脂(Ganglioside GT1b,GT1b)组和奥司他韦组(n=3)。采用流式细胞术检测血小板上Siglec-9/E配体、神经氨酸酶1(Neuraminidase-1)等表达,以及二磷酸腺苷(ADP)、胶原和凝血酶刺激后血小板活化标记物CD62p的表达水平;利用髓系细胞条件性6只6~8周龄雄性Siglec-E基因敲除小鼠(Lyz2-cre:Siglec-E^(flox/flox))血小板验证Siglec-E对血小板活化的抑制作用。结果相对分子质量约为130×10^(3)的Siglec-9/E配体在血小板表面广泛表达且具有唾液酸末端的聚糖结构;与对照7 d组相比,缺氧7 d组小鼠外周血血小板上该配体表达显著降低18.03%(P<0.05),CD62p表达在ADP、胶原和凝血酶刺激下显著增高(P<0.01),缺氧48 h组培养的血小板上该聚糖配体出现了相同改变(P<0.01);与野生型比较,敲基因小鼠血小板在ADP、胶原和凝血酶刺激下CD62p水平显著增高(P<0.01);Siglec-9/E特异性配体GT1b处理能够逆转缺氧导致的血小板异常活化(P<0.05);神经氨酸酶抑制剂能够阻断缺氧导致的Siglec-9配体表达降低(P<0.05)。结论缺氧激活NEU1降低Siglec-9/E聚糖配体表达,减弱了Siglec-9/E途径抑制血小板活化的能力,导致血小板功能异常活化。
- 摄渊婷曾东风刘红梅吴妮婷贾乙
- 关键词：缺氧血小板
- 18种中药多糖与Siglec-9的亲和力测试及其抗炎作用研究被引量：2
- 2024年
- 目的比较18种中药多糖与唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin,Siglec-9)的亲和力以及抗炎能力,探讨中药多糖发挥抗炎作用的新机制。方法选择18种不同药性的中药用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法检测多糖含量,高效液相色谱法检测多糖的单糖组成,红外光谱法检测中药多糖结构。通过竞争性ELISA法检测多糖与Siglec-9的亲和力,并研究中药多糖对LPS诱导巨噬细胞炎症反应以及R848诱导中性粒细胞NETosis的影响,利用髓系细胞特异性敲除Siglec-E(Lyz2-cre:Siglec-E flox/flox)小鼠来源的原代巨噬细胞和腹腔中性粒细胞进一步明确多糖结合Siglec-9产生抗炎作用的机制。结果中药多糖的糖含量均在55%以上,主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等组成,但单糖构成比各不相同。红外光谱检测4种代表性中药多糖均有典型的多糖吸收峰,柴胡和蒲公英多糖具有葡萄糖醛酸结构。枸杞和黄芪多糖与Siglec-9的亲和力,对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应和R848诱导的中性粒细胞NETosis反应无显著抑制作用。柴胡和蒲公英多糖与Siglec-9亲和力较强(P<0.01),能够显著抑制上述炎症反应,但其抗炎作用在髓系细胞特异性敲除Siglec-E基因小鼠来源的巨噬细胞和中性粒细胞中消失。结论中药多糖与Siglec-9的亲和力有潜力成为研究中药抗炎作用的新的现代药理学机制。
- 刘瑶瑶刘娟娟秦怡玉李瑾刘红梅贾乙
- 关键词：中药多糖抗炎
- 发生认识论对生物药剂学与药物动力学教学内容的建构被引量：4
- 2016年
- 生物药剂学与药物动力学为药学类专业学生的核心课程之一,主要应用数学方法和动力学原理研究药物在体内的转运过程。发生认识论是由心理学家让·皮亚杰提出的,其理论认为认知发展的本质是一个不断适应和平衡化的过程。本文拟应用"发生认识论"的原理和方法对生物药剂学与药物动力学的教学内容进行建构,利于教学过程中学生开展图式准备,促进同化和顺应过程,易于认知达到新的平衡,实现更好的教学效果。
- 唐渊刘红梅贾皎娇张建祥李晓辉贾乙
- 关键词：生物药剂学与药物动力学发生认识论教学内容
- miR-135a-5p与miR-199a-5p在心肌肥大中的作用及初步机制研究
- 心肌肥大是高血压、肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)和其它心血管疾病的常见并发症,是心肌重构的典型特征,可引起心力衰竭,最终导致死亡。右心肥大常见于PAH,肺血管重构和阻...
- 刘红梅
- 关键词：心肌肥大心血管疾病发病机制
- 文献传递
- 以建构主义为指导的生物药剂学与药物动力学综合性实验教学改革
- 生物药剂学与药物动力学是药学类专业的核心课程之一,其实验教学能使学生巩固和扩展理论教学内容,培养学生的自主学习和原始创新能力.建构主义认为,学习是在特定的"情景"下,通过"协作和会话",实现新旧知识之间融合的"意义建构"...
- 邓有才刘红梅贾乙张建祥唐渊李晓辉
- 关键词：高等医药院校实验教学
- 应用型药学人才培养体系在药剂实验课中的初探被引量：10
- 2016年
- 药剂学实验课程与药剂学课程教学质量紧密相关,与学生今后从事药品使用、医院制剂、药品生产、药品质量监控等相关方面的工作有紧密联系。本次教学改革以提高学生药学综合素质为出发点,在药剂学实验课程中整合其他药学专业及药学相关专业实验内容,不仅发挥了学生的主观能动性和学习潜力,提高了学生的学习能力,达到了培养综合素质较高的应用型药学人才,也为广大药学教育工作者探索更有效的药剂学实验课程教学方法提供可借鉴之处。
- 王晨平李晓辉陈新刘红梅贾乙
- 关键词：药剂学实验教学教学改革药学
