史平玲
- 作品数：10 被引量：19H指数：3
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究
- IgG Fc受体(Fcγ receptors, FcγRs)可特异亲和免疫球蛋白IgG(IgG,Immunoglobulin G) Fc片段，是非常重要的免疫细胞表面分子，在机体免疫防御中有很重要的作用，是细胞免疫和体液...
- 史平玲
- 关键词：共转染猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立
- 2010年
- 本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
- 史平玲邬成业乔松林张改平王爱萍肖治军祁艳华卜丹
- 关键词：共转染MARC-145细胞
- H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达条件的优化
- 为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。
结果：使用LB培养基于37℃培养3．5 h后,采用...
- 邬成业史平玲张改平郝慧芳王爱萍祁艳华卜丹
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达
- 猪FCγRIII介导PRRSV抗体依赖增强作用研究
- 史平玲
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- 猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立
- 2011年
- 为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(Porcine Fc gamma receptorⅢ,poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定。结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合。
- 邬成业史平玲乔松林王爱萍郝慧芳杜晓明王林林张改平
- 关键词：共转染
- 猪繁殖与呼吸综合征疫苗佐剂研究进展
- 2010年
- 疫苗免疫是预防和控制传染病的主要措施,但对于猪繁殖与呼吸综合征,疫苗免疫存在免疫效率低与安全性差的问题,效果并不理想。因此,如何在安全剂量下提高动物机体的免疫力,成为疫苗研究的热点之一。试验证明细胞因子、化学试剂和微生物产物等几种免疫佐剂可以增强猪繁殖与呼吸综合征疫苗的免疫效果。在研究的9个疫苗佐剂中,IL-2、IL-12、IFN-α、poly IC和poly ICLC、CpG ODN等能增强猪繁殖与呼吸综合征疫苗的细胞免疫效应;CpG ODN和霍乱毒素能显著提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗的抗体产生水平;IL-2和CpG ODN在临床实验中能增强疫苗对实验动物的保护,是最具潜力的免疫佐剂。
- 鲍登克乔松林张改平杨苏珍万博史平玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征疫苗佐剂
- H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达条件的优化被引量：1
- 2010年
- 为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。结果:使用LB培养基于37℃培养3.5h后,采用终浓度为2mmol/L的IPTG在28℃、200r/min诱导培养5h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70ku;Western-blot结果表明,pET32a-NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应,说明NP蛋白得到正确表达。
- 邬成业史平玲张改平郝慧芳王爱萍祁艳华卜丹
- 关键词：禽流感核衣壳蛋白原核表达
- H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白(NP)基因的进化及原核表达被引量：4
- 2010年
- 参考GenBank上H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计引物,PCR扩增NP基因,对其进行序列分析并构建分子进化树。将克隆的NP基因插入原核表达载体pET32a,在大肠杆菌中进行诱导表达,对诱导表达的NP重组蛋白进行纯化、Western-Blot鉴定及免疫原性分析。结果表明,克隆的NP基因与GenBank上发表的另外2个河南AIV毒株亲缘关系较近,诱导表达的NP重组蛋白主要以可溶性形式存在,分子量约为70 kDa,并且能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。
- 邬成业王爱萍郝慧芳史平玲游雷鸣李培培张改平
- 关键词：H5亚型原核表达
- 家畜IgG Fc受体研究进展被引量：6
- 2010年
- IgG Fc受体(Fcγreceptors,FcγRs)是一类重要的免疫细胞表面分子,对细胞反应的正向和负向调节发挥重要的免疫学功能,是治疗过敏和自身免疫性疾病理想的药物靶标。综述了FcγRs亚类的生物学特性及家畜FcγRs的研究进展,并对FcR(Fc受体)免疫学功能也进行了阐述。
- 史平玲王爱萍乔松林张改平邬成业鲍登克
- 关键词：FC受体免疫调节激活型受体
- 猪圆环病毒2型ORF2基因片段的克隆与原核表达被引量：7
- 2010年
- 为在原核表达系统中表达猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因片段,提取感染PCV2的细胞基因组DNA,PCR扩增ORF2基因片段并克隆至pMD-18T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定后,将该基因重组至pET-28a原核表达载体,构建了表达载体pET-28a-ORF2。该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1mmol/LIPTG于37℃诱导5h得到最佳表达。表达重组蛋白的分子量为26.0kD,以包涵体形式存在。Western-Blot分析表明,该重组蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。
- 祁艳华王爱萍李学伍游雷鸣史平玲胡峰张改平
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2基因克隆原核表达
