吴德生
- 作品数:83 被引量:144H指数:6
- 供职机构:深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生环境科学与工程生物学农业科学更多>>
- BDE-209对人正常肝L-02细胞生长和凋亡的影响
- 2020年
- 采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)和Hoechst 33342/PI等,分析十溴联苯醚(BDE-209)对人正常肝L-02细胞增殖和凋亡的影响。结果显示,在不同浓度水平(0~70μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后,细胞增殖抑制率随着BDE-209浓度的升高而升高。经SPSS-Probit-Logit法计算,得出BDE-209对人正常肝L-02细胞24小时的IC50为127.08±24.93μg/mL。在不同浓度水平(0~15μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后,与对照组相比,各剂量组细胞未出现明显的细胞形态变化,仅在15μg/mL剂量组观察到细胞减少的现象。凋亡染色后,荧光显微镜检发现,随着BDE-209浓度升高,亮蓝、淡粉染色细胞数量增大,人正常肝L-02细胞的凋亡率增高。与对照组相比,各剂量组差异均具有统计学意义。分析结果表明,BDE-209可引起人正常肝L-02细胞增殖受到抑制,并诱导细胞凋亡率增加。
- 朱婷婷陆永奋齐秀娟黄毅孟海涛尹东高孙滔滔邓臣吴德生
- 关键词:BDE-209细胞增殖细胞凋亡
- 双酚A对小鼠胚胎干细胞OCT4及SOX2基因表达的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探讨双酚A(bisphenolA,BPA)对小鼠胚胎干细胞(mESC)的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响。方法分别以10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4mol/L浓度的BPA及二甲亚砜(溶剂对照组,DMSO)处理mESC系(S6)细胞24h,重复处理3次,倒置显微镜下观察正常组、染毒组细胞的形态变化,CCK-8法检测BPA对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50);分别采用real—time(RT)一Q—PCR和western—blotting技术检测BPA作用下OCTg、SOX2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果BPA对mESC有一定的毒性作用,染毒浓度越大,细胞活性越小,二者呈剂量-效应关系,并通过计算得出BPA对mESC的IC50为4.3×10^-4mol/L,同时结合BPA的环境相关暴露浓度和相关资料,最终取10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4mol/L系列浓度作为后续实验浓度;BPA处理24h后,mESC细胞形态发生改变,较高浓度组与对照组比较,细胞数量明显减少,出现少许漂浮的细胞,克隆变得不规则,分化趋势明显。BPA浓度为10^-7、10^-6、10^-5、10^-4的OCT4mRNA相对表达量分别为1.146±0.087、1.156±0.030、1.158±0.103、1.374±0.053,均高于对照组(1.000±0.000)(t值分别为-2.384、-2.953、-3.203、-4.021,P值均〈0.05);BPA染毒浓度为10^-4mol/L(1.113±0.052)的SOX2mRNA相对表达水平高于对照组(1.000±0.000)(t=-2.765,P〈0.05)。染毒浓度为10^-5、10^-4mol/L的OCT4蛋白质相对表达量分别为1.360±0.168、1.602±0.151,均高于DMSO组(1.0004-0.000),差异有统计学意义(t值分别为-3.538、-4.002,P值均〈0.05);而各浓度组SOX2蛋白相对表达水平差异无统计学意义。结论BPA对mESC具有一定的细胞毒性,在一定剂量范围内BPA可以使mESCOCT4基因表达增加,而对SOX2基因无明显影响。
- 罗凌凤杨淋清吴德生周明龚春梅刘庆成夏菠黄冠琴匡侠锋庄志雄张文昌
- 关键词:胚胎干细胞双酚A
- 磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯对大鼠的急性和亚慢性毒性作用
- 2023年
- 目的:研究磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯(TDCIPP)对大鼠的急性和亚慢性毒性作用。方法:急性毒性试验中,将50只SPF级SD大鼠随机分为5组,每组10只,雌雄各半,按照TDCIPP剂量464、1000、2150、4640和10000 mg/kg分别进行单次经口灌胃染毒,观察14 d。在亚慢性毒性试验中,将80只SPF级SD大鼠随机分为4组,每组20只,雌雄各半,TDCIPP按照0、13.3、40、120 mg/(kg·d)的剂量,每天1次,连续灌胃112 d。于试验结束当天分别称取大鼠体质量;腹主静脉取血进行血常规、血液生化指标的检测;处死大鼠后收集脑、心、肝、脾、肺、肾并称取质量,计算脏器系数,并对这些组织进行HE染色分析组织病理变化。选择具有代表性的指标为毒性效应,使用基准剂量法(BMD)评估在特定风险水平下的暴露水平,与无可见有害作用法(NOAEL)参考值进行比较,分析相对更具体和敏感的剂量限值。结果:在急性经口毒性试验中,TDCIPP对SD大鼠的半数致死剂量(LD_(50))为2000~2300 mg/kg,属低毒物质。在亚慢性经口毒性试验中,与对照组比较,120 mg/(kg·d)染毒组显著影响雌鼠的体质量增长(P<0.05);40和120 mg/(kg·d)染毒组大鼠肝和肾的脏器系数明显升高(P<0.05);40 mg/(kg·d)染毒组雄鼠白细胞计数、淋巴细胞计数、单核细胞计数、嗜酸性粒细胞计数均升高(P<0.05);120 mg/(kg·d)染毒组雌鼠红细胞计数、红细胞压积、嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞百分比降低(P<0.05);40与120 mg/(kg·d)染毒组雄性大鼠AST水平降低(P<0.05);40 mg/(kg·d)染毒组雌性大鼠ALT和AST均明显降低(P<0.05);40和120 mg/(kg·d)染毒组HE染色显示明显的肾脏病理损伤。基于NOAEL评估TDCIPP最高无可见有害作用剂量为13.3 mg/(kg·d);基于BMD法以肾功能指标血肌酐作为危险度评定中计算参考剂量的基础,其限值为2.696 mg/(kg·d)。结论:TDCIPP急性和亚慢性染毒对大鼠具有毒性作用,肝和肾可能是TDCIPP毒性主要的�
- 张久弘陈效赵静许本洪吴德生刘建军
- 关键词:磷酸三酯急性毒性亚慢性毒性脏器系数半数致死剂量
- 邻苯二甲酸酯类的生殖毒性及其环境内分泌干扰作用
- 本文首先介绍了邻苯二甲酸酯类塑化剂的理化特性,其次介绍了塑化剂的来源与接触机会,然后介绍了塑化剂在人体的吸收、分布、代谢与排泄,分析了急性、慢性塑化剂的一般毒性,重点分析了雄性、雌性、胚胎生殖毒性,介绍了致突变作用、致癌...
- 吴德生秦逍云谭琴
- 关键词:生殖毒性食品检测
- 文献传递
- 三氯异氰尿酸应用研究现状及进展被引量:9
- 2018年
- 三氯异氰尿酸是异氰尿酸的含氯衍生物,有效氯含量高,作用时间长,具有强力的杀菌效果,对水中大部分细菌繁殖体、真菌、病毒芽孢都具有杀灭作用。目前该消毒剂已被广泛用于医疗卫生、餐饮服务及水体的消毒。本文对三氯异氰尿酸的理化特性、消毒应用研究进展及毒理学安全风险综述如下。1理化特性1.1结构与稳定性三氯异氰尿酸(Trichloroisocyanuric acid,TCCA).
- 闫雪莹吴德生刘素纯袁建辉刘建军
- 关键词:三氯异氰尿酸代谢物毒性
- CYP3A4沉默细胞株建立及其对三氯乙烯毒性的影响被引量:1
- 2014年
- 目的构建CYP3A4基因沉默载体,转染L02肝细胞,建立CYP3A4沉默细胞株并观察其对三氯乙烯毒性的影响。方法根据GenBank提供的CYP3A4基因mRNA序列设计合成shRNA,将shRNA连接到pLKO.1-puro中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP3A4沉默细胞株,通过荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP3A4沉默细胞进行染毒12h,观察凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因(c-fos、c-myc、K-ras、p53)表达变化。结果测序证明插入pLKO.1-puro载体的干扰序列与设计的序列一致,荧光定量PCR检测CYP3A4沉默细胞CYP3A4基因表达比正常L02肝细胞下降77.3%,Western blot实验显示CYP3A4沉默细胞CYP3A4蛋白表达水平比正常L02肝细胞下降84.6%。CYP3A4沉默细胞经三氯乙烯染毒后Bcl-2表达水平显著高于L02细胞的表达水平;Caspase-3表达水平无明显改变;Caspase-8仅在TCE高剂量组表达下降;Caspase-9在TCE剂量≥1.0 mmol/L表达水平下降;癌基因c-fos、c-myc、k-ras和p53表达水平都有一定程度下降,部分剂量组存在显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论三氯乙烯对正常肝细胞和CYP3A4沉默细胞凋亡基因和癌基因表达存在明显差异,提示CYP3A4是三氯乙烯在体内代谢的重要因素,与三氯乙烯毒性存在一定关系。
- 徐新云毛侃琅袁建辉毛吉炎吴德生黄海燕谢杏秦逍云谭琴
- 关键词:肝细胞CYP3A4慢病毒载体三氯乙烯
- 雌激素及其受体相关的表观遗传调控研究进展
- 吴德生杨淋清黄海燕袁建辉杨细飞
- 关键词:雌激素受体表观遗传
- PM2.5对斑马鱼胚胎发育早期氧化应激和DNA甲基化调控相关基因表达的影响被引量:3
- 2017年
- 目的:探讨细颗粒物(PM2.5)暴露后,斑马鱼胚胎发育过程中氧化应激和DNA甲基化基因表达的改变。方法:使用大功率大气PM2.5采样器收集PM2.5样品,超声后冷冻提取PM2.5,分别以0、5、20μg/m L的浓度作用于斑马鱼胚胎。在暴露后2、6、24、48 h提取胚胎RNA,用荧光定量PCR法检测氧化应激相关基因超氧化物歧化酶1(sod1)和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(ogg1)以及DNA甲基化相关基因DNA羟化酶1(tet1)、DNA甲基转移酶(dnmt1)m RNA的表达。结果:斑马鱼胚胎暴露于0、5、20μg/m L的PM2.5后2~6 h,sod1、tet1和dnmt1的m RNA相对表达量均随着剂量升高而明显升高,呈剂量-效应关系(r依次=0.98、0.98、0.99,P均<0.05);PM2.5暴露后2~6 h ogg1的m RNA相对表达量在5μg/m L剂量组显著升高(P<0.05)。而PM2.5暴露后24~48 h,sod1、ogg1、tet1和dnmt1的m RNA相对表达量相对2~6 h均明显下降(P<0.05)。结论:PM2.5对斑马鱼胚胎的氧化应激相关基因sod1和ogg1以及DNA甲基化相关基因tet1和dnmt1的m RNA表达均有影响。
- 吴德生杨飞袁建辉杨淋清黄海燕刘建军庄志雄
- 关键词:细颗粒物氧化应激
- 鼻腔滴注纳米二氧化硅对大鼠血清生化指标的影响
- 2011年
- [目的]研究纳米二氧化硅(nm-SiO2)对大鼠血清生化指标的影响。[方法]25只SPF级雄性SD大鼠,随机分为生理盐水对照组、微米级二氧化硅对照组、纳米低剂量组、纳米中剂量组、纳米高剂量组5组,鼻腔滴注染毒8周;随后采集血液,采用生化分析仪检测血清生化指标。[结果]nm-SiO2染毒组与对照组相比,天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平显著降低(P<0.05),其余指标间差异均不显著(P>0.05)。[结论]SD雄性大鼠鼻腔滴注nm-SiO2对肝功能生化指标有一定的影响,但对肾功能生化指标的影响不明显。
- 黄新凤陈宏彬周丽杨细飞吴德生匡侠锋刘建军
- 关键词:纳米二氧化硅SD大鼠血清生化指标
- DEHP对雄性大鼠生殖毒性和激素调控基因表达的影响
- 目的:邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是常用的塑化剂之一,本文主要探讨DEHP对雄性大鼠睾丸的超微结构影响和激素调控基因表达水平的变化,为研究DEHP生殖毒性提供科学依据。方法:40只5周龄雄性SPF级SD大鼠...
- 秦逍云谭琴徐新云吴德生黄海燕王利彭鹏
- 关键词:邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯生殖毒性