吴通义
- 作品数：7 被引量：104H指数：5
- 供职机构：中国农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小鼠孵化囊胚细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究被引量：8
- 2004年
- 利用小鼠孵化囊胚为模型 ,为猪孵化囊胚的冷冻保存摸索适宜的方法和条件 :在 2 5和 37℃条件下 ,用不同含量的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠孵化囊胚实施细管法和OPS法冷冻保存。在 2 5℃条件下 ,细管一步法冷冻保存后的囊胚恢复率仅为 32 5 %～ 74 4 % ,与对照组 (10 0 % )差异极显著 (P <0 0 1) ;而细管二步法冷冻组用方法C解冻后 ,孵化囊胚恢复率达 87 0 % ,为细管法最佳组 ,但仍与对照组有显著差异 (P <0 0 5 )。在 37℃条件下 ,改用OPS法冷冻后 ,以方法A脱出抗冻保护剂 ,孵化囊胚恢复率最高值为 87 2 % (P <0 0 5 )。当采用EDFS30和EDFS4 0对孵化囊胚冷冻保存后 ,以方法C脱出抗冻保护剂 ,恢复率分别高达 97 8%和 93 3% (P >0 0 5 )。利用细管法和OPS法 2种最佳冷冻 -解冻组获得的 133和 15 4枚胚胎 ,分别移植给 12和 10只假妊娠 3～4d的受体母鼠。使 2种冷冻方法均有 6只妊娠 ,各产仔 2 2和 36只 ,产仔率分别为 35 5 %和 39 1% ,与对照组(39 8% )差异均不显著 (P >0 0 5 )。证明 2种方法对胚胎冷冻后均起到了保护作用。
- 周崇侯云鹏周光斌吴通义金方洪琼花朱士恩
- 关键词：小鼠细管法OPS法玻璃化冷冻
- 小鼠和牛卵母细胞OPS法冷冻保存技术的研究
- 该实验用OPS法对小鼠成熟卵母细胞和牛未成熟卵母细胞进行玻璃化冷冻保存进行研究.并对解冻后小鼠卵母细胞孤雌激活和体外受精效果以及牛卵母细胞成熟情况进行观察.小鼠卵母细胞在EFS30、EFS40、EDFS30和EDFS40...
- 吴通义
- 关键词：冷冻保存OPS小鼠卵母细胞牛卵母细胞
- 文献传递
- 放牧条件下安格斯、海福特肉牛重复超排的研究被引量：22
- 2002年
- 对放牧条件下饲养的安格斯牛和海福特牛进行时间间隔仅为 2 8天的重复超排处理。结果两个品种牛的两次处理效果之间差异不显著 (P >0 .0 5 )但第二次超排获得的头均可用胚数均略高于第一次 (安格斯牛 :7.71Vs6 .5 7,海福特牛 :11.14Vs7.86 )。A1、A2、H1和H2四个小组结果表明 :海福特牛对该重复超排方案反应较稳定 ,效果明显好于安格斯牛。说明缩短重复超排时间间隔是可行的。
- 付静涛吴通义余文莉李树静
- 关键词：放牧安格斯海福特肉牛重复超排
- 小鼠原核胚OPS法冷冻保存技术被引量：20
- 2002年
- 在 2 0、2 5℃室温条件下 ,采用 OPS(open pulled straw)法对小鼠原核胚进行玻璃化冷冻保存。结果表明 ,EFS和EDFS各冷冻组的原核形态正常率 (95 %～ 10 0 % )、体外发育率 (76 %～ 82 % )和对照组 (10 0 %、88% )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。采用 EPFS4 0冷冻后的原核胚形态正常率 (70 %～ 76 % )与对照组相比差异极显著 (P<0 .0 1)。而 EPFS30和EPFS4 0冷冻后的胚胎发育率 (34%～ 5 7% )均极显著低于对照组 (P<0 .0 1)。另外 ,在 2 5℃室温条件下冷冻保存的原核胚 ,解冻后其囊胚发育率 (76 %～ 80 % )与对照组 (86 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。冷冻保存的原核胚移植后的妊娠率和产仔率达 4 5 %和 4 4 % ,与新鲜原核胚移植的对照组 (5 6 %和 4 6 % )相比均无显著性差异 (P>0 .0 5 )
- 朱士恩权国波吴通义曾申明张忠诚
- 关键词：OPS法冷冻保存技术原核胚玻璃化小鼠
- 小鼠卵母细胞的OPS法玻璃化冷冻保存技术被引量：7
- 2006年
- 目的以小鼠卵母细胞为模型,利用开放式拉长细管(open pulled straw,OPS)法研究在不同条件下冷冻、解冻对其发育能力的影响,为家畜、濒危动物乃至人类探索一种简易、高效的卵母细胞冷冻保存提供理论与技术参考。方法在室温(25℃±0.5℃)条件下,以乙二醇(EG)、DMSO为主体抗冻保护剂配制成的玻璃化溶液(EFS、EDFS),采用OPS法对卵母细胞进行玻璃化冷冻保存。实验一:操作台温度分别为25℃±0.5℃和37℃±0.5℃时,卵母细胞在10%EG+10%DMSO或10%EG溶液中预处理30 s,移入EDFS或EFS中平衡15 s^45 s进行冷冻保存;实验二:操作台为37℃±0.5℃条件下,采用三种方法(卵母细胞在A:0.5 mol/L和0.3 mol/L的蔗糖中分别处理2 min和5 min;B:0.3 mol/L和0.15 mol/L的蔗糖中分别处理5 min和2 min;C:0.5 mol/L的蔗糖处理5 min)对EDFS30和EDFS40冷冻保存的卵母细胞进行解冻;实验三:解冻后的卵母细胞在SrCl2溶液中进行孤雌激活。结果与结论实验一中卵母细胞解冻后的形态正常率分别高达92.1%(25℃±0.5℃)和92.5%(37℃±0.5℃),均与对照组(98.9%)无显著性差异(P>0.05);实验二中卵母细胞解冻以C法效果最佳(形态正常率分别为92.5%和67.5%);实验三中解冻后在mCZB中培养0.5 h的卵母细胞激活效果优于未培养组(卵裂率和囊胚发育率分别为80.0%vs.57.7%;18.2%vs.0),均有显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01);而培养组与新鲜对照组卵母细胞激活后卵裂率和桑椹胚发育率与对照组(80.0%vs.77.8%;52.8%vs.61.9%)均无显著性差异(P>0.05)。
- 李秀伟吴通义侯云鹏周光斌朱士恩
- 关键词：卵母细胞冷冻玻璃化
- OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞的研究被引量：50
- 2002年
- 用自己现用现配的玻璃化溶液 (EFS4 0、EFS5 0和EDFS30、EDFS4 0 )对二步平衡后的牛体外培养的卵母细胞进行OPS(openpulledstraw)法冷冻保存研究。体外分别培养 6h或 2 2h的牛卵母细胞冷冻解冻后再经 18h或2h培养后 ,经体外受精 ,最高囊胚发育率分别达到 12 %和 17% ;经化学孤雌激活后 ,最高囊胚发育率分别达到2 2 %和 2 4 % ,与对照组 (33% )差异不显著 (P >0 .0 5 )。
- 朱士恩曾申明吴通义孟庆刚张忠诚陈永福
- 关键词：OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞
- 小鼠原核胚玻璃化冷冻保存技术的研究被引量：5
- 2003年
- 目的 原核胚是转基因等生物技术所必需的主要材料 ,其冷冻保存使操作不受时间和空间的限制。另外 ,冷冻保存还可以避免体外培养过程中的细胞发育阻断期。方法 在室温 (2 0℃或 2 5℃ )条件下 ,以乙二醇、DMSO为主体抗冻保护剂配制成的玻璃化溶液 (EFS、EDT、EDFS) ,不借助冷冻仪 ,对小鼠原核胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存。结果 2 0℃室温条件下 ,用EDFS4 0平衡 1min一步法冷冻解冻后的原核胚 ,经培养后囊胚发育率最高仅为 4 7% ,与新鲜原核体外培养的对照组 (75 % )的差异极显著 (P <0 0 1) ;当原核在 10 %E +10 %D溶液中预处理 5min ,移入EDFS30中平衡 30s二步法冷冻保存 ,解冻后的囊胚发育率达 6 8%。而室温升至 2 5℃ ,二步法冷冻保存后原核胚的囊胚发育率高达 77% ,与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 )。用最佳冷冻组的原核胚或解冻后培养到囊胚移植给受体母鼠均获得产仔。结论 本研究对小鼠原核胚实施玻璃化冷冻保存 ,经体外培养和移植结果与对照组无显著性差异 。
- 朱士恩权国波吴通义周崇曾申明张忠诚
- 关键词：小鼠原核胚玻璃化冷冻保存体外培养
