周万军
- 作品数：45 被引量：151H指数：7
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 反相高效液相色谱快速分离珠蛋白肽链及其应用研究
- 目的 建立一种简便快速高分辨率的珠蛋白肽链反相液相色谱分离技术并探讨其临床应用价值,为同类工作提供一种有参考价值的经验.方法 采用梯度洗脱,菲罗门Jupiter C 18(250×4.6mm,5μm,300A)...
- 万均辉田佩玲熊符周万军韦相才徐湘民
- 关键词：反相液相色谱珠蛋白肽链地中海贫血异常血红蛋白
- 目的基因拷贝数定量方法快速筛查缺失型α-地中海贫血
- 2014年
- a-地中海贫血（a-地贫）是全球最常见、对人类健康影响最大的单基因遗传病之一[1]，我国南方广西、广东、江西、四川等省份和地区的人群携带率分别高达17．55％、8．53％、2．60％、1．92％[2-3]。此病目前缺乏有效治疗手段，通过人群筛查与遗传咨询，对高风险胎儿实施产前诊断而阻止重症患儿出生，是国内外公认的首选预防措施。随着以降低地贫患儿出生率为目标的预防计划与措施的相继实施，
- 赵学峰王格袁晓文周万军
- 关键词：快速筛查缺失型单基因遗传病人群筛查重症患儿
- 切胶回收及树脂纯化酶切片段在连接实验中的比较被引量：1
- 2005年
- 目的 比较切胶回收及树脂纯化酶切片段在连接实验中的应用效果。 方法 将目的片段及载体酶切后分别用切胶回收及树脂纯化 ,再进行连接 ,转化受体菌DH 5α后挑取菌落筛选阳性克隆 ,比较其阳性克隆比。 结果 切胶回收阳性克隆比为 10 0 % ,树脂纯化阳性克隆比为 67%。 结论 切胶回收纯化阳性克隆比明显高于树脂纯化 ,但树脂纯化操作相对简单、快速 ,67%的阳性克隆比也已符合一般连接实验的要求。
- 周万军柳永和唐孟萱
- 关键词：纯化
- 一例罕见的Chinese Gγ（Aγδβ）°-thal纯合子的基因检测及临床表型分析被引量：2
- 2018年
- 目的对1例可疑的地中海贫血患者进行鉴定，明确其基因型。方法应用检测已知地中海贫血突变的常规方法[反向点杂交与跨越断裂点PCR（Gap-PCR）]结合多重连接探针扩增检测患者的基因型，设计相应的引物，建立检测该突变的Gap-PCR方法。结果 患者的基因型被确定为-Chinese Gγ（Aγδβ）°/-Chinese Gγ（Aγδβ）°，其血液学特征和临床症状偏向于中重度贫血。所建立的Gap-PCR体系能够对Chinese Gγ（Aγδβ）°-thai进行准确的检测。结论Chinese Gγ（Aγδβ）°-thal在中国南方地区具有一定的发生率，应引起重视。应用Gap-PCR体系能够对该突变进行简单快捷的检测，适于推广。
- 张强张艺佳徐惠玲许明丽温晓君徐湘民周万军
- 关键词：CHINESE地中海贫血
- 一种快速检测α-珠蛋白基因簇拷贝数变异的方法
- 本发明公开了一种快速检测α-珠蛋白基因簇拷贝数变异的方法，包括以下步骤：设计一对通用引物，三种TaqMan探针，三对加尾引物，样本检测：分别以待检基因和标准基因为模板，加入三对加尾引物，进行首轮巢式荧光定量PCR，得到首...
- 周万军徐湘民
- 红细胞渗透脆性试验参考区间的建立及在地中海贫血筛查中的初步应用被引量：1
- 2022年
- 目的通过分析健康人群中散射比浊法测得的红细胞渗透脆性(EOF)分布特征,建立南方医科大学珠江医院实验室的EOF的参考区间,并对其在地中海贫血(以下简称“地贫”)筛查的应用进行初步探讨。方法检测2451名健康查体者剩余样本的EOF,并依据其分布特征建立生物参考区间;再选取其中170名应用传统试管法平行进行红细胞渗透脆性的定性检测,比较两种方法的检测结果一致性;最后检测122例地贫筛查者的EOF,以基因检测结果为金标准,初步评价其在地贫筛查中的临床应用价值。结果依据其分布特征,EOF的参考区间为男性?73%、女性?74%。以此为阴阳性界值,其测定结果与传统试管法的检测结果差异无统计学意义(P?0.05)。单独应用到地贫筛查时,EOF敏感性为73%、特异性为95%、阳性预期值为81%、阴性预期值为92%;联合平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCH)检测后,敏感性为93%、特异性为83%、阳性预期值为64%、阴性预期值为97%。结论自动化散射比浊法测红细胞渗透脆性的生物参考区间为男?73%、女?74%。与MCV、MCH联合使用可显著提高地贫筛查的敏感性与阴性预期值。
- 何思华方艳平林丽娟李紫岩黄振艺周万军江凌晓
- 关键词：散射比浊法地中海贫血
- 三重实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常
- 2010年
- 目的建立三重TaqMan实时荧光定量PCR体系,快速诊断21、X染色体数目异常。方法选取21号染色体唐氏综合征特异区域(DSCR3)和X染色体1113KDNA序列范围分别作为21号和X染色体目的基因,同时选择12号染色体上磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)为参比基因,分别设计引物和TaqMan探针,经PCR反应体系优化,采用单管三重及2-ΔΔCt相对定量数据分析,根据基因拷贝数变化诊断21号和X染色体数目异常,并进行方法学应用评价。结果通过优化,模板量在5～30ng/μl时3个基因都可以得到有效扩增,目的基因和参照基因扩增效率基本一致,均接近100%。采用上述体系检测24例正常标本和20例异常标本(包括血液和羊水标本),正常标本的21号2-ΔΔCt值均为2,而唐氏综合征患者均为3;正常男性的X染色体2-ΔΔCt值均为1,而正常女性均为2。其临床标本检测结果的敏感性、特异性均达100%。结论建立的三重TaqMan实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常方法 ,稳定性、可靠性和实用性均较好。
- 刘彦慧吴亚敏黎丽芬李超强周万军
- 关键词：荧光定量PCR拷贝数染色体数目异常
- 临床遗传学教学方法的探索被引量：3
- 2008年
- 如何教好临床遗传学，充分培养学生的临床技能，是众多教学工作者所面临的实际问题。将基础理论充分结合临床实践，以突出临床、解决临床问题、学以致用、学有所用为原则进行教学，化抽象为具体，以激发学生的学习兴趣与求知欲，提高教学质量，取得好的教学效果。
- 周万军杨海英
- 关键词：临床遗传学教学方法病例
- 加尾引物多重PCR技术检测Y染色体微缺失
- 2015年
- 目的设计加尾引物多重PCR策略,并采用此技术建立一种快速检测Y染色体15个STS位点微缺失的多重PCR方法。方法以Y染色体无精子因子(azoospermia factor,AZF)区域15个特异性序列标签位点(sequence-tagged site,STS)为扩增子,根据加尾引物多重PCR策略设计5'端加尾引物,建立一种Y染色体微缺失多重PCR体系;并检测18例已知样本和112例临床样本观察其灵敏度与准确性。结果基于此策略的多重PCR体系优化过程简单快速,建立的多重PCR检测体系稳定可靠,各目的条带的电泳分析亮度基本一致;18例已知样本的检测结果与靶值相符;112例临床样本的检测结果也与对照方法一致。结论本研究设计的加尾引物策略可提高多重PCR扩增效率,简化优化过程,为其他多重PCR检测体系的设计与建立提供参考和借鉴;建立的Y染色体AZF15个STS位点微缺失多重PCR检测方法结果稳定,可供临床样本的快速检测。
- 邹德亮温晓君张雪莲吴晓伟周万军吴英松
- 关键词：多重PCRY染色体微缺失
- HepG2细胞培养方法与条件的探讨被引量：26
- 2005年
- 目的 探讨HepG2细胞最优培养方法与培养条件。 方法 对比 40℃先溶解后 3 7℃水浴恒温与传统 3 7℃复苏方法效果以选择最佳的复苏方法 ;观察不同比例胎牛血清培养基下细胞生长情况以确定最佳的血清含量 ;观察不同汇合度下细胞生长趋势及死活细胞比例以选择恰当的传代时机 ;观察不同消化方法的消化效果以选择合适的消化方法。 结果 40℃先溶解后 3 7℃水浴恒温的复苏存活率 (85 .7% )明显高于传统 3 7℃复苏方法 (68.4% ) ;在含 12 %以上胎牛血清的DMEM中细胞生长良好 ;汇合度达 95 %～ 10 0 %时细胞生长趋势达到平台期 ,10 0 %以后活细胞逐渐减少而死细胞逐渐增加 ;应用先PBS洗涤后 0 .2 5 %胰酶消化的传代方法易于控制 ,消化效果好。 结论 HepG2细胞采取 40℃先溶解后 3 7℃水浴恒温的复苏方法 ,含 12 %胎牛血清DMEM培养基培养 ,采用先PBS洗涤后胰酶消化的方法于汇合度 95 %～ 10 0 %时传代的方法进行培养 ,能获得最佳培养效果。
- 唐孟萱周万军胡元佳陈卫群王晓春
- 关键词：HEPG2细胞培养
