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单纯空腹血糖受损和单纯餐后高血糖型糖尿病的胰岛素分泌及胰岛素敏感性的代谢特征: 目的评估单纯空腹血糖受损(iIFG)和单纯餐后高血糖型糖尿病(IFH)的胰岛素分泌及胰岛素敏感性的代谢特征,探讨进展为IFH的决定因素。方法 859例病人均为2004年至2005年瑞金医院内分泌门诊初诊病人,隔夜空腹10...; 田景琰顾燕云张贤玲李鸿周伟斌张宏利王晓骆天红李杲罗敏; 文献传递

长期体外培养大鼠胰岛的动态研究: 2006年; 目的观察长期体外培养大鼠胰岛在分泌功能、基因表达及免疫荧光组织化学染色法的动态变化。方法采用胶原酶灌注消化和nextran密度梯度离心分离、纯化获得大鼠胰岛,连续培养20 d,定期检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);实时聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光组织化学染色法检测胰高糖素(Glu)、胰岛素、胰腺十二指肠同源盒基因(PDX)-1、葡萄糖转运蛋白(Glut)-2基因mRNA及蛋白水平的表达。结果连续培养胰岛的GSIS水平持续下降;但RT-PCR及免疫荧光显示随培养时间延长,胰岛内关键基因表达并未见明显减弱。结论长期体外培养大鼠胰岛的胰岛素分泌功能持续下降,并非由胰岛素含量减少所致,可能存在更深层次的原因。; 李凤英李鸿周伟斌顾燕云张迪周文中骆天红李果陈名道罗敏; 关键词：原代培养胰岛

单纯餐后高血糖型糖尿病的胰岛素分泌与敏感性被引量：1: 2006年; 目的评估单纯餐后高血糖型糖尿病(IPH)的胰岛素分泌与敏感性的特征,并进一步探讨进展为IPH的相关因素。方法850例受试者按75 g葡萄糖耐量试验分为:糖耐量正常(NGT)557例;单纯糖耐量异常(iIGT)146例;IPH 147例。比较各组的代谢指标及胰岛素分泌和胰岛素敏感性指数。结果早期相胰岛素分泌和胰岛素敏感性指数从NGT→iIGT→IPH逐渐降低,校正年龄和BM I后差异有统计学意义(P<0.05)。对iIGT和IPH患者作线性回归分析显示早期相胰岛素分泌和胰岛素敏感性指数与2hBG密切相关。结论初发的IPH有显著的早期相胰岛素分泌缺陷和胰岛素敏感性降低。β细胞胰岛素分泌缺陷和胰岛素抵抗均是从NGT→iIGT→IPH的进展过程中的决定因素。; 田景琰顾燕云张贤玲李鸿周伟斌张宏利王晓骆天红李果罗敏; 关键词：2型糖尿病胰岛素敏感性指数

大鼠BTCe蛋白原核表达及功能鉴定: 2006年; 目的原核表达获得大量具有生物活性的大鼠BTCe蛋白。方法RT-PCR法从大鼠肾脏中扩增出150bp BTCe片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-BTCe。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法纯化获得融合蛋白,凝血酶酶切后获得目的蛋白,经SDS-PAGE、Western blot及质谱鉴定。以0.5nmol/L BTCe作用于3T3-L1细胞连续培养4d,MTT法检测其促增殖能力。结果融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中。酶切后的目的蛋白经质谱证实其与BTCe蛋白氨基酸序列相符;作用于3T3-L1细胞可明显促进其增殖。结论大鼠BTCe蛋白在pGEX-4T-2原核表达载体可获得高效表达,所纯化蛋白具有促进3T3-L1细胞体外增殖的作用。; 李鸿周伟斌顾燕云周文中张迪骆天红李果罗敏; 关键词：克隆融合蛋白

大鼠BTCe对体外培养胰岛保护作用及对糖尿病大鼠降糖作用的研究被引量：1: 2006年; β细胞素(betacellulin,BTC)是目前较受关注的胰岛再生因子,但其促胰腺、胰岛再生的机制不清.BTCe是betacellulin的功能片段,促细胞增殖能力与BTC相同.实验通过原核表达方法获得BTCe蛋白,MTT法证实其促3T3-L1细胞增殖能力.将BTC或BTCe作用于原代培养的大鼠胰岛,观察其对胰岛分泌的急性及长期影响作用,实时定量PCR及免疫荧光检测胰岛内关键基因的表达.将质粒pcDNA3.1-BTCe注射入链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肌肉中,观察对大鼠血糖的影响作用.加入BTC或BTCe可明显提高体外培养大鼠胰岛的GSIS水平,但实时定量PCR及免疫荧光显示胰岛内4种关键基因的表达并无明显变化;pcDNA3.1-BTCe转染糖尿病大鼠15～20天后血糖出现下降,糖耐量明显改善;免疫荧光显示:胰腺内有大量PDX-1+的导管细胞及胰岛素阳性细胞出现.推测BTC及BTCe对体外长期培养的大鼠胰岛具有一定的保护作用,可能通过促进胰腺内PDX-1+的导管细胞及胰岛素阳性细胞的增殖、诱导对STZ诱导的糖尿病大鼠的高血糖具有一定缓解作用.; 李鸿周伟斌李凤英顾燕云田璟琰钱镭张迪周文中吴国亭骆天红李果罗敏; 关键词：BETACELLULIN 胰岛转染糖尿病

β细胞素对体外培养大鼠胰岛的影响被引量：1: 2007年; 研究β细胞素（BTC）对体外培养大鼠胰岛的作用。BTC无促胰岛急性分泌作用，但对长期培养大鼠胰岛的葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）具有一定保护效力；实时PCR及免疫荧光检测胰高血糖素、胰岛素、PDX-1、葡萄糖转运子2的表达未随培养时间延长而丰度下降，BTC可能不是通过调节上述基因的表达来维护胰岛GSIS功能的。; 李鸿周伟斌李凤英顾燕云田璟琰吴国亭张迪周文中骆天红李果罗敏; 关键词：Β细胞素胰岛

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周伟斌