周志明
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自制HBV DNA质控血清的临床应用与评估
- 目的探讨自制质控血清用于HBV DNA定量检测室内质量控制的可行性方法收集正常血清和HBV DNA高水平的异常血清,充分混匀配成HBV DNA质控血清,该血清灭活后分装并置于-20℃保存,每支质控血清室温融化半小时后与患...
- 李一荣鲁永久周志明陈凤花胡丽华
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测人类EZH2基因方法的建立被引量：1
- 2007年
- 目的:建立SYBR GreenI实时荧光PCR定量检测人类EZH2基因的方法。方法:将EZH2 RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM-T后,经测序鉴定正确后,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR GreenI实时荧光定量PCR检测EZH2,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性。结果:该法检测的最低拷贝数为10,线性范围为101~108拷贝,相关系数r为-1.00,104copies/μl标本的批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.0%和2.7%。熔解曲线分析显示单一的峰,熔解温度(Tm)为(83.42±0.13)℃。结论:实时荧光定量PCR方法检测EZH2基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究EZH2的方法。
- 陈凤花胡丽华王琳李一荣周志明
- 关键词：EZH2基因SYBR实时荧光定量PCR
- 两款荧光定量PCR仪检测HLA-B27基因结果比对分析被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨试剂与仪器匹配因素对PCR荧光法检测HLA-B27等位基因的影响。方法:首先采用自建荧光定量PCR法对85例样本中HLA-B27等位基因进行检测,随后采用商品化试剂盒PCR荧光法同时在两款荧光定量PCR仪Stratagene Mx3000P~?和Roche cobas~? Z480上对HLA-B27进行再次检测。结果:商品化试剂盒方法在cobas~? Z480上检出HLA-B27等位基因的结果为65例阳性、20例阴性,与自建方法所检出的结果完全一致;而其在Mx3000P~?上检出的结果为30例阳性、55例阴性,与自建方法的检测结果之间存在显著性差异(χ~2=33.03,P<0.005)。该商品化试剂盒方法在Mx3000P~?上的漏检率为53.85%。结论:该商品化试剂与Mx3000P~?荧光PCR仪的匹配性不佳,严重影响了检测结果的准确性。在临床实际工作中,评价PCR试剂的检测性能需要结合仪器,综合考虑以保证检测结果的准确性。
- 耿帜周志明肖圣达徐远东陈凤花
- 关键词：HLA-B27
- 应用Taqman技术对中国汉族人群HLA-B27进行快速基因分型
- 目的建立一种快速、灵敏的实时荧光聚合酶链反应(PCR)对中国汉族人群的人白细胞抗原B27(HLA-B27)进行基因分型。方法采用Taqman技术对123例已定型的标本(31例阳性,92例阴性)的HLA-B27 DNA进行...
- 李一荣胡丽华温晓波曾小倩李归宁周志明
- 关键词：基因分型TAQMAN聚合酶链反应
- 文献传递
- 自制HBV DNA质控血清的临床应用与评估
- 李一荣鲁永久周志明陈凤花胡丽华
- 不同实时荧光定量PCR仪对外周血中EB病毒DNA检测结果的影响被引量：1
- 2022年
- 目的:应用同一种商品化EB病毒核酸定量检测试剂盒在2款实时荧光定量PCR仪同时检测外周血标本中EB病毒载量,探讨不同类型的实时荧光PCR仪对EBV DNA定性和定量检测结果的影响。方法:提取179例外周血标本(包括102例全血和77例血浆)的DNA后,应用EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)分别在2款实时荧光PCR仪Cobas z480和LightCycler 480Ⅱ上同时检测EBV DNA,定性结果采用配对χ^(2)检验和Kappa一致性检验,定量结果采用配对t检验、Spearman相关分析和线性回归分析以及Bland-Altman图分析。结果:(1)应用Cobas z480和LightCycler 480Ⅱ检测179例血标本中EBV DNA的阳性检出率分别为49.72%(89/179)、48.60%(87/179),Kappa值为0.955 3,一致性较好;两者的阳性符合率为98.85%、阴性符合率为96.74%,总符合率为97.77%。(2)在定量范围内的56例EBV阳性血样本,Cobas z480和LightCycler 480Ⅱ的检测值分别为3.943±0.913、3.726±0.980 log_(10)copies/mL,差异有统计学意义(P<0.05);进一步进行Spearman相关性以及线性回归分析,相关系数r=0.962 6,回归方程为Y=1.065 6X-0.475 4(r^(2)=0.985 3);2款实时荧光PCR仪检测的差值平均值为0.216 log_(10)copies/mL,差值标准差为0.133 log_(10)copies/mL,95%一致性界限为(-0.045,0.478) log_(10)copies/mL,96.43%(54/56)的点在95%一致性界限以内,界外点数为2(3.57%)。结论:2款实时荧光定量PCR仪Cobas z480和LightCycler 480Ⅱ检测外周血样本中EBV DNA,结果具有可比性,但Cobas z480上的检测结果平均比LightCycler 480Ⅱ上的高,可能是由于2款PCR仪所使用的光源和滤光片组合不同所致。
- 徐远东耿帜周志明包一熙陈凤花
- 关键词：EB病毒
