孙紫阳
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：天津医科大学医学检验学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 泰山四叶参多糖的提取及含量测定被引量：13
- 2007年
- 目的:从泰山四叶参中提取多糖并测定多糖含量。方法:经脱脂、醇提后,用水提醇沉法提取多糖,用苯酚-硫酸法测定其含量。结果:泰山四叶参中多糖含量为12.45%,平均回收率为99.12%,RSD=1.49%(n=4)。结论:泰山四叶参多糖含量较高,具有开发利用价值。
- 孙紫阳
- 关键词：多糖
- 适用于shRNA表达研究的克隆载体构建
- 2008年
- 目的:建立一种适用于shRNA表达研究的克隆载体。方法:通过PCR扩增一段含有自杀基因ccdB和卡那霉素抗性基因的DNA序列,将其双酶切后克隆至shRNA表达载体pSilencer3.1-H1neo中,得到重组体pSilencer3.1-ccdB。运用此重组体构建荧光素酶的shRNA表达载体并设立对照进行非重组背景的结果比较。结果:成功建立了pSilencer3.1-ccdB克隆载体。应用此载体构建荧光素酶的shRNA的表达载体,结果显示完全消除了非重组背景。结论:建立了适用于shRNA表达研究的克隆载体,为进一步研究siRNA的基因功能奠定了基础。
- 焦艳丽李晓霞孙紫阳王宝利郭善一
- 关键词：SHRNA
- 大肠杆菌偏嗜性Osteostat胞外段编码基因的克隆
- 2007年
- 目的采用基因工程的手段研制人Osteostat胞外蛋白,通过大肠杆菌偏嗜性人Osteostat胞外段编码基因的克隆,为重组蛋白的研发作初步准备。方法按照氨基酸密码子的简并性原则将人Osteostat胞外段编码系列全部替换成大肠杆菌偏嗜性密码子,并将其分成三段扩增,再通过重叠延伸PCR将三个片段连接起来。然后,将回收的人Osteostat基因片段和pQE-30Xa表达载体相连,转化大肠杆菌感受态细胞,进行初步的诱导表达,表达产物行SDS-PAGE分析。结果通过重叠延伸PCR获得了大肠杆菌偏嗜性的编码序列,通过测序验证了其序列的正确性。对重组表达载体转化菌进行诱导表达,SDS-PAGE分析证实获得预期分子量的目标蛋白。结论大肠杆菌偏嗜性的人Osteostat胞外段编码基因表达载体的构建为重组蛋白的研发打下基础。
- 孙紫阳
- 关键词：肿瘤坏死因子超家族重叠延伸PCR克隆
- 发生点突变的pCDNA3.1(+)质粒的构建被引量：1
- 2008年
- 体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间复杂关系的有力工具，也是我们在实验室中改造／优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能，二者之间的关系是蛋白质组研究的重点之一。对某个已知基因的特定碱基进行定点改变、缺失或者插入．可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构，对突变基因的表达产物进行研究有助于了解蛋白质结构和功能的关系，探讨蛋白质的结构／结构域。常见体外定点突变的方法有化学诱变、寡核苷酸介导的诱变、盒式诱变和基于PCR的诱变．以PCR为基础的定点诱变（site directed mutagenesis．SDM）技术是近年来得到极大发展的分子生物学方法，广泛用于基因和蛋白质的结构与功能的基础研究。基于PCR的诱变方法有：重叠延伸PCR法、大引物PCR法等。
- 梁晖李雪孙紫阳
- 关键词：PCR定点诱变
- 葛根素对鼠肝微粒体细胞色素P450的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察葛根素对鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP)的影响。方法:实验动物分别腹腔注射生理盐水、苯巴比妥(40mg/kg.d)、葛根素(100和200 mg/kg.d),给药7d后,用分光光度法测定肝微粒体CYP和细胞色素b5(Cytb5)的含量,以及苯胺羟化酶(ANH)和氨基比林N-脱甲基酶(ADM)的活性。结果:苯巴比妥和葛根素均能显著缩短戊巴比妥钠对小鼠的催眠时间,显著提高小鼠肝脏指数、CYP含量,以及大鼠CYP和Cytb5含量,且以苯巴比妥组更为显著。苯巴比妥能非常显著地提高大鼠ANH和ADM活性,葛根素仅提高ADM活性,对ANH无明显影响。结论:葛根素对小鼠和大鼠肝微粒体CYP有诱导作用,但诱导能力显著弱于苯巴比妥。
- 孙紫阳
- 关键词：葛根素苯巴比妥细胞色素P450
