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庚型肝炎病毒NS3蛋白在昆虫细胞中的表达被引量：3: 2000年; The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein was expressed in Sf9 insect cells and analyzed by SDS-PAGE. A protein band about Mr 43810 was demonstrated on polyacrylamide gel electrophoresis and this protein amounted to more than 30% of the total cell proteins. Recombinant NS3 protein was purified by Ni-NTA column. Western blot showed that this recombinant protein could react with GBV-C/HGV RNA positive mixed sera. The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein could be used to detect GBV-C/HGV infection and will supply material for study of structure and function of this protein.; 朱分禄任浩朱诗应宋燕斌戚中田; 关键词：GBV-C/HGV NS3蛋白庚型肝炎

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达: 2000年; 目的：研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＨＴａ，转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞，３７℃振荡培养４ｈ使发生转座，于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞，将转染上清再次感染ｓｆ９细胞，以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法分析、检测重组蛋白。结果：序列测定证实克隆的基因片段是ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的ＮＳ５基因片段，且阅读框架正确。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示在相对分子质量４．１５×１０４处有重组蛋白的表达条带，薄层扫描占总蛋白量的１１．７％。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ发现重组蛋白可与ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性患者混合血清发生较强的免疫反应。结论：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５重组蛋白可以用于ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染的检测。; 任浩朱分禄朱诗应宋燕斌戚中田; 关键词：庚型肝炎 GBV-C/HGV 基因表达

抗-HCV阴性献血员中丙型肝炎病毒RNA检测及序列分析被引量：2: 1997年; 对95份抗—HCVIgG阴性献血员采用逆转录聚合酶链反应法（PCR）检测丙型肝炎病毒RNA，结果8次中有6次其检测出17份阳性标本（17／95，17．9％），复查抗—HCVIgG仍为阴性。对其中8份阳性产物中高变区1的序列分析结果表明均为不同株HCV序列．排除了PCR污染的可能性。对其中2份阳性产物测定了全序列并与HCV各基因型代表株的相应序列比较，与HCVⅡ型相应序列的核苷酸同源性为77％～79％。而与HCVⅠ、Ⅲ、Ⅳ相应序列间的同源性为62％～69％，表明为HCVⅡ型序列。结果提示献血员抗—HCVIgG筛选不能完全排除HCV感染者，漏检不是由于HCV基因序列变异．而是检测方法本身缺陷所致。; 潘卫方芳崔晓红宋燕斌戚中田; 关键词：丙型肝炎病毒 RNA检测

PCR检测丙型肝炎病毒感染各高危人群被引量：3: 1995年; 用ＰＣＲ方法克隆了中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者的５＇端非编码区（５＇－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，５＇－ＮＣＲ）序列，并根据此序列合成引物检测我国ＨＣＶ各高危感染人群的病毒复制情况，结果显示ＨＣＶＲＮＡ在慢性丙型肝炎患者的血清标本中的阳性率为８１．８％（９／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的血液透析患者血清标本中的阳性率为６３．６％（７／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的献血员血清标本中的阳性率为２０％（４／２０），在ＨＣＶ抗体阳性的肝细胞癌标本中的阳性率为１００％（５／５），在ＨＣＶ抗体阴性的肝细胞癌标本中的阳性率为３３．３％（７／２１）。表明ＨＣＶ的体内复制情况在各高危风险人群中的情况有明显差别；提示ＨＣＶ感染也是我国肝细胞癌发生的重要风险因子之一。; 潘卫戚中田崔晓红印慨宋燕斌杜平; 关键词：丙型肝炎病毒多聚酶链反应核苷酸序列

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达: 1999年; 任浩朱分禄朱诗应宋燕斌戚中田; 关键词：庚型肝炎病毒 RT-PCR 昆虫细胞

丙型肝炎病毒感染者中抗病毒IgM检测的意义被引量：6: 1996年; 建立了抗ＨＣＶＩｇＭ间接ＥＬＩＳＡ方法，并用之检测ＨＣＶ不同感染人群。抗ＨＣＶＩｇＭ在不同感染人群中的检出率变化很大。急性输血后丙型肝炎患者检出率可高达９３．８％，而正常献血员中可低至０．６８％。比较抗ＨＣＶＩｇＭ和抗ＬｇＧ阳性中ＨＣＶＲＮＡ的检测结果发现，抗ＩｇＭ阳性者中，不同ＨＣＶ感染人群的ＨＣＶＲＮＡ检出率很高（９３．０％～１００％）；而ＩｇＧ阳性者中ＨＣＶＲＮＡ的检出率变化很大（３７．５％～９３．８％）。在４３例血液透析者中抗ＩｇＭ与ＨＣＶＲＮＡ检测的一致性为８３．７％；抗ＩｇＭ与抗ＩｇＧ检测的一致性为８８．４％，结果提示：（１）抗ＨＣＶＩｇＭ与ＨＣＶ活跃复制有关，（２）抗ＨＣＶＩｇＭ与抗ＨＣＶＩｇＧ检出不完全一致。因此，临床检测抗ＨＣＶＩｇＭ有其特殊意义。; 潘卫崔晓红宋燕斌范中善杜平戚中田; 关键词：丙型肝炎病毒 IGM ELISA

庚型肝炎病毒基因组全长cDNA克隆及其构建方法: 本发明涉及生物技术领域，是庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的克隆及其构建方法。以覆盖GBV-C/HGV基因组全长cDNA的5个较小的基因片段为起始材料，经过重叠延伸PCR、酶切、连接和转化等，完成GBV-C/HGV基因组全...; 戚中田朱分禄邵力何建文潘卫崔晓红朱诗应宋燕斌; 文献传递

慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测被引量：14: 1997年; 为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。; 宋燕斌潘卫范中善杜平戚中田; 关键词：肝炎病毒学斑点杂交

戊型肝炎病毒合成肽决定簇检测抗HEV的研究被引量：1: 1995年; 利用３段分别代表ＨＥＶ３个基因区的合成多肽，研制成ＥＬＩＳＡ抗ＨＥＶ检测试剂。此试剂对ＩｇＧ及ＩｇＭ检出阳性率在急性ＮＡＮＢＮＣ肝炎患者中分别为５４．１％（５３／９８）和３３．７％（３３／９８），在其他疾病患者及正常献血员中则分别为２．７％～６．３％和０％～２．６％。与Ｇｅｎｅｌａｂｓ重组抗原生产的检测试剂比较，两者有很好的一致性，其阳性符合率为９０．０％，阴性符合率为９８．５％，总符合率为９７．４％。对于急性戊型肝炎患者动态监测，７～２０ｄ内大部分患者能检出抗ＨＥＶＩｇＧ或ＩｇＭ。这些结果表明，利用ＨＥＶ合成肽能特异地检测戊肝病毒感染者的抗ＨＥＶＩｇＧ及ＩｇＭ，有助于临床诊断及流行病学调查。; 潘卫俞超戚中田崔大敷宋燕斌崔恒苒周国明王锦红黄维德; 关键词：戊型肝炎病毒合成多肽 ELISA

庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的拼接及克隆被引量：16: 1998年; 目的：构建ＧＢ病毒Ｃ／庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）基因组全长ｃＤＮＡ克隆。方法：以覆盖ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ分离株ＨＧＶ－Ｉｗ全长基因组且互相重叠的５个基因片段Ｉｗ５，Ｉｗｑ２，Ｉｗｈ６，Ｉｗ３和Ｉｗ３为起始材料，采用重叠延伸ＰＣＲ拼接和连接酶连接的方法，构建ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ克隆。结果：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ克隆的酶切图谱与预期一致；核苷酸序列分析显示，克隆的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ的核苷酸及推测的氨基酸序列与原ＨＧＶ－Ｉｗ序列一致。结论：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ的克隆已经构建成功。该克隆的构建，为深入研究ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的致病性及致病机制、复制及转录和翻译机制。; 朱分禄戚中田任浩宋燕斌邵力; 关键词：全长CDNA 克隆庚型肝炎病毒基因组

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宋燕斌

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