廖昆
- 作品数：11 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中山大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- 孕烷X受体参与外源化学物诱导人肝L02细胞坏死性凋亡
- 目的 筛查诱导坏死性凋亡的外源化学物,并探讨孕烷X受体(PXR)在外源化学物诱导人肝细胞坏死性凋亡中的作用.方法 采用永生化人正常肝L02细胞,利用Nec-1(30 mol· L-1)作为坏死性凋亡抑制剂建立细...
- 廖昆高艳芳夏斌张玉静殷花何承勇林育纯林忠宁
- 关键词：孕烷X受体
- DEHP对人肝L02细胞毒性作用及其核因子-κB机制研究
- 1.引言邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物是一类包含有多种成分的持久性环境污染物;其中邻苯二甲酸二-(2-乙基)乙酯(DEHP)是使用最广泛的PAEs增塑剂。研究表明DEHP可导致多种有害效应,包括肝、肾毒性,睾丸毒性,但...
- 胡耀明陈宇曦李晓杰陈慧峰麦剑荣夏斌张玉静廖昆林育纯林忠宁
- 小白菊内酯对不同环氧合酶-2表达的鼻咽癌细胞株中干性侧群细胞转归的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨倍半萜烯内酯(sesquiterpene Iactones,SLs)类化合物对不同环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平的人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞中癌干细胞(cancer stem cells,CSCs)转归的影响。方法:分别采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测人鼻咽癌高分化CNE1L和低分化CNE2L细胞株中COX-2 mRNA和蛋白本底表达水平。给予不同剂量SLs活性成分小白菊内酯(parthenolide,PN)处理2种细胞株后,再分别采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性;qRT-PCR检测细胞中干性相关基因COX-2、ABCG2、BMI1、OCT4 mRNA水平;流式细胞术分析干性侧群(side population,SP)细胞的相对含量;平板克隆集落形成实验检测干性细胞的自我更新和分化增殖能力。结果:CNE1L和CNE2L细胞中COX-2 mRNA和蛋白本底水平显著不同,在CNE1L细胞中明显高于CNE2L细胞(P<0.05);与对照组比较,PN处理后,细胞增殖抑制率随PN浓度(10～100μmol/L)增加呈剂量依赖性增高(P<0.05),细胞中COX-2 mRNA在CNE1L中升高、在CNE2L中降低,干性相关基因ABCG2、BMI1 mRNA在CNE1L细胞中升高、而OCT4 mRNA在两株细胞中均降低(P均<0.05);SP细胞抑制率亦随PN浓度(2.5～40μmol/L作用24 h)增加呈剂量依赖性增高(P<0.05);而细胞的集落形成能力随PN浓度(0.25～1.5μmol/L作用72 h)增加显著降低(P<0.05);上述结果在CNE1L和CNE2L细胞株间差异均有统计学意义(P<0.05),在CNE1L细胞中变化作用更强。结论:PN对不同NPC细胞株中的干性细胞功能具有抑制作用且存在明显差别,可能与不同细胞间COX-2表达的差异性有关。
- 李晓杰林丽娜麦剑荣陈慧峰胡耀明廖昆黄奕俊林忠宁林育纯
- 关键词：环氧合酶-2鼻咽肿瘤小白菊内酯
- FB1经由PXR介导肝细胞中PP2A-B56γ抑和诱导细胞毒性
- 夏斌廖昆张玉静庄群瑛邱杨骆冰何承勇林育纯林忠宁
- 关键词：肝细胞毒性
- 核因子I-B高表达对肝L02细胞中蛋白磷酸酶2A-B55δ靶向调控研究
- 2013年
- 目的构建核因子I-B基因(NFIB)真核表达重组质粒,应用于其高表达调控肝细胞中蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B亚基基因转录的功能学验证。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得人NFIB mRNA片段,克隆入真核绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP-N1),构建pEGFP-NFIB重组质粒后,分别给予250、500、1 000 ng转染永生化人正常肝L02细胞建立NFIB高表达细胞模型(相应设为250、500和1 000 ng剂量组),对照组为250 ng pEGFP-N1转染的L02细胞,荧光定量聚合酶链反应检测NFIB mRNA,激光共聚焦和免疫印迹法(WB)检测核因子-1(NF-1)蛋白水平。电泳迁移率实验分析与NF-1相结合的DNA序列的特异性,荧光素酶报告基因检测PP2A-B55δ亚基基因(PPP2R2D)启动子区的转录活力,RT-PCR和WB检测细胞内PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平。结果双向测序证实pEGFP-NFIB重组表达质粒构建成功。与对照组比较,各剂量组L02细胞中NFIB mRNA相对水平增高(P<0.01),增强型绿色荧光蛋白、NFI-B蛋白表达水平均升高(P<0.05)。NF-1可与PPP2R2D基因启动子区(2R2Dp)-462G>A不同多态性序列结合,NFIB高表达使L02细胞中2R2Dp-462G启动子活力下降(P<0.05),PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平均升高(P<0.05)。结论成功构建人NFIB真核表达重组质粒,应用于人肝细胞中证实NF-1靶向PPP2R2D的功能学调控作用。
- 麦剑荣林育纯陈慧峰陈宇曦夏斌廖昆张玉静高艳芳林忠宁
- 关键词：蛋白磷酸酶2A
- 孕烷X受体诱导活化参与PP2A不同亚基基因转录调控
- 目的 探讨孕烷X受体(PXR)作为转录因子对PP2A不同亚基基因的转录调控作用及其对外源化学物诱导肝细胞毒性转归的影响.方法 采用人肝L02细胞转染NR1/2基因构建PXR稳定高表达的L02-PXR细胞,以L02-pB空...
- 高艳芳廖昆张玉静夏斌殷花何承勇林忠宁林育纯
- 关键词：转录调控
- DEHP对人肝L02细胞毒性作用及其核因子-κB机制研究
- ＜正＞1.引言邻苯二甲酸酯类（PAEs）化合物是一类包含有多种成分的持久性环境污染物;其中邻苯二甲酸二-（2-乙基）乙酯（DEHP）是使用最广泛的PAEs增塑剂。研究表明DEHP可导致多种有害效应,包括肝、肾毒性,睾丸毒...
- 胡耀明陈宇曦李晓杰陈慧峰麦剑荣夏斌张玉静廖昆林育纯林忠宁
- 自噬参与促进AFB1致肝细胞DNA损伤的修复进程被引量：2
- 2014年
- 目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)肝毒性修复进程中细胞自噬的作用。方法以经50μmol/L AFB1预处理24 h的永生化人正常肝L02细胞建立模型,检测AFB1处理撤除不同时间点的细胞DNA双链损伤指标γH2AX蛋白和自噬标志物LC3-Ⅱ蛋白的表达水平;采用免疫荧光法检测AFB1撤除后细胞中γH2AX蛋白荧光焦点和自噬体形成情况;在AFB1撤除后联合应用自噬抑制剂3-MA进行干预实验,检测细胞内γH2AX蛋白的表达水平。结果L02细胞中γH2AX蛋白的动态表达在AFB1处理撤除12 h后达到最高,并在24 h后逐渐降低;自噬蛋白LC3-Ⅱ和自噬体的形成在AFB1处理撤除后逐渐增强;3-MA可明显减缓AFB1撤处理后细胞内γH2AX蛋白的降低进程。结论细胞自噬参与了AFB1诱导肝细胞毒性损伤的修复进程,与促进DNA损伤的修复有关。
- 夏斌廖昆张玉静邱杨骆冰庄群瑛殷花何承勇林育纯林忠宁
- 关键词：黄曲霉毒素B1自噬肝细胞DNA损伤修复
- 孕烷X受体参与AFB1诱导的人肝L02细胞坏死性凋亡被引量：1
- 2014年
- 目的初步探讨孕烷X受体（PXR）对黄曲霉毒素B1（AFB1）诱导肝细胞DNA损伤和坏死性凋亡的影响。方法采用已构建的PXR高表达L02-PXR和空白载体对照L02-p B细胞;实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测细胞NR1I2和CYP3A4 m RNA水平改变;蛋白免疫印迹（Western blotting）检测细胞内PXR和坏死性凋亡下游效应自噬分子LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白相对表达含量;双核微核试验（CBMN）检测细胞遗传损伤情况;采用噻唑蓝（MTT）法测定AFB1对细胞活性抑制影响;利用坏死性凋亡抑制剂Nec-1构建坏死性凋亡抑制的细胞模型,验证AFB1诱导的坏死性凋亡的效应。结果与L02-p B细胞相比,L02-PXR细胞NR1I2 m RNA和PXR蛋白显著上调（均P〈0.001）。AFB1显著地诱导L02-p B和L02-PXR细胞中CYP3A4 m RNA上调（均P〈0.05）,在L02-PXR细胞中的效应更为明显。与对照组相比,AFB1在5-30μmol/L呈剂量反应关系诱导L02-p B和L02-PXR细胞的微核率增高（均P〈0.05）,L02-PXR细胞更为明显;同时,AFB1明显地诱导两株细胞的核芽率和核桥率,但随AFB1剂量增高都有下降趋势。细胞活性随AFB1浓度（1.875-120μmol/L）增加呈剂量反应关系抑制（均P〈0.05）;且相对于L02-p B细胞,L02-PXR细胞对AFB1处理48 h诱导的细胞活性抑制作用更为敏感（P〈0.05）。Nec-1可显著性抑制AFB1诱导的L02-PXR细胞活性抑制率（P〈0.05）,然而却不能降低AFB1诱导L02-p B细胞活性抑制率。此外,AFB1显著性诱导L02-p B和L02-PXR坏死性凋亡下游LC3-Ⅱ的上调（均P〈0.05）;且与L02-p B细胞相比,Nec-1对AFB1诱导的L02-PXR细胞活性抑制和LC3-Ⅱ上调的抑制效果更为明显（P〈0.05）。结论 PXR参与AFB1诱导人肝细胞DNA损伤介导的坏死性凋亡,与PXR促进AFB1诱导CYP3A4基因上调有关。
- 廖昆夏斌张玉静殷花何承勇林育纯林忠宁
- 关键词：孕烷X受体黄曲霉毒素B1肝细胞毒性
- 孕烷X受体参与外源化学物诱导人肝LO2细胞坏死性凋亡
- 目的筛查诱导坏死性凋亡的外源化学物,并探讨孕烷X受体(PXR)在外源化学物诱导人肝细胞坏死性凋亡中的作用。方法采用永生化人正常肝L02细胞,利用Nec-1(30 mol·L)作为坏死性凋亡抑制剂建立细胞模型进行体外实验;...
- 廖昆高艳芳夏斌张玉静殷花何承勇林育纯林忠宁
- 关键词：孕烷X受体
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