张卫东 作品数:7 被引量:36 H指数:3 供职机构: 华中科技大学同济医学院基础医学院 更多>> 发文基金: 教育部留学回国人员科研启动基金 武汉市青年科技晨光计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
血清IL-10和IL-12在自身免疫性甲状腺疾病中的表达特征 被引量:7 2003年 目的:研究自身免疫性甲状腺疾病中血清白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-12(IL-12)的表达特征及其在免疫反应发生中的作用和机制。方法:对38例Graves病(GD)患者(18例未治疗的初诊患者,为GDa组;20例抗甲亢药物治疗的患者,为GDb组)、24例慢性淋巴细胞性甲状腺炎(HD)患者及22例正常者(对照组)检测了血清中IL-10,IL-12的表达水平及甲状腺功能的变化。IL-10和IL-12采用酶联免疫法(ELISA)测定。血清游离T3(FT3),游离T 4(FT4)和促甲状腺激素(TSH)测定用化学发光免疫分析法。抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和抗甲状腺微粒体抗体(TmAb)用放射免疫法。结果:GDa组的IL-10、IL-12均高于对照组(P<0.05,P<0.01),但以IL-12的增高占优势,IL-12/IL-10比值增高(P<0.05)。GDb组的IL-12水平和IL-12/IL-10比值较GDa组显著降低(P<0.05,P<0.01),与对照组比较无显著差异。IL-10水平较GDa组有上升趋势但无统计学意义,但高于对照组(P<0。01)。HD患者IL-12水平和IL-12/IL-10比值均较对照组增高(P<0.01,P<0.01),较GDb组也显著增高(P<0.05,P<0.01),IL-10水平与对照组比较无显著差异,但显著低于GDb组(P<0.05)。结论:GD患者,在甲状腺功能亢进状态时,由Th1细胞产生的IL-12水平和代表Th2细胞活力的IL-10水平均明显增高。 袁莉 张卫东 胡佳 黄庆华 曹雪芹关键词:血清 IL-10 IL-12 自身免疫性甲状腺疾病 血管内皮生长因子预防血管成形术后再狭窄的机理 被引量:20 2001年 为探讨血管内皮生长因子预防血管成形术后再狭窄的机理 ,构建含人血管内皮生长因子 165基因的重组腺病毒 ,感染体外培养的血管平滑肌细胞 ,将人脐静脉内皮细胞和血管平滑肌细胞分别分成对照组、H2 O2 处理组和H2 O2 +血管内皮生长因子处理组 ,采用WST 1比色法、原位末端标记法及流式细胞术检测各组细胞光密度值和凋亡发生情况。结果发现 ,人脐静脉内皮细胞中 ,与对照组和H2 O2 +血管内皮生长因子处理组比较 ,H2 O2 处理组光密度值降低 ,凋亡细胞明显增加 ;血管平滑肌细胞中上述改变相反。提示H2 O2 能促进平滑肌细胞增殖 ,诱导内皮细胞凋亡 ,抑制内皮细胞增殖及平滑肌细胞凋亡 ,促进再狭窄的发生 ,而血管内皮生长因子能拮抗H2 O2 的作用 ,有利于再狭窄的防治 。 刘启功 陆再英 周洪莲 张卫东 颜进关键词:内皮生长因子 再狭窄 细胞增殖 重组杆状病毒的构建及其产生HPV4病毒样颗粒 2002年 为得到 HPV4病毒样颗粒 (VL Ps) ,用 Eco R 、Bam H 双酶酶切克隆载体 p UHPV4 - L1 并回收 1.5 kb L1片段 ;将 L1 基因定向插入穿梭质粒 p VL1 392中并与线形 Baculo Gold TMDNA共转染昆虫细胞 Sf- 9,经胞内同源重组获得重组杆状病毒。对该重组病毒在细胞内的基因转录与表达进行检测得知 ,L1 基因可特异性转录并表达一 5 4 .5 7ku特异性蛋白。该蛋白经透射电镜观察 ,呈现众多直径为 5 0 nm的圆形颗粒 ,为重组杆状病毒在胞内产生的 HPV 4 VL 张卫东 杨泓 甄宏韬 王泽华 黄庆华 曹雪芹关键词:重组杆状病毒 病毒样颗粒 基因表达 携hVEGF_(165)基因的重组腺病毒载体的构建及鉴定 2004年 目的 构建携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF165)基因的重组腺病毒载体。方法 将hVEGF165cDNA亚克隆到腺病毒中间载体pACCMV·pLpA ,再与pJM17共转染人胚肾 2 93细胞 ,获得载hVEGF165基因的复制缺陷型重组腺病毒 ,感染体外培养的兔主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC) ,通过RT PCR和Westernblot检测VEGF表达情况 ,并观察表达产物VEGF对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖的影响。结果 重组腺病毒感染VSMC 4 8h后有VEGFmRNA转录及蛋白质的表达 ,并呈剂量依赖性地促进HUVEC增殖。结论 构建的重组腺病毒载体在VSMC中能够有效表达目的基因 ,且能有效促进HUVEC增殖 ,为hVEGF165基因的实际应用奠定了基础。 刘启功 陆再英 张卫东 颜进关键词:VEGF165 重组腺病毒载体 HUVEC VSMC 亚克隆 腺病毒载体介导hVEGF165基因预防血管成形术后再狭窄的研究 刘启功 陆再英 张卫东 颜进 林立 岳远坤 蒋学俊 本研究为自选课题,设计合理,立题新颖,技术路线正确,思路清晰,紧密结合临床实践及学科前沿,采用先进的分子生物学技术,资料完整,结果可靠,达到国内领先水平,其中重组腺病毒作为hVEGF165基因的转移载体用于预防血管再狭窄...关键词:关键词:血管成形术 腺病毒 TNF—α基因转染树突状细胞作为佐剂呈递肿瘤多肽诱导小鼠体内特异性抗肿瘤免疫 被引量:6 2002年 目的:探讨腺病毒介导TNF-α基因转染树突状细胞(DCs)诱导抗肿瘤免疫的可能性。方法:用100MOI的AdV-TNF-αm和AdV-pLpA(无外源基因)分别感染小鼠DCs,采用RNA酶保护实验检测其细胞因子的表达,同时用混合淋巴细胞试验分析其抗原提呈差异,然后将各实验组DCs分别免疫B57BL/6小鼠,10天后以不同剂量瘤细胞攻击小鼠以观察其保护效力。结果:DCTNF-α组TNF-αm、IL-12、IL-18以及GM-CSF表达量较对应组增高;体外混合淋巴细胞试验表明DCTNF-αm组抗原提呈功能增强;体外、体内特异性抗肿瘤实验均显示该型瘤苗具有良好的抗瘤作用。结论:该基因工程DCs可应用于肿瘤的免疫治疗。 张卫东 杨泓 等关键词:树突状细胞 抗肿瘤免疫 TNF-α基因转染增强树突细胞迁移及CCR7受体表达 被引量:3 2002年 为探讨腺病毒介导肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)基因转染诱导树突细胞 (DCs)趋化因子受体差异性表达 ,分别用 10 0 MOI的 Ad V- TNF- α和 Ad V- p L p A (无外源基因插入 )感染小鼠树突细胞 (m DCs) ,经流式细胞仪检测细胞表型变化 ,RNA酶保护实验检测其趋化因子受体表达 ,体内、体外细胞趋化试验分析比较其迁移差异。发现 Ad V- TNF-α感染 m DCs后 CD11b、CD40、CD86 ,ICAM- 1以及 CCR7受体表达较对照组明显增高 ,CCR2受体表达量却下调 ;体外细胞趋化试验表明 DCTNF -α对 MIP- 3β(CCR7配体 )迁移应答增强 ,体内细胞趋化试验显示 DCTNF-α淋巴结趋化迁移效率较空白对照组和 Ad V- p L p A感染组分别增高 7倍和 3倍。提示 :Ad V- TNF- α感染促使 m DCs成熟 。 张卫东 杨泓 王泽华关键词:树突细胞 趋化因子受体 细胞迁移