张婉莹
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 改良MLVF与MLVA及PFGE对医院流行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分型研究被引量：2
- 2019年
- 目的旨在建立一种操作简便、分型分辨率高以及成本低的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子分型方法,对多位点可变数量串联重复序列指纹法(MLVF)进行了方法学改良及分型能力比对评估。方法应用42株MRSA参考菌株对改良MLVF分型能力进行验证;应用116株东北三省六家医院的MRSA临床菌株对改良MLVF、脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点可变数量串联重复序列分析(MLVA)进行了方法学比对。结果改良MLVF对42株参考菌株分型率为100%;改良MLVF、PFGE和MLVA分别将116株临床菌株分成28个型(simpson's多样性系数[SID]=0.855),28个型(SID=0.854)和27个型(SID=0.816)。改良MLVF在区分国内最主要流行克隆CC239和其他克隆方面分辨率优于MLVA。改良MLVF在分群水平上与PFGE分型一致性(adjusted Rand’s,AR系数0.989)优于MLVA(AR指数0.765)。结论改良MLVF具有分辨率高、与金标准PFGE分型一致性好、操作简单、高通量、费用低的优点,适合常规实验室对MRSA进行分子分型,为常规感控工作及分子流行病学研究提供有力工具。
- 张心宇邹桂玲孙哲张婉莹陈国玉孙宇杜雪飞
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳
- 小鼠哮喘发作过程中相关炎症因子的动态变化被引量：4
- 2019年
- 目的:研究实验性哮喘小鼠模型在诱导哮喘发作不同时间点外周血中细胞因子IL-13、Eotaxin、MCP-1和TNF-α以及肺部浸润的炎症细胞数量变化。方法:将25只健康6-8周龄的雌性BALB/c小鼠随机分成模型组和对照组。利用卵清蛋白(OVA)诱导建立小鼠哮喘模型,模型组(Asthma)小鼠于第0、7天经腹腔注射卵清蛋白(OVA)致敏小鼠。第14-20天连续7天用1%OVA雾化激发小鼠哮喘发作,每次20 min,观察临床症状。正常对照组(Control)小鼠以0.9%NaCL代替0VA进行腹腔注射和雾化吸入。比较两组小鼠肺组织病理切片HE染色结果、肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞分类计数及细胞因子IL-13、Eotaxin、MCP-1和TNF-α的浓度变化。结果:模型组小鼠BALF中IL-13的水平在试验早期(致敏2天)即开始上升达68.9±4.34,此时Eotaxin和MCP-1未见明显升高;致敏7天时IL-13、Eotaxin和MCP-1均明显高于对照组,分别为88.3±3.39、67.4±4.24和38.9±3.1;激发1天组小鼠BALF中IL-13、Eotaxin和MCP-1浓度持续增高至最后一次激发后1天;而TNF-α在激发1天时出现明显升高达136.9±11.9,持续到最后一次激发后1天;从激发1天肺泡灌洗液染色显微镜下观察明以淋巴细胞和嗜酸性粒细胞浸润为主。肺组织HE染色显示哮喘组小鼠气道上皮有不同程度脱落,支气管平滑肌显著增厚,血管周围水肿,炎性细胞浸润。结论:在哮喘发生过程中,IL-13水平在致敏初期即开始升高,随着继续给予OVA,Eotaxin和MCP-1水平呈现显著增高;并伴随越来越多炎症细胞在肺部浸润,TNF-α水平出现缓慢增高,进而加重哮喘发作。
- 王硕王真奎张婉莹李艳丽薛丽
- 关键词：支气管哮喘白介素13嗜酸性粒细胞趋化因子单核细胞趋化因子肿瘤坏死因子Α
- pPET-SUMF2各亚型的原核质粒构建及蛋白表达被引量：1
- 2014年
- 构建人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)基因各亚型的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达pPET-SUMF2各亚型的融合蛋白。用EcoRI和XhoI双酶切人SUMF2各种亚型基因及质粒pPET-30a;将2种酶切产物按常规方法连接、转化至大肠杆菌DH5α。挑取菌落培养,提取质粒进行验证。将构建成功的pPET-SUMF2各亚型重组表达质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳分析以及Western blot检测SUMF2各亚型的融合蛋白表达。成功构建了pPET-SUMF2各亚型的重组表达质粒,并成功诱导SUMF2各亚型融合蛋白的表达,Western blot结果显示在预期位置有特异蛋白条带表达,并在BL21(DE3)内表达了SUMF2各亚型的融合蛋白,为进一步研究SUMF2的功能以及SUMF2与哮喘发病的关系奠定了基础。
- 张录梁红艳张婉莹姜晓峰
- 关键词：原核表达载体融合蛋白
- 黑龙江地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌表型检测及同源性分析被引量：4
- 2015年
- 目的对黑龙江地区耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(carbopenems antibiotics resistance acinetobacter baumannii,CRAB)表型检测及同源性分析,了解该地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药机制及耐药菌株的克隆动向。方法采用改良Hodge试验,多底物-多抑制剂协同法分类检测碳青霉烯酶(carbapenem-hydrolyzingβ-lactamases,CHBLs);应用PCR扩增OXA-23、OXA-24、OXA-58、OXA-51等对收集的菌株进行分子分型,分析其耐药菌株之间的亲缘性关系。结果 319株CRAB的临床分离株中,286株改良Hodge试验阳性即产碳青霉烯酶,其中187株CRAB产丝氨酸类碳青霉烯酶(SCHBLs),无金属类碳青霉烯酶(MCHBLs)。187株CRAB碳青霉烯类酶基因扩增显示OXA-51为阳性扩增,OXA-23基因阳性率为98%,OXA-24和OXA-58基因未扩增出特异条带。结论 OXA-23基因是在黑龙江地区流行的CRAB主要基因型。
- 邹桂玲张婉莹杜雪飞孟晓玉陈国玉孙哲
- 关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶改良HODGE试验OXA
- SUMF2及其亚型与IL-13之间的相互作用
- 目的检测并验证人支气管上皮细胞中硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)各种亚型与IL-13变异型之间的相互作用。方法分别以IL-13(包括野生型IL-13、变异型IL-13)为诱饵,用酵母双杂交CytoTrap系统检测SUMF...
- 梁红艳张婉莹姜晓峰
- 关键词：哮喘白细胞介素13气道上皮细胞
- 支气管哮喘的细胞因子治疗进展被引量：17
- 2012年
- 哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，它的发生和发展与多种细胞因子密切相关。目前哮喘还没有有效的预防和治愈方法，细胞因子抑制剂已经作为潜在的治疗手段而被广泛研究。其中IL-4、IL-5、TNF-α抑制剂的临床研究已经取得了突破性的进展。IL-13和IL-9的临床试验正在研究中。对哮喘动物模型的大量研究发现了胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP），IL-17等新的相关细胞因子，这为哮喘细胞因子治疗提供了新的思路。而多种细胞因子抑制剂的联合使用也为治愈哮喘提供了可能。同时，哮喘个体化医疗的研究为逆转哮喘提供了有力保障。
- 张婉莹姜晓峰梁红艳
- 关键词：支气管哮喘细胞因子
- pEGFP-C3/SUMF2重组真核表达载体的构建及在人支气管上皮细胞中的表达被引量：3
- 2012年
- 目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合的人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)真核表达载体。方法用RT-PCR技术从人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)获得SUMF2的cDNA模板,PCR方法扩增人SUMF2基因。用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切扩增人SUMF2基因及质粒pEGFP-C3;将2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10;挑取菌落培养,提取质粒,酶切鉴定,测序;将测序正确的重组载体用脂质体法转染HBEC,荧光倒置显微镜观察。提取转染细胞的总蛋白进行Western blot检测。结果扩增出1条约857bp的片段,与预期的SUMF2大小相符。酶切结果显示重组质粒pEGFP-C3/SUMF2被切成2条片段,其中1条为pEGFP-C3载体,另1条为目的片段。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_015411.2)中的序列高度同源。荧光倒置显微镜观察显示,人SUMF2基因主要在内质网表达。Western blot结果显示在相对分子质量为37×103处有一蛋白条带,与预期大小相符。结论成功构建重组表达载体pEGFP-C3/SUMF2,为进一步研究SUMF2对IL-13的作用奠定了实验基础。
- 杨春张婉莹梁红艳姜晓峰
- 关键词：真核表达载体人支气管上皮细胞
- 硫酸酯酶修饰因子2亚型与白介素13相互作用的研究
- 张婉莹
