张宏权
- 作品数：15 被引量：55H指数：4
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 转化生长因子β_1正反义基因对人肺巨细胞癌细胞体内外增殖的影响被引量：3
- 1997年
- 探讨人转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）正反义基因对人肺巨细胞癌细胞（ＰＬＡ－８０１Ｄ）增殖的影响及调控。方法通过基因转染方法，将ＴＧＦβ１正、反义基因分别导入ＰＬＡ－８０１Ｄ细胞，观察转染和未转染细胞体内外增殖变化、ｎｍ２３基因和ｃ－ｍｙｃ基因表达以及细胞凋亡特征。结果与未转染细胞比较，正义ＴＧＦβ１基因转染细胞培养上清中ＴＧＦβ１活性增加，体外生长速度减慢，软琼脂细胞培养集落形成能力降低，裸鼠体内成瘤率下降约４７％，肿瘤的转移受到抑制。其机制可能与正义ＴＧＦβ１基因转染细胞ｎｍ２３基因表达增加，ｃ－ｍｙｃ基因表达减少以及诱发细胞凋亡有关。而反义ＴＧＦβ１基因转染细胞则出现相反结果。
- 杨和平陆应麟沈寒放毛宝龄张宏权付生法陈坤
- 关键词：转化生长因子癌基因
- 人转化生长因子β_1基因非翻译区的改造及其全长序列测定被引量：3
- 1993年
- 通过PCR和体外重组技术对TGFβ_1基因5′和3′非翻译区进行了改造,在此基础上,通过构建缺失突变体,采用双脱氧终止法,利用pUC/M13系统测定了人TGFβ_1cDNA的全长序列。这为今后研究不同长度非翻译区对TGFβ_1cDNA表达水平的影响并实施其高效表达奠定了基础。
- 龙建银张宏权王会信
- 关键词：转化生长因子修饰
- 通用真核质粒表达载体的构建被引量：1
- 1995年
- 利用真核基因表达调控的原理，以ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ为起始材料，构建了两个通用的真核质粒表达载体ｐＭＡＭＬ１－ｄｈｆｒ和ｐＭＡＭＬ２－ｄｈｆｒ，它们包含人巨细胞病毒立即早期启动子／增强子调控元件，由两个转录方向相同或相反的表达单元组成．以荧火虫荧光素酶基因为报道基因，β－半乳苷酶基因为内对照，借助ＣＯＳ－７短暂表达系统，研究了它们对荧光素酶表达的影响，并比较了它们与出发载体ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ的相对强弱．
- 龙建银张宏权王会信
- 关键词：真核表达载体质粒基因表达
- 大鼠β乳酪蛋白基因调控区的克隆和序列分析及乳腺定位表达载体的构建被引量：3
- 1995年
- 将大鼠β乳酪蛋白的调控序列克隆于ｐＧＥＭ－４Ｚ，用ＳＰ６、Ｔ７正反向引物进行序列分析，证实其正确之后将该调控序列克隆于真核表达载体ｐＳＶＬ中，构建成功了乳腺定位表达载体。同时在其下游插入了荧光素酶报道基因，用于在乳腺细胞表达调控的研究。
- 岳军明张宏权王允玲任宏波周廷冲王会信崔青山殷震
- 关键词：基因表达
- E．coli分泌表达载体的构建和人表皮生长因子在E．coli中的分泌性表达被引量：7
- 1995年
- 采用ＰＣＲ技术从Ｅ．ｃｏｌｉ基因组片段中克隆出碱性磷酸酯酶（ＰｈｏＡ）的启动子和信号肽序列．在ＰｈｏＡ启动予５＇端设计了ＥｃｏＲⅠ酶切位点，在信号肽编码序列３＇端设计了ＨｉｎｄⅢ酶切位点．将ＰＣＲ产物酶切后ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ片段克隆至ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ位点，组构出含有ＰｈｏＡ启动子和信号肽序列的分泌表达载体ｐＢＭ－Ｐｈｏ－１．之后将人表皮生长因子的成熟肽基因克隆至该载体，使之在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得分泌表达，另采用ｐＩＮⅢ载体系统以分泌方式表达了人表皮生长因子。
- 张宏权王允玲周廷冲王会信刘农乐蒋滋慧
- 关键词：表皮生长因子大肠杆菌分泌表达载体
- 脾脏及促吞噬肽对肝硬化过程不同细胞因子基因表达的调控作用被引量：5
- 1996年
- 用8种细胞因子cDNA基因探针,采用分子生物学Slot blot和Dot blot杂交方法,观察SD纯系大鼠肝硬化诱导不同时期各种细胞因子的基因表达状况,并比较切脾组、促吞噬肽(Tuftsin)组和单纯CCl_1组之间差异,旨在从分子水平探讨脾脏促进肝硬化形成的调控机制。结果发现:1.在肝硬化过程脾脏从整体上促进RNA的转录,2.对8种细胞因子的基因表达,脾脏表现促进,抑制和无反应三种状态;3.在肝硬化不同时期脾脏的作用方式不同,早期促进TGF-β,抑制ras,中晚期促进Collagen和ras;4.对各种细胞因子基因表达的相互影响:相关分析证实脾脏对ras和TGF-β的调控具重要意义,二者与多种基因的表达呈显著相关。
- 汪谦夏穗生崔怀波孙珩张宏权王允林
- 关键词：肝硬化脾脏促吞噬肽基因表达细胞因子
- 人转化生长因子β1正反义基因对HL—60细胞周期及细胞增殖的调控研究被引量：5
- 1995年
- 通过构建人转化生长因子β1(hTGF-β1)的正、反义基因表达载体并通过基因转染技术,首次将hTGF-β1的正、反义基因分别导入到HL-60细胞中,经G418选择获得可稳定表达hTGF-β1的HL-60细胞。较为详细地研究了hTGF-β1的正、反义基因对HL-60细胞周期的影响及对细胞增殖的调控作用。结果表明,表达正义hTGF-β1 mRNA的HL-60细胞阻滞于G1期,而表达反义hTGF-β1 mRNA的HL-60细胞可以解除G1期的阻滞,使大部分细胞进入S期。加入正义hTGF-β1基因后,HL-60细胞形成集落的能力下降,细胞生长速度下降,恶变程度降低;加入反义hTGF-β1基因后,其结果正相反。
- 张宏权宋丽华王允玲周廷冲王会信张双喜魏文虞冠华赵南明沈子威
- 关键词：细胞生长HTGF-Β1反义基因细胞周期
- 哺乳动物乳蛋白基因的表达与调控被引量：14
- 1995年
- 本文在介绍了乳蛋白基因组结构及进化关系的基础上，就其乳蛋白基因表达的影响因素：顺式调控成分，反式作用因子及激素对表达的诱导进行了讨论，最后就该系统作为生物反应器的开发前景作了展望。
- 岳军明张宏权周廷冲殷震
- 关键词：哺乳动物纲
- 牛αsl乳酪蛋白基因上游调控序列的克隆及序列分析被引量：1
- 1995年
- 应用ＰＣＲ技术从国内小牛胸腺基因组ＤＮＡ中克隆了１．０ｋｂ牛αｓｌ酪蛋白基因的上游调控序列，并进行了序列分析，发现有少量的缺失或突变，其ＴＡＴＡ框和ＣＡＡＴ框均未发生变异，表明已成功克隆了其启动子序列，这为乳腺定位表达的研究奠定了基础。
- 岳军明张宏权王允玲任宏波周廷冲王会信殷震
- 关键词：酪蛋白基因克隆乳腺
- 人尿激酶原乳腺定位转基因小鼠的建立被引量：3
- 1998年
- 应用大鼠β乳酪蛋白基因的上游调控序列和人尿激酶原ｃＤＮＡ构建成功了乳腺定位表达载体．用显微注射的手段导入到受精卵的雄前核，从注射的３００枚受精卵中，１４０枚被移植到９只假孕的受体小鼠．结果从获得的子一代小鼠中，经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实，有３只转基因阳性的小鼠．
- 岳军明张宏权李宝林户荣良俞炜源俞炜源殷震王会信殷震
- 关键词：转基因
