张宝刚
- 作品数：63 被引量：188H指数：7
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 抑制乳腺癌细胞增殖侵袭转移的基因、表达载体及应用
- 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种抑制乳腺癌细胞的增殖侵袭转移的基因、表达载体及应用，基因为LINC00850，为长链非编码RNA是不具有编码蛋白质能力的RNA，长度大于200nt；LINC00850位于X染色体，长...
- 张宝刚付长霞李洪利尹崇高
- 文献传递
- ARK5及其相关信号通路在肿瘤侵袭转移中的作用机制
- 张宝刚吕世军史立宏李洪利刘雨清
- 该研究属于肿瘤学科内的肿瘤病理学相关研究。肿瘤细胞在体内向邻近部位侵袭和远处转移是恶性肿瘤最重要的特征之一，也是影响治疗效果及愈后判断的重要因素，在肿瘤转移的起始阶段，恶性肿瘤细胞往往首先向周边组织内侵袭浸润。肿瘤细胞内...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤侵袭转移肿瘤病理学分子生物学
- Akt2在胶质瘤浸润转移中的作用研究
- 神经胶质瘤是最常见的颅内原发神经系统肿瘤,其中高级别胶质瘤发病率、复发率、致死率高,多数患者出现严重的神经功能障碍,生存质量低下。脑胶质瘤具有进行性发展和侵袭性生长的特性,胶质瘤患者的脑组织受肿瘤
- 马勇杰张宝刚佘春华郭华李文良牛瑞芳应国光张宁
- 关键词：胶质瘤AKT2
- 文献传递
- PLK1基因RNAi慢病毒载体的构建及对食管鳞癌细胞侵袭转移的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:研究慢病毒介导的PLK1(Polo-like kinase1)基因RNAi对食管鳞癌细胞侵袭转移的影响.方法:利用RT-PCR和Western blot检测不同食管鳞癌细胞中PLK1的表达.根据人PLK1mRNA序列设计干扰片段,Western blot检测干扰效率;利用划痕愈合实验及Transwell实验研究靶向PLK1的RNAi对食管鳞癌细胞体外侵袭转移能力的影响.将有效干扰序列构建至慢病毒干扰载体pGLV/H1/GFP+Puro中,测序鉴定.重组慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞包装病毒,制备的重组病毒感染食管鳞癌细胞,利用荧光定量PCR和Western blot检测干扰效率;利用裸鼠肺转移模型实验研究慢病毒介导的PLK1基因RNAi对食管鳞癌细胞在体内侵袭转移能力的影响.结果:筛选出一种高表达PLK1的食管鳞癌细胞株TE-8用于实验研究;筛选出有效的干扰片段,并成功构建靶向干扰PLK1基因的慢病毒载体,制备重组病毒颗粒用于感染食管鳞癌细胞;靶向PLK1的RNAi在体内外均能明显抑制食管鳞癌细胞的侵袭与转移.结论:靶向干扰PLK1基因的重组慢病毒能够抑制食管鳞癌细胞的侵袭与转移,PLK1基因影响着食管鳞癌的恶性进展.
- 于文静张宝刚陈丽梅王守训冯卫国杜长青刘顺梅赵春玲
- 关键词：PLK1慢病毒载体RNAI食管鳞癌
- 探究式教学在病理学教学中的应用及探讨被引量：7
- 2014年
- 改革传统的教学模式,创新教学理念,在病理学教学中采用探究式教学模式,以典型临床病例为依托,结合"问题"式教学方法,病理知识联系临床实例,培养学生不断思考探究问题的能力,为全面培养创新型临床医学实用人才打下坚实的基础。
- 周风华陈燕春郑洁张宝刚张红霞陈安琪吕世军高海玲刘雨清
- 关键词：探究式教学病理学医学生
- BMK1表达对胶质瘤细胞U87侵袭能力影响机制探讨被引量：1
- 2014年
- 目的探讨大丝裂原活化蛋白激酶1(big mitogen-activated protein kinase 1,BMK1)表达对U87细胞侵袭能力的影响及作用机制。方法应用siRNA干扰技术转染U87细胞株,并采用蛋白质印迹法检测U87细胞中BMK1表达及转染后BMK1表达情况。体外癌细胞侵袭实验检测U87细胞转染后侵袭能力变化。BMK1下降后,蛋白质印迹法检测间叶细胞特异性标记蛋白N-cadherin、T-cadherin、Vimentin和转录因子Snail、Slug、Twist1、Zeb1的表达。结果蛋白质印迹法检测结果显示,U87细胞中BMK1相对表达量为1.0±0.21,SCR/U87细胞中BMK1相对表达量为1.1±0.18,SiBMK1/U细胞中BMK1相对表达量为0.45±0.12,差异有统计学意义,F=12.129,P=0.008。体外癌细胞侵袭实验显示,SiBMK1/U87实验组穿透Matrigel膜基质的细胞数为106±18,SCR/U87对照组为61±15,U87对照组为62±14,差异有统计学意义,F=7.977,P=0.020;U87对照组与SCR/U87对照组差异无统计学意义,P=0.941;而SiBMK1/U87实验组穿透基膜的细胞数明显多于U87对照组(P=0.014)和SCR/U87对照组(P=0.013),差异有统计学意义。蛋白质印迹法结果显示,SCR/U87和SiBMK1/U87细胞中N-cadherin相对表达量分别为1.0±0.13和3.8±0.31,t=-14.427,P<0.001;Vimentin相对表达量分别为1.5±0.16和3.9±0.22,t=-15.281,P<0.001;T-cadherin相对表达量分别为4.5±0.12和1.3±0.14,t=30.059,P<0.001。SCR/U87和SiBMK1/U87细胞中Twist1蛋白相对表达量分别为0.75±0.14和2.3±0.22,t=-10.295,P=0.001,差异有统计学意义。表明BMK1表达影响Twist1的表达。结论 BMK1与U87细胞侵袭性显著相关,其侵袭性的调控是通过间叶转化(mesenchymal transition,MT)实现的。
- 齐岳亮陈为一李小龙陈萍萍李洪利刘晓丽张宝刚
- 关键词：U87细胞SIRNA干扰
- NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移被引量：5
- 2013年
- 本课题组先前研究证明NUAK1/ARK5参与乳腺癌、胶质瘤侵袭转移,但机制尚不清楚.本文证明,NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移.应用小RNA干扰技术敲除乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的NUAK1,用G418进行稳定筛选,并用Western印迹进行蛋白质表达检测,结果显示,成功敲除MDA-MB-231细胞中的NUAK1;采用Transwell侵袭实验检测NUAK1在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用,结果表明,NUAK1被干扰的SiNUAK1/MDA-231细胞的侵袭能力明显减弱;应用免疫荧光法对细胞的F-actin进行荧光染色,半定量F-actin聚合分析结果显示,IGF-1在转染空载的细胞组(Scr/MDA-231)能诱导肌动蛋白短暂的聚合反应,而在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231)肌动蛋白的聚合显著减少;用细胞因子IGF-1刺激乳腺癌细胞观察cofilin磷酸化,结果显示,在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231),IGF-1诱导的cofilin的磷酸化明显受抑制.上述结果表明,NUAK1能通过促进F-actin的聚合从而影响乳腺癌细胞的侵袭转移.
- 尹崇高李平李洪利孙磊刘菲张丽娜李文通张宝刚
- 关键词：乳腺肿瘤
- Raptor对胶质瘤细胞侵袭能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:研究Raptor对于胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:采用RNA干扰技术,向胶质瘤U87细胞转染Raptor限定性siRNA干扰质粒,Western blotting检测转染后细胞Raptor的表达水平以鉴定转染效果。体外侵袭实验检测Raptor表达降低后,U87细胞侵袭能力的变化;Western blotting检测细胞中ARK5的磷酸化情况和MMP-2、MMP-9的表达水平。免疫组织化学法检测低级别及高级别胶质瘤中Raptor的表达水平。结果:转染Raptor siRNA质粒的U87细胞命名为siRaptor/U87,转染对照组质粒的细胞命名为Scr/U87,转染成功的实验组细胞Raptor的表达降低。体外侵袭实验中siRaptor/U87较对照组穿透基质膜的细胞数少(P<0.01)。Western blotting显示实验组细胞中磷酸化ARK5、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均较对照组低。胶质瘤组织中Raptor的表达与恶化程度存在相关性(P<0.01)。结论:Raptor表达降低可能通过磷酸化ARK5及增加MMP-2、MMP-9的表达促进胶质瘤细胞的侵袭力。
- 张洪旺张宝刚宋瑞卉王汉秋郭文君
- 关键词：胶质瘤肿瘤侵袭
- 小RNA干扰降低COX-2表达对乳腺癌细胞趋化和侵袭能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨利用小RNA干扰技术降低COX-2表达对高度恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞趋化和侵袭能力的影响。方法应用合成的小RNA干扰质粒转染MDA-MB-231细胞株,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2mRNA的表达。通过趋化运动实验检测细胞的运动能力;体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力。结果限制性内切酶的酶切结果和DNA测序结果显示成功构建了干扰质粒pSUPER-siCOX-2,转染后的细胞株分别命名为MDA-MB-231/pSUPER-basic(对照组)和MDA-MB-231/pSUPER-siCOX-2(实验组)。转染后48h,与MDA-MB-231/pSUPER-basic细胞相比,MDA-MB-231/pSUPER-siCOX-2细胞的COX-2mRNA表达水平下降(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞的趋化运动能力比对照组细胞降低(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞侵袭并穿透Matrivgel膜基质的细胞数量比对照组细胞少(P<0.01)。结论利用siRNA干扰技术降低COX-2表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞株的趋化和侵袭能力具有明显的抑制作用。
- 赵云李媛媛张宝刚刘秀静徐滨赵一诺刘雨清王琳
- 关键词：环氧合酶-2乳腺肿瘤RNA干扰
- 肿瘤相关巨噬细胞通过EMT促进乳腺癌的浸润转移被引量：6
- 2013年
- 探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是否通过上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)促进乳腺癌浸润转移。免疫组化检测80例乳腺浸润性导管癌中TAMs标记物CD68、E-cadherin和Vimentin的表达。结果显示,乳腺浸润性导管癌中CD68阳性表达率明显高于正常乳腺组织,CD68阳性表达与分化程度、淋巴结转移程度相关,与E-cadherin表达呈负相关,与Vimentin表达呈正相关。分离新鲜肿瘤组织中的TAMs,细胞免疫荧光鉴定TAMs分离成功;乳腺癌MCF-7细胞在TAMs条件培养基培养后:细胞形态学发生改变;Transwell侵袭实验表明,细胞侵袭转移力增强;Western blot结果显示,细胞中E-cadherin表达明显减少,Vimentin表达明显增多。由此可得出,TAMs与乳腺癌的浸润转移过程密切相关,TAMs可促进MCF-7细胞发生EMT进而促进乳腺癌的浸润转移。
- 宋瑞卉张宝刚李洪利尹崇高董惠郭文君
- 关键词：乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞上皮-间质转化
