张永利
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：天津农学院园艺园林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 超声波介导Mz_2NHX_1基因遗传转化提高珠美海棠耐盐性
- 2016年
- 【目的】提高珠美海棠的耐盐性,建立更高效的珠美海棠遗传转化体系。【方法】在转化液中利用超声波直接转化无菌条件下横切主脉的珠美海棠试管苗幼叶,通过愈伤组织培养诱导植株再生、抗性筛选,GUS染色鉴定,RT-PCR分析转基因植株的耐盐性。【结果】较利于珠美海棠愈伤组织诱导分化及抗性筛选的培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^(-1)+NAA 0.1 mg·L^(-1)+Kana 50 mg·L^(-1)。超声波处理的最优工作条件为:处理6 s,间歇10 s,工作重复20次,功率80 W,转化效率为31.3%。GUS染色与RT-PCR鉴定结果一致率为100%,RT-PCR结果分析显示,Mz2NHX1基因在转化苗中的表达量约为对照的3倍。荧光定量PCR结果显示转化苗Mz2NHX1基因的表达量为对照组的6.21倍,盐处理试验结果显示转化苗耐盐性得到了显著地提高。【结论】建立了超声波介导的珠美海棠高效遗传转化体系,获得珠美海棠耐盐新材料,为该耐盐基因的研究和盐碱地的改良奠定了基础。
- 孙婷梅王璐平张永利秦家慧于梦楠李爱彭立新
- 关键词：珠美海棠遗传转化体系植株再生耐盐基因
- 转Mz_2NHX_1基因拟南芥对盐胁迫的生理响应被引量：1
- 2016年
- 为了探讨珠美海棠Na^+/H^+逆向转运蛋白基因Mz_2NHX_1在植物耐盐中的作用,以野生型拟南芥和转Mz_2NHX_1基因拟南芥为材料,研究不同盐浓度对转基因和野生型拟南芥种子萌发、植株耐盐性相关生理指标的影响。结果表明:在不同盐胁迫下,转基因拟南芥种子发芽率明显高于野生型。随着盐浓度的增加,野生型和转基因植株的电导率呈上升趋势;SOD活性呈先上升后下降趋势;POD活性、可溶性糖含量、脯氨酸含量在野生型植株中呈先上升后下降趋势,在转基因植株中呈不断升高的趋势。盐胁迫下,转基因植株的各项生理指标均优于野生型,表明Mz_2NHX_1基因的过量表达,提高了转基因拟南芥的耐盐性。
- 王璐平张永利孙婷梅于梦楠秦家慧李爱彭立新
- 关键词：拟南芥盐胁迫生理响应
- 珠美海棠Mz_2NHX1基因的克隆和序列分析被引量：2
- 2015年
- 以珠美海棠幼苗根系的c DNA为模板,根据珠美海棠NHX1(GQ503257)的保守序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到目的基因全长1 865 bp,包含1个1 635 bp的开放阅读框,编码544个氨基酸,其核苷酸序列与苹果(GU338395)、玫瑰(KC188664)、杨树(ACU01853)的核苷酸序列同源性分别是95%、93%、91%。其对应的氨基酸序列与拟南芥(AAF21755)、玫瑰(BAD93487.1)和大叶补血草(BAB11940)液泡型Na+/H+逆向转运蛋白的氨基酸序列的同源性分别是79%、87%、79%,说明该蛋白是一种定位于液泡膜的Na+/H+逆向转运蛋白,该基因属于液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因。它编码的蛋白质分子量为60.5 ku,理论等电点(p I)为8.85,二级结构主要由α-螺旋、β-折叠和不规则卷曲构成,其N-末端具有12个跨膜疏水片段,C-末端具有亲水的长链尾巴,在跨膜片段内含有氨基酸保守序列85-LFFIYLLPPI-94,是Na+/H+逆向转运蛋白抑制剂氨氯吡嗪咪的结合位点。
- 张永利孟晓烨孙婷梅李爱彭立新
- 关键词：珠美海棠克隆生物信息学耐盐机理
- 盐胁迫对珠美海棠幼苗光合特性的影响被引量：2
- 2014年
- 为研究盐胁迫对珠美海棠幼苗光合特性的影响,以珠美海棠(Malus zumi)盆栽幼苗为试验材料,测定它们在不同浓度NaCl胁迫下的光合参数和叶绿体色素含量及叶绿素荧光特性的变化。结果表明,盐胁迫下,珠美海棠幼苗的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、PSⅡ的潜在活性(Fv/F0)、PSⅡ实际光化学量子产量、叶绿素b都呈先上升后下降的趋势,胞间CO2浓度(Ci)呈先下降后上升的趋势,叶绿素a和类胡萝卜素均呈下降趋势。低盐浓度(50 mmol·L-1)下,光合相关参数值和叶绿素b含量均有所提高,说明珠美海棠幼苗对盐胁迫有一定适应能力;随着盐浓度升高,珠美海棠幼苗的光合参数、蒸腾速率、叶绿素含量有所降低,表明其光系统受到影响,进而使其光合性能降低。
- 于沛玉叶添雄张永利孙婷梅彭立新
- 关键词：珠美海棠盐胁迫光合参数叶绿素荧光特性
- 珠美海棠Mz2NHX1基因对拟南芥的遗传转化
- 土壤盐碱化在世界范围内广泛存在,并且随着城市人口不断增长,城市用地逐步增加,不合理种植加之不合理灌溉使土壤的理化性质变差,从而阻碍农业生产的发展。盐害这种非生物胁迫对植物的伤害主要表现在渗透胁迫和离子毒害。植物抵御盐胁迫...
- 张永利
- 关键词：珠美海棠PCR检测
