公共文化服务平台

噬菌体肽库技术及其在HCV抗原表位研究中的应用被引量：1: 2007年; 噬菌体随机肽库技术是研究抗原表位及其配体受体相互作用位点的强有力的工具。本文对噬菌体肽库技术的原理及其在抗原表位研究尤其在HCV抗原表位研究中的应用作一综述。; 彭祥兵余模松; 关键词：噬菌体肽库抗原表位 HCV

一种新型兽用破伤风类毒素抗原的免疫原性被引量：3: 1995年; 应用戊二醛及精氨酸进行毒素分子聚合解毒制备的破伤风类毒素新型抗原，给9群63匹马超免，一次免后抗体增长率达106．1±31．28％，平均抗体单位由免前1540．9±452．85Lf／ml上升至3146．27±929Lf／ml，免疫成功率为100％。; 汪玉兰彭祥兵王爱荣; 关键词：破伤风类毒素抗原免疫原性

人源抗乙型肝炎病毒表面抗原基因工程IgG全抗体的表达、纯化及初步鉴定被引量：2: 2007年; 目的对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体进行表达、纯化及初步鉴定。方法用含Fc片段抗-HBsAg Fab抗体基因的载体pAC-HBs-Fc,与杆状病毒线性DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组抗-HBsAg的全抗体。以不同浓度的HBsAg包被酶标板孔,用间接ELISA法检测培养上清中抗体的表达及特异性;用蛋白G亲和层析柱进行抗体的纯化,并对纯化的抗体进行SDS-PAGE、Western blot和竞争性ELISA分析。结果上清中表达的重组IgG抗体仅与HBsAg呈阳性反应,特异性良好,纯化后其纯度达97.1%。经SDS-PAGE和Western blot分析可见,IgG抗体轻链和重链的相对分子质量分别约为27000和55000,为人源IgG抗体。CHO表达的HBsAg和血源性HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与E.coli表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%。结论人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体可在杆状病毒载体表达系统中成功表达。; 黄仕和周志军彭祥兵詹骞张爱华闭兰余模松梁米芳; 关键词：乙型肝炎病毒表面抗原基因工程抗体杆状病毒纯化

一种新型破伤风类毒素的理化和生物学特性的研究被引量：2: 1995年; 对所研制的新型破类进行SDS－PAGE和HPLC分析，其主要成分为分子量大于584KD的聚合物，HPLC显示第一峰占82．09％～97．68％。此抗原的稳定性能良好，毒性逆转试验阴性，说明此种新破类解毒彻底。动物试验表明，其免疫原性大大优于常规破类，而且达到和超过了1990年版《中国生物制品规程》规定的吸附精制破伤风类毒素的要求。; 彭祥兵汪玉兰王爱荣; 关键词：破伤风类毒素破伤风理化性状生物学特性

牛血清白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定: 2007年; 用牛血清白蛋白(BSA)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,培养上清经过双抗体夹心法检测初步筛选分泌鼠IgG的杂交瘤细胞,将此种杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水用间接ELISA法筛选,获得4株能稳定分泌抗BSA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A5、3A3、3G6、4A8。鉴定结果显示,2A5细胞分泌IgG2a/κ,其余3株细胞分泌IgG1/κ;纯化后4株腹水单抗的纯度达90%以上,对BSA的ELISA滴度均可达到1∶100000以上;4株单抗均不与人以及马、猪、羊、兔、豚鼠等血清发生交叉反应;W estern B lotting试验证明4株单抗均识别分子量为68000的BSA;用间接ELISA法测定4株单抗相对亲和力及相对敏感度大小依次为3A3>2A5>3G6>4A8;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存半年后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。; 余健周志军彭祥兵朱华松施金荣余模松; 关键词：牛血清白蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附试验

HCV NS5A的结构和功能研究进展: 2007年; HCV感染严重危害人类健康，是输血后肝炎的主要病因之一。近年来，有关HCV非结构蛋白NS5A的研究倍受关注，本文对NS5A的结构和功能的研究情况作一介绍。; 彭祥兵余模松; 关键词：丙型肝炎病毒 NS5A

丙型肝炎病毒C区和NS3区嵌合基因的克隆及表达: 2006年; 目的获得丙型肝炎病毒(HCV)C-NS3嵌合抗原,以提高HCV酶联免疫吸附试验诊断试剂的质量。方法应用SOE-PCR(拼接重叠延伸PCR)的方法,构建了HCV的C区和NS3区的嵌合基因,克隆于表达载体pGEX-4T3,并转化于大肠杆菌BL21,经筛选,IPTG诱导HCV的C-NS3嵌合抗原的表达。经SDS-PAGE检测表达水平,Western blot检测抗原特异性。结果SOE-PCR构建的HCV C区和NS3区嵌合基因在BL21中获得表达。经鉴定,其相对分子质量约为75000,并具有高度特异性。结论已获得HCV C-NS3嵌合抗原,为提高HCV酶联免疫吸附试验诊断试剂的质量奠定了基础。; 彭祥兵余健黄仕和周志军李健朱华松张爱华闭兰赵亚杰余模松; 关键词：嵌合基因丙型肝炎病毒

人T淋巴细胞CD3ε链的原核表达及纯化: 2009年; 目的原核表达并纯化人T淋巴细胞CD3ε(hCD3ε)链。方法以健康成人外周血单个核细胞总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增人CD3ε链基因,并克隆入pCR-II载体,酶切鉴定及测序分析后,再定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-4T-3-hCD3ε,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经GST亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定。结果酶切分析及DNA测序证实,hCD3ε链基因被正确克隆入pGEX-4T-3载体,并能在原核系统中稳定表达。表达产物的相对分子质量为49 500,0.2 mmol/L IPTG 25℃诱导表达4.5 h,目的蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的29.3%,其中可溶性表达占12.8%。纯化的融合蛋白纯度可达86.1%,可分别被兔抗人CD3ε多抗和羊抗GST多抗识别。结论已成功地原核表达并纯化了GST-hCD3ε融合蛋白。; 金玉玲张爱华闭兰赵亚杰彭祥兵孙可芳; 关键词：人T淋巴细胞原核表达纯化

从半合成噬菌体抗体库筛选抗狂犬病毒人单链抗体被引量：4: 2004年; 目的　应用纯化的狂犬病毒抗原从半合成噬菌体抗体库中筛选针对狂犬病毒的人单链抗体(ScFv)。方法　用固相化的狂犬病毒抗原对半合成抗体库进行 3轮“吸附洗脱扩增”的筛选 ,从第 3轮洗脱下来的克隆中获得一株有可溶性表达且特异性结合狂犬病毒抗原的ScFv ,并进行基因序列测定。结果　所获氨基酸序列经blast数据库搜索 ,与一种抗狂犬病毒免疫球蛋白的氨基酸序列同源性最高 ( 82 % )。经检索kabat数据库 ,发现其轻、重链可变区分别属于VkⅠ型、VHⅢ型。结论　从噬菌体抗体库可以方便快捷地分离到针对狂犬病毒的单链抗体。; 闭兰张爱华彭祥兵王志友张智余模松; 关键词：狂犬病毒噬菌体抗体库免疫球蛋白

百日咳毒素单克隆抗体的制备及其ELISA定量检测方法的建立被引量：3: 2013年; 目的制备百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA用于检测PT的含量。方法采用杂交瘤技术制备PT的单抗,并对其进行鉴定;优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行精密性及准确性验证;应用建立的方法检测武汉生物制品研究所有限责任公司(简称武汉公司)73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT含量。结果获得4株稳定的抗PT杂交瘤细胞株,抗体亚型均为IgG2a,抗体腹水ELISA效价达1∶106以上,均能与PT发生特异反应,而与百日咳丝状血凝素、白喉和破伤风类毒素未发生交叉反应;建立的双抗体夹心ELISA的线性检测范围在2.50～80.00 ng/mL之间,酶标板内和板间变异系数均小于10%;PT的高、中、低浓度的回收率分别为97.41%、106.60%和89.98%;73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT质量浓度在50.00～150.00 ng/mL之间波动,说明中间产物的批间一致性及稳定性趋势良好。结论已成功制备了抗PT的单抗,并建立了精密性和准确性均较好的定量检测PT的双抗体夹心ELISA,可用于无细胞百日咳疫苗生产中PT的定量检测。; 詹骞刘志飞彭祥兵宁浩然陈雯张爱华杨晓明; 关键词：百日咳毒素单克隆抗体酶联免疫吸附试验

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

彭祥兵

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

彭祥兵

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈