彭翼飞
- 作品数:48 被引量:162H指数:8
- 供职机构:南方医科大学基础医学院基因工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广州市重大科技攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 寡核苷酸阵列比较基因组杂交技术及其应用被引量:2
- 2006年
- 阵列-比较基因组杂交技术(arraycomparativegenomichybridization,arrayCGH)能在全基因组水平和/或高分辨率基础上检测染色体拷贝数的变化,主要应用于遗传学和肿瘤学研究。ArrayCGH中微阵列探针通常是PCR扩增的BAC克隆或cDNA分子。最近几年,寡核苷酸阵列比较基因组杂交(oligonucleotidearrayCGH,oaCGH)逐渐开始应用。oaCGH与BACarrayCGH比较,具有操作更简便、探针设计更灵活、分辨率更高等多项优点,预计oaCGH将逐步取代利用BAC克隆片段或cDNA分子的arrayCGH。oaCGH的应用及其与其它高通量检测技术的结合将促进新的癌症相关基因、肿瘤耐药基因的发现。综述了现有主要oaCGH平台在空间分辨率、探针长度、灵敏度、特异性等方面的特点及其应用,概括了oaCGH近年来的进展。
- 彭翼飞马文丽
- 关键词:比较基因组杂交
- 广东省1990~1998年登革热流行病学监测分析被引量:14
- 1999年
- 为了预防登革热的暴发流行,于1996 年4 月~1998年12 月开展了登革热的流行病学监测,根据以往发生过登革热流行的疫情分析,选择广东省3 个监测点,收集血标本95 份及蚊媒标本6000 余只分别作病原分离,并进一步采用单克隆抗体间接免疫荧光试验和RT- PCR 鉴定;采集监测点健康人血标本1025 份应用间接免疫荧光试验作抗体水平调查。3 个监测点上收集的发热待查患者和蚊媒标本均未能分离出登革病毒。蚊媒监测结果提示:布雷图指数大大超过有效控制指标5 ;全年大部分时间布雷图指数均超过20 以上;血清学调查表明:健康人群抗体水平逐年下降;
- 方美玉陈翠华李锦清李荣彪温卫东彭翼飞林立辉陈湛田小东蒋廉华白志军陈唯军
- 关键词:登革热流行病学
- Antizyme1基因转染对K562细胞增殖与凋亡的影响被引量:1
- 2007年
- 目的:研究鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白对人红白血病K562细胞增殖、三氧化二砷(As2O3)诱导凋亡时的影响。方法:定点突变技术构建缺失frameshift位点的pEGFP-N1-AZ1-mutation重组表达载体。脂质体法转染K562细胞,通过G418筛选获得稳定表达antizyme1的K562pAZ1m细胞系。采用不同浓度的As2O3处理细胞,通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期及凋亡变化。并通过RT-PCR方法检测antizyme1转染对cyclinD1和survivin基因表达的影响。结果:获得稳定表达antizyme1的K562pAZ1m细胞株后,其增殖能力明显减慢。cyclinD1基因表达降低,细胞主要停滞于G0/G1期。在As2O3的诱导作用下,细胞凋亡增多,survivin基因表达降低。结论:AZ1基因能够抑制K562细胞增殖,通过对cyclinD1的负调控使细胞周期停滞于G0/G1期。并可能通过下调survivin表达来加强As2O3对其的诱导凋亡作用。
- 姜立马文丽李晋彭翼飞徐兵郑文岭
- 关键词:抗酶细胞增殖细胞周期凋亡
- DNA芯片技术筛选K562肿瘤细胞特异性基因被引量:3
- 2004年
- 目的应用DNA芯片技术筛选人白血病K562细胞中的肿瘤特异性基因。方法提取正常人白细胞和K562细胞基因组DNA,并用限制性内切酶Sau3AI酶切。其中K562细胞基因组酶切产物经DNA聚合酶Ⅰ补平加A后克隆到T-载体,挑选阳性克隆,用PCR扩增,以纯化的PCR产物做探针,制备K562细胞基因组DNA芯片。正常人白细胞基因组酶切产物加上人工通用接头,用限制性标记技术标记上荧光标记物Cy3,与制备的K562细胞基因组DNA芯片杂交。结果芯片杂交结果经扫描分析,发现42个K562细胞肿瘤特异性基因,进一步用序列分析证实,其中有1个为BCR(breakpoint cluster gene)基因。结论我们自制的K562细胞基因组DNA芯片可以成功地用于筛选肿瘤特异性基因,为更好地从基因组水平研究肿瘤发生的分子机制提供了新的技术途径。
- 彭桂福马文丽宋艳斌彭翼飞石嵘毛向明郑文岭
- 关键词:DNA芯片技术K562肿瘤细胞特异性基因
- 丙型肝炎病毒基因分型研究进展被引量:7
- 2000年
- 丙型肝炎病毒(HCV)基因型众多,其命名和分型标准已渐趋统一,一般采用Simmonds命名系统。不同基因型的分布地理差异明显,我国以1b、2a型最常见,南北差异可能不大。现有的HCV基因分型法有多种,PCR和血清学两类方法各有其局限性,相应也出现多种改进及新方法,主要是针对PCR法的改进。近几年新兴的DNA芯片技术也开始应用于HCV基因分型,很可能提供一种更敏感、快速、高效的HCV基因分型法。
- 彭翼飞
- 关键词:丙型肝炎病毒DNA芯片基因分型
- 复方苦参注射液联合化疗治疗胃癌疗效的荟萃分析被引量:20
- 2013年
- 目的:系统评价复方苦参注射液联合化疗治疗中晚期胃癌的临床疗效和生存质量改善情况。方法:检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBASE、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文科技期刊全文数据库(VIP)、万方数字化期刊全文库、中国期刊全文数据库(CNKI)中复方苦参注射液联合化疗治疗中晚期胃癌的随机对照试验(RCTs)。由2名研究人员采用Cochrane系统评价的方法独立评价纳入研究的方法学质量,并提取有效数据用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果:共纳入12项RCT(共1 004例患者)。Meta分析结果显示,复方苦参注射液联合化疗治疗胃癌的总有效率[OR=1.51,95%CI(1.18,1.94)]、生存质量改善率[OR=1.95,95%CI(1.49,2.55)]、白细胞减少率[OR=0.36,95%CI(0.26,0.50)]等差异都具有统计学意义,均优于单纯化疗。发表偏倚分析:倒漏斗图两侧对称性有偏差,可能是少数临床实验的报告偏倚导致。结论:复方苦参注射液联合化疗治疗中晚期胃癌可明显改善患者的生存质量,且安全性较好,值得开展临床试验验证及推广应用。
- 尹莉郑文岭孙其喆彭翼飞马文丽
- 关键词:复方苦参注射液化疗胃癌META分析
- 逆转录聚合酶链反应与常规法检测蚊体内黄病毒的比较研究被引量:4
- 1997年
- 目的:检测比较蚊体内的黄病毒。方法:采用RT-PCR技术及常规的C6/36细胞培养结合免疫荧光法。结果:无论实验感染的登革热病毒蚊虫标本,还是从野外捕捉的标本,均表明RT-PCR检出黄病毒的阳性率比常规法高,且快速、敏捷,操作简便;常规法检出周期长(2~3周),操作复杂、繁琐和反复多次,检出率低。但常规法能通过细胞病变,观察病毒的毒力,这是RT-PCR所不及的。结论:以RT-PCR结合常规法进行虫媒病毒的研究,将更有利于探索蚊虫与虫媒病毒的关系和内在规律。
- 林立辉陈翠华方美玉彭翼飞蒋廉华
- 关键词:逆转录聚合酶链反应常规法黄病毒
- 狂犬病病毒糖蛋白在酿酒酵母中的分泌表达被引量:1
- 2010年
- 目的使狂犬病病毒糖蛋白在酿酒酵母中获得分泌表达,为制备口服狂犬病疫苗奠定基础。方法克隆狂犬病病毒糖蛋白基因,与菊粉酶信号肽序列连接为融合基因InG,该融合基因克隆至pYes2载体Gal1启动子下游,构建成诱导分泌表达载体pYes2-InU-G,该重组载体转化酿酒酵母筛选阳性克隆,阳性重组子经半乳糖诱导12h后,收集上清进行SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定。结果 RT-PCR和Western-blot鉴定显示狂犬病病毒糖蛋白已获得分泌表达,并且具有良好的抗原性。结论 CVS24病毒株的糖蛋白在酿酒酵母中获得分泌表达且具有良好的抗原性,为进一步研究重组酵母能否在消化道中存活并继续进行分泌表达提供了研究条件。
- 赵慧郑文岭高洋彭翼飞张宝马文丽
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白酿酒酵母分泌表达
- RD技术在HCV cDNA分型芯片探针制备中应用的初步研究
- 2004年
- 目的 研究限制性显示 (RD)技术在丙型肝炎病毒 (HCV)cDNA分型芯片探针制备中的可行性。方法 Sau3AⅠ酶消化HCV 1、HCV 2各亚型全长cDNA ,所得的片段与通用接头相连 ,通过 10个选择性引物进行分组PCR ,经PAGE电泳结合银染法进行分离 ,得到较纯净的HCVcDNA限制性片段。对这些片段做分子克隆 ,并测序鉴定。结果 由HCV 3个亚型的全长cDNA得到 6 6个大小相对均一 (2 0 0~ 90 0bp)的限制性片段 ,平均每个亚型约 2 2个。测序结果表明 ,属于HCV基因 ,可以作为HCV分型芯片的探针。结论 RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段 ,适合于分型诊断基因芯片探针的收集。
- 孙朝晖郑文岭彭翼飞张宝马文丽
- 关键词:肝炎病毒丙型基因芯片分子探针
- cDNA文库法在HCV-1b检测芯片研制中的应用被引量:8
- 2005年
- 制备丙型肝炎病毒(HCV) 1b亚型诊断芯片并进行初步验证评价.采用cDNA文库法制备探针,用限制性内切酶Sau3AⅠ消化HCV 1b全长cDNA ,所得的酶切片段72℃补平加A ,AT克隆,PCR初步鉴定,并测序.将筛选出的片段打印在氨基修饰的玻片上制备成检测芯片并进行杂交验证分析.运用cDNA文库法,得到2 2个大小相对一致(2 5 0~75 0bp)的基因片段.序列分析表明,均属于HCV 1b基因,可以作为诊断芯片探针;样品标记采用限制性显示(restrictiondisplay ,RD)技术,标记后进行杂交.杂交结果显示,样品和诊断基因芯片杂交的敏感性和特异性均佳.批内和批间精密度CV值分别为5 4 %和6 8% ,表明用cDNA文库法收集片段是一种快速、简便制备芯片探针的实用方法.
- 孙朝晖郑文岭彭翼飞张宝吕梁马晓冬马文丽