房永祥
- 作品数：131 被引量：333H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 牛G3BP1蛋白的原核表达及其对牛cGAS生物酶催化活性的影响
- 2023年
- 为了探究牛G3BP1(bG3BP1)对DNA识别受体cGAS生物酶催化活性的影响,本研究提取牛血液淋巴细胞中总的RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,克隆出bG3BP1基因全长;随后构建bG3BP1的原核表达载体pET-28a-SUMO-bG3BP1,将其转化至大肠杆菌中进行诱导表达,使用镍亲和层析柱对重组蛋白bG3BP1进行纯化,并切除His6-SUMO标签后再经镍柱纯化;最后将获得的bG3BP1蛋白用于牛cGAS(bcGAS)的体外酶促反应,采用ELISA方法检测酶促合成产率。结果显示,可溶性表达的bG3BP1蛋白促进了bcGAS的体外酶促反应,提高了第二信使分子2′3′-cGAMP的产率,这为2′3′-cGAMP的大规模生产及应用提供了研究思路和技术方法。
- 田慧慧何小兵陈国华高真贞韦雨松俞宗佑房永祥米晓云景志忠
- 关键词：原核表达酶促反应
- 一种水溶性复合免疫佐剂以及含有该佐剂的疫苗组合物
- 景志忠曾爽陈国华房永祥宋林华贾怀杰何小兵
- 该项成果属于免疫佐剂领域，公开了一种水溶性复合免疫佐剂以及制备该种佐剂的方法，在相应的疫苗上使用这种佐剂取得良好的效果。该项成果使用两种具有佐剂潜力的新分子相复合配伍成为新型复合佐剂，实验研究证明这种新型佐剂达到了比传统...
- 关键词：
- 关键词：免疫佐剂
- 牛结节性皮肤病的流行新动态及我国的应对策略被引量：13
- 2022年
- 2019年8月我国新疆伊犁地区首次暴发牛结节性皮肤病(LSD),在不到一年内结节性皮肤病病毒从我国最西北部传到最东南部诸省区,之后LSD疫情迅速传播和扩散,2021年又波及我国多个省区市,呈大流行态势,对我国养牛业特别是奶牛业造成巨大危害和威胁。近年来,世界上特别是俄罗斯等国家又发现了LSD疫苗样疾病以及新的变异毒株,对LSD的防控提出了新挑战。为做好这一外来病的防控工作,通过LSD疫情流行现状与趋势、发现的新流行毒株与问题,探讨我国LSD防控的新策略,为有效控制、净化和根除该病提供指导。
- 何小兵景伟房永祥陈国华李维克贾怀杰娄忠子李小明苏洋谭金龙高真贞景志忠
- 关键词：防控策略
- 猪白细胞抗原复合体Ⅰ类和Ⅱ类研究进展被引量：4
- 2009年
- 猪主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原复合体(SLA),是猪基因组中基因密度最高的区域之一,也是多态性最高的区域。许多研究表明SLA在抗原提呈及免疫调节等方面起着重要的作用,其基因及基因组学研究在以猪为替代模型的人-猪器官移植、癌症、变态反应、猪的生产数量性状及对感染性疾病的应答、疫苗研制等方面都是热点。我们就目前Ⅰ类和Ⅱ类SLA分子功能基因多态性及与机体免疫水平、抗病育种和生产性状的相关性作一综述。
- 莫斯科房永祥冯海燕景志忠
- 关键词：多态性抗病育种免疫水平
- 一种CpG寡聚脱氧核苷酸及制备与其用途
- 本发明公开了一种含CpG寡聚脱氧核苷酸复合佐剂的制备及其用途。本发明提供了序列为SEQ ID No.1的CpG寡聚脱氧核苷酸，且所有核苷酸均为硫代修饰。本发明的CpG寡聚脱氧核苷酸具有增强B细胞增殖和ThΙ型免疫反应的能...
- 景志忠房永祥赵波贾怀杰陈国华何小兵沈岩尔李政厅杨帆刘娟秦娟
- 文献传递
- 一种水溶性复合免疫佐剂以及含有该佐剂的疫苗组合物
- 本发明属于免疫佐剂技术领域，公开了一种水溶性复合免疫佐剂，其由多磷腈高分子聚合物和包含SEQ？ID？NO：1所示的CpG基序的重组质粒按照一定的重量比配制而成，其中多磷腈高分子聚合物的侧链为对丙酸钠苯氧基，分子量为70-...
- 景志忠曾爽陈国华房永祥宋林华贾怀杰何小兵
- 文献传递
- 猪繁殖障碍性疫病多重PCR诊断方法的建立及其应用被引量：6
- 2010年
- 根据GenBank已发表的猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的序列,经DNAstar生物学软件和BLAST序列分析,利用Oligo6.0软件分别设计并合成了4对特异性扩增引物.在初步优化单项PCR反应退火温度和反应体系的基础上,建立了同时检测CSFV、PCV2、PRRSV和PRV的多重PCR诊断方法.结果表明:该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性;对30份临床样品进行检测,结果发现,CSFV、PRRSV、PCV2和PRV的阳性率分别为46.7%、43.3%、53.4%、10.0%,其中,PRV与PCV2、CSFV与PCV2和CSFV与PRRSV混合感染的阳性率分别为6.7%、36.7%和10.0%;PRV、PCV2和PRRSV单一感染的阳性率分别为3.3%、10.0%和33.3%.说明所建立的多重PCR诊断方法,可以应用于CSFV、PRRSV、PCV2和PRV混合感染所引起的猪繁殖障碍性疫病的临床鉴别诊断.
- 贾怀杰陈国华何小兵王晓霞房永祥窦永喜瞿惠玲景志忠
- 关键词：猪瘟病毒猪圆环病毒2型猪繁殖与呼吸综合征病毒猪伪狂犬病毒
- 猪CD8α分子胞外区基因片段的原核表达
- 2010年
- 采用PCR技术从pGEM-pCD8α重组质粒中克隆了pCD8α胞外区去信号肽基因片段,并构建原核表达载体pET-30a-pCD8α-ED,在不同IPTG浓度和时间下进行诱导表达.结果表明:SDS-PAGE表达出约25ku的融合蛋白,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,IPTG最佳诱导浓度为0.5mmoL·L-1,诱导6h时表达量达到峰值;Western-blot结果显示,在25ku左右出现杂交条带,表明表达的融合蛋白能被抗HIS标签的单克隆抗体识别,说明目的蛋白在大肠杆菌中得到了成功表达.
- 崔青孙晓林王生富房永祥陈国华曾爽景志忠
- 关键词：原核表达
- 霍乱弧菌二核苷酸环化酶的可溶性原核表达及其表达产物的生物活性分析被引量：2
- 2021年
- 为获得具有生物活性的霍乱弧菌二核苷酸环化酶(DncV)蛋白与环二核苷酸c-di-GMP、c-di-AMP和3'3'-cGAMP,构建了DncV基因的原核表达载体pET-28a-SUMO-DncV,将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),并通过优化诱导条件实现了可溶性表达;利用镍柱亲和层析纯化表达的重组蛋白产物,随后切除SUMO标签蛋白,再用亲和层析进一步纯化,获得了纯度较高的重组DncV蛋白;将获得的重组DncV蛋白通过体外酶促反应分别合成了c-di-AMP、c-di-GMP和3'3'-cGAMP,且合成产物能够诱导细胞产生Ⅰ型IFNs。结果表明,重组蛋白DncV及其产物c-di-GMP、c-di-AMP和3'3'-cGAMP均具有生物活性,这为后续抗病毒、抗肿瘤药物以及免疫增强剂和佐剂的开发奠定了基础。
- 杨帆龙朝琳何小兵陈国华李维克贾怀杰房永祥娄忠子景志忠
- 关键词：霍乱弧菌原核表达活性分析
- 一种具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸序列及其应用
- 本发明公开了一种具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸序列及其应用。本发明提供了寡聚脱氧核苷酸，其核苷酸序列为序列1，且该寡聚脱氧核苷酸中所有核苷酸均为硫代修饰，本发明提供的序列1所示的寡聚脱氧核苷酸，其具有强烈的免疫增强作...
- 景志忠房永祥赵波贾怀杰秦娟陈国华何小兵
