曹善津
- 作品数：8 被引量：31H指数：4
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体的构建与表达被引量：4
- 2002年
- 目的 对模拟人卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单链抗体6B11scFv进行人源化改造和表达。方法采用重叠PCR和基因工程技术,将6811scFv基因与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合,构建人源化抗独特型抗体6811VHVLhC基因。用IPTG诱导大肠杆菌进行表达,并采用酶切法、DNA测序、SDS—PAGE电泳、ELISA和免疫印迹技术等进行鉴定。结果酶切和DNA测序表明插入片段正确;SDS—PAGE凝胶电泳显示融合蛋白分子量50 000 Da处有一诱导蛋白带;而不连续非变性凝胶电泳表达产物分子量为100 000 Da;ELISA和免疫印迹结果显示,表达出的6811VHVLhC人源化抗体仍具有6B11scFv和人IgG1CH3的活性。结论 已成功构建并表达出双价的可模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体。
- 崔恒昌晓红冯捷刘蓓曹善津李小平钱和年
- 关键词：抗独特型抗体人源化卵巢肿瘤融合蛋白
- 卵巢癌细胞共刺激分子的表达被引量：4
- 2000年
- 依据Ｔ细胞活化的双信号学说[1],利用免疫基因修饰肿瘤细胞,使其更具有免疫原性和抗原呈递细胞的功能,是肿瘤疫苗设计的重要策略之一。近年的研究发现,共刺激分子ＣＤ80和ＣＤ86在诱发Ｔ细胞介导的抗肿瘤免疫方面起着重要的共刺激作用,在鼠的体内外试验以及人的体外试验中...
- 曹善津钱和年冯捷付天云叶雪
- 关键词：卵巢肿瘤CDCD80CD86
- 人B7-1、IFN-γ双顺反子逆转录病毒载体的构建和表达被引量：2
- 2000年
- 目的 :制备免疫基因修饰的卵巢癌肿瘤疫苗。方法 :利用口蹄疫病毒的内在性核糖体插入位点 (internalribosomeentrysites,IRES) ,通过基因克隆技术构建人B7 1、IFN γ双顺反子逆转录病毒载体PLXSN/B7 1IFN γ。结果 :将PLXSN/B7 1IFN γ转染逆转录病毒包装细胞 ,包装成病毒 ,经滴度测定后 ,转导卵巢上皮癌细胞系 3AO ,筛选稳定表达克隆 ,RT PCR和免疫流式细胞测定均可证实B7 1、IFN γ在同一转导细胞的共表达。结论 :口蹄疫病毒的IRES可提供B7 1、IFN
- 曹善津钱和年冯捷付天云叶雪姚煜
- 关键词：B7-1干扰素Γ肿瘤基因治疗逆转录病毒
- 双顺反子人B7-1、IFN-γ共表达载体修饰的卵巢癌瘤苗免疫反应的研究被引量：4
- 2003年
- 目的 :研究B7 1、IFN γ双基因修饰的卵巢癌瘤苗的免疫效果。方法 :构建了双顺反子人B7 1、IFN γ共表达逆转录病毒载体 ,用其修饰卵巢癌原代细胞 ,制备成肿瘤疫苗 ,体外刺激自体淋巴细胞 ,以MTT法进行杀伤抑制试验。对SCID小鼠进行人免疫重建 ,于皮下接种双基因修饰的卵巢上皮癌细胞系 3AO ,观察肿瘤的成瘤情况。结果 :体外试验证明人B7 1、IFN γ基因修饰的卵巢癌疫苗可诱导肿瘤特异性杀伤活性。体内试验观察到双基因修饰的卵巢癌细胞系成瘤性下降。结论 :B7 1、IFN γ双基因修饰的肿瘤细胞可诱导很强抗肿瘤免疫反应 ,为联合免疫基因修饰的卵巢癌瘤苗的制备提供了一定的借鉴。
- 钱和年刘广芝曹善津冯捷叶雪
- 关键词：B7-1IFN-Γ逆转录病毒载体
- 卵巢癌抗独特型疫苗(6B11mGM)动物体内诱导抗肿瘤免疫应答的实验研究被引量：2
- 2000年
- 目的 观察卵巢癌抗独特型单链抗体 ６Ｂ１１ＳｃＦｖ与鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因于（ｍｕｒｉｎｅ ｇｒａｎｕｌｏｃｖｔｅ－ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ．ｍＧＭ－ＣＳＦ）的融合蛋白（６Ｂ１１ｍＧＭ）在小鼠体内诱导抗肿瘤免疫反应情况，探讨此种融合蛋白作为卵巢癌疫苗的可能性及适当的免疫方法。方法 用融合蛋白６Ｂ１１ｍＧＭ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备抗血清。采用间接ＥＬＩＳＡ及免疫流式方法分析抗血清特征。结果 经ＥＬＩＳＡ检测，融合蛋白６Ｂ１１ｍＧＭ免疫小鼠后，可诱导机体产生ＡＢ３。同时可刺激小鼠脾脏淋巴细胞ＣＤ４＋细胞明显升高，ＣＤ８＋细胞略有升高。结论 融合蛋白６Ｂ１１ｍＧＭ可诱导机体产生特异体液免疫和细胞免疫反应，为抗独特型卵巢癌疫苗用于临床奠定了基础。
- 崔恒刘蓓冯捷昌晓红叶雪李艺曹善津付天云姚煜钱和年
- 关键词：卵巢癌抗独特型肿瘤疫苗动物
- 全文增补中
- 卵巢癌抗独特型单链抗体的人源化——抗独特型微抗体的构建与表达被引量：13
- 2002年
- 为了降低人抗鼠抗体反应 ,获得满意的免疫原性 ,将模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体人源化 .采用重叠PCR和基因工程的技术 ,将 6B11ScFv基因的轻链和重链颠倒 ,成为 6B11VL VH.再与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合 (VL VH CH3) ,构建抗独特型微抗体的原核表达载体 .转化E .coliBL2 1(DE3)后用IPTG诱导表达 .经SDS PAGE分离显示 ,在 5 0kD左右处有一诱导蛋白带 .不连续非变性凝胶电泳显示 ,表达产物分子量为 10 0kD左右 .采用ELISA、竞争抑制实验、West ern印迹对其进行活性测定 .结果表明 ,人源化的抗独特型微抗体具有特异性双价结合卵巢癌单克隆抗体COC16 6 9和识别人免疫球蛋白IgG1的活性 。
- 崔恒昌晓红冯捷刘蓓曹善津
- 关键词：卵巢癌人源化抗独特型微抗体
- 卵巢癌抗独特型抗体融合蛋白细胞免疫功能的体外实验被引量：4
- 1999年
- 目的探讨卵巢癌抗独特型单链抗体（6B11scFV）与人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF）形成的融合蛋白（6B11GM）作为肿瘤疫苗的可能性。方法从卵巢癌病人外周血中分离得到单个核细胞、T淋巴细胞和作为抗原呈递细胞的单核细胞，同时从病人腹水中分离得到癌细胞，分别以卵巢癌抗独特型抗体的全抗体（6B11）、6B11GM、6B11＋hGM-CSF、hGM－CSF进行体外T淋巴细胞增殖实验和自身肿瘤细胞杀伤实验。并对6B11和6B11GM的作用进行比较。结果6B11GM能诱导抗原特异性T淋巴细胞增殖，其作用优于6B11；6B11GM能增加外周血单个核细胞对自身肿瘤细胞的杀伤作用。结论6B11GM能诱导抗原特异性的细胞免疫反应，为卵巢癌的主动免疫治疗提供新的方法。
- 杨飞雪钱和年冯捷崔恒刘蓓曹善津付天云叶雪
- 关键词：重组融合蛋白抗体卵巢肿瘤
- HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞系顺铂耐药性的变化被引量：2
- 2000年
- 目的 人乳头瘤病毒 16型 E6 E7区基因编码的蛋白具有转导人上皮细胞 ,使之获得永生化特性的作用。为建立卵巢癌永生细胞系 ,我们对 HPV16 E6 E7转导卵巢癌细胞的方法及转导细胞对顺铂的耐药性进行了研究。 方法 采用脂质体方法 ,将含有 HPV16 E6 E7的重组逆转录病毒载体 p L XSN16 E6 E7,转染逆转录病毒包装细胞 PT6 7,经 G418筛选 ,病毒滴度测定 ,筛选出 1株高滴度 (1.9× 10 7/m l)的产病毒克隆 ,将之转导卵巢癌细胞系SKOV3、3AO,各筛选出 1株稳定表达 HPV16 E6 E7的克隆 ,SKOV3/E6 E7、3AO/E6 E7。经 RT- PCR、免疫细胞化学检测证实 HPV16 E6 E7的表达 ,之后采用 MTT法检测了 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞系对顺铂耐药性的变化。结果 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞系 SKOV3/E6 E7、3AO/E6 E7对顺铂的耐药性无改变。 结论 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞没有发生顺铂耐药性的改变。本研究为采用此法建立卵巢癌永生细胞系 ,特别是建立耐药卵巢癌细胞系奠定了基础。
- 曹善津钱和年冯捷付天云叶雪刘蓓姚煜刘广芝
- 关键词：卵巢肿瘤耐药性人乳头瘤病毒顺铂
