曾巧英
- 作品数：115 被引量：398H指数：10
- 供职机构：甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 两株不同血清型禽源多杀性巴氏杆菌的理化特性研究
- 1999年
- 禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（８∶Ａ 型） 和Ｃ４８１（５∶Ａ 型） 对营养的需要较高，在一般培养基上生长不良，相比之下，Ｃ４８１比Ｐ１０５９ 生长更差，但在胰蛋白胨肉汤和加５ ｍ Ｌ／Ｌ 血清的普通培养基中两株菌均生长丰盛；两株菌的生长曲线显示，Ｃ４８１在对数生长期的繁殖速度较快，最高菌数略低，但衰落期细菌死亡速度较慢；对培养基中ＮａＣｌ 含量的要求，Ｃ４８１ 为０ ～２ ．７ ％ ，Ｐ１０５９ 为０ ．９ ％ ～２ ．１ ％ ；对ｐＨ 的要求，Ｃ４８１ 为７ ．４ ～７ ．８ ，Ｐ１０５９ 为７ ．０ ～７ ．４ ；两株细菌用小白鼠连续传５ 代复壮后，对小白鼠的最小致死量（ ＭＬＤ） ，Ｃ４８１为６ 个菌，Ｐ１０５９ 为９ 个菌。
- 曾巧英
- 关键词：禽霍乱巴氏杆菌理化特性
- 一种提高甘蔗实生苗选育种效率的育苗方法及应用
- 本发明公开了一种提高甘蔗实生苗选育种效率的育苗方法及应用。本发明通过对改变甘蔗实生苗播种和定植的时间及相关配套育苗措施，节约了播种前期维持育苗环境的能源和劳动力，节省了宿根选种方法的土地资源及时间，降低了甘蔗实生苗选育种...
- 吴嘉云齐永文曾巧英凌秋平樊丽娜李奇伟杨湛端陈勇生胡斐何慧怡
- 文献传递
- 山羊支原体山羊肺炎亚种M17基因的原核表达及细胞定位研究被引量：1
- 2020年
- 为分析山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)氨基肽酶M17的特征及细胞定位。参照GenBank中Mccp M1601株的M17基因序列,优化密码子,合成原核表达载体pET30a-M17,将鉴定正确的表达载体转化大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导后获得融合表达蛋白;用其免疫新西兰兔,制备超免疫血清,并测定其效价和代谢抑制效果;通过Western-blot和i ELISA两种方法对M17在Mccp细胞内的分布进行了初步研究。结果显示,pET30a-M17重组蛋白在大肠杆菌中获得成功表达,大小约50 ku,与预期相符,密码子优化后的表达产物以可溶性和包涵体两种形式存在;免疫后的兔血清抗体效价达1∶80 000以上,说明M17重组蛋白具有较好的免疫原性和反应活性;M17多抗血清对Mccp无代谢抑制作用,但能够与Mccp的膜蛋白、胞浆蛋白及全菌蛋白发生特异性反应,表明M17蛋白在Mccp的细胞膜和细胞质中均有分布,但细胞膜中含量略高于细胞浆。M17的成功表达以及在Mccp中的细胞定位为其生物学功能研究奠定了基础,也为山羊传染性胸膜肺炎的诊断和疫苗研制提供了参考。
- 赵国强郝华芳陈胜利颜新敏马丽娜邹璐史耀旭刘永生曾巧英储岳峰
- 关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种原核表达代谢抑制细胞定位
- 猪带绦虫缺氧诱导因子-1的原核表达和真核表达及其多克隆抗体的制备被引量：2
- 2015年
- 为了表达猪带绦虫的缺氧诱导因子-1(HIF-1)并制备其特异性抗体,根据本课题组对猪带绦虫全基因组测序获得的HIF-1基因序列设计了1对特异性引物,以提取的猪带绦虫的总RNA为模板,通过RTPCR获得猪带绦虫HIF-1基因。将该基因定向克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,并用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,获得了约为17.0ku的表达产物,与目的蛋白的大小相符。原核表达的蛋白纯化后免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体,ELISA和Western-blot结果表明,制备的多克隆抗体有较高的抗体效价(1∶51 200)和抗原特异性。该基因又被定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1中进行了真核表达。结果成功构建了猪带绦虫HIF-1因子的原核表达系统和真核表达系统,并制备出其多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定了基础。
- 周玲玲骆学农张少华侯俊玲孙铭苑梁娜曾巧英才学鹏
- 关键词：猪带绦虫缺氧诱导因子-1原核表达真核表达多克隆抗体
- 柔嫩艾美耳球虫在鸡巨噬细胞中的培养及子孢子感染巨噬细胞细胞因子的mRNA水平被引量：2
- 2020年
- 以鸡巨噬细胞(HD11)为柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的宿主细胞,将E.tenella子孢子体外接种HD11细胞,观察其入侵细胞、发育及诱导细胞抗感染免疫情况。用荧光探针和real-time PCR方法分别检测细胞内NO和ROS的含量和E.tenella感染相关的8种宿主细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TNF-α、iNOS和IRF7)mRNA水平。结果显示,E.tenella子孢子成功入侵HD11细胞,但并没有发育迹象。与不刺激组相比,活子孢子刺激后HD11细胞内NO含量在4 hpi显著升高,8 hpi达到最高并且随时间变化不再降低,而ROS含量在2 hpi显著升高,6 hpi达到最高并且随时间变化逐渐降低。与不刺激组相比,活子孢子刺激HD11细胞IL-1β和iNOS mRNA表达水平在6 hpi显著增加(P<0.05),IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TNF-α、iNOS和IRF7在10 hpi显著增加(P<0.05)。与不刺激组相比,热灭活子孢子刺激后HD11细胞IL-6和IFN-γmRNA表达水平在4 hpi显著增加(P<0.05),IL-1、TNF-α和iNOS在6 hpi显著增加(P<0.05),而IL-10、IL-12和IRF7在10 hpi显著增加(P<0.05)。表明巨噬细胞抗球虫的免疫反应中,细胞因子的显著上调可能与机体抑制球虫发育增殖或清除球虫感染有关。
- 蒋保余王文青曲自刚肖星星杨顺利刘保红曾巧英蔡建平
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫细胞因子抗感染免疫
- 牛朊蛋白在CHO/dhfr-细胞中的稳定表达被引量：4
- 2009年
- 从T载体上得到的目的基因和dhfr共扩增基因真核表达载体构建了pCI-PrP102。纯化后的重组质粒通过脂质体转染CHO/dhfr-细胞,经MTX加压筛选获得稳定表达的细胞株,间接免疫荧光试验检测到目的蛋白的表达。
- 丁耀忠张杰刘永生陈豪泰曾巧英马丽娜马艳平杨生海殷宏
- 不同比例稀释液对精子冷冻前后死活百分率的影响
- 2015年
- 为研究生产中需要的最适合冷冻精液稀释液的添加比例,本试验观察了不同比例稀释液对精子冷冻前后死活百分率的影响;试验结果表明:冷冻前各试验组和对照组精子死活百分率差异不显著(P>0.05);试验Ⅰ组和试验Ⅱ组冷冻后精子死活百分率显著地高于试验Ⅲ组、试验Ⅳ组和对照组(P<0.05)。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组两个比例的稀释液对精子冷冻保存的效果最好。
- 邴谦曾巧英
- 关键词：稀释液冷冻精液
- 绵羊痘病毒A11R基因的优化表达及抗体间接ELISA方法的建立
- 2022年
- 本研究旨在对免疫原性目的蛋白基因A11R优化表达的基础上建立羊痘血清学检测方法,为羊痘防控提供技术支撑。绵羊痘病毒A11R基因经密码子优化后合成目的基因,连入pET-28a(+)载体,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌,pET28a-A11R经鉴定后进行诱导表达。结果显示,经密码子优化后的A11R蛋白的表达量显著增加,更易从转化的大肠杆菌裂解上清液和经过复性的包涵体中大量纯化获得。将该蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,建立检测羊痘抗体的间接ELISA方法,并进行特异性和敏感性试验,用该方法与商业化试剂盒对临床样品进行检测。结果显示,A11R蛋白的最佳包被剂量为0.5μg/孔,待检血清最适稀释度为1∶100,家兔抗羊Ig G最适稀释度为1∶20 000。用建立的间接ELISA方法检测小反刍兽疫、羊口疮、口蹄疫的阳性血清,结果均为阴性,无交叉反应,具有良好的特异性。当羊痘阳性血清稀释到1∶1 600时抗体检测仍为阳性,具有较高的敏感性。用该ELISA方法与商业化试剂盒检测临床样品,符合率为98.71%,具有良好的一致性。上述结果表明,本研究建立了基于A11R蛋白的羊痘血清学免疫诊断方法,同时表明了密码子偏好性的优化可显著提高蛋白表达量。
- 朱学亮朱学亮赵志荀蒙学莲
- 关键词：绵羊痘病毒密码子优化ELISA方法
- 猪瘟病毒E0基因检测方法的建立及甘肃河西地区E0基因特征分析
- 2016年
- 为给甘肃地区猪瘟的防控和检测提供参考资料，本研究根据典型猪瘟病毒的E0基因设计引物，建立猪瘟RT—PCR检测方法，并评估其特异性，同时用该方法检测甘肃河西地区猪瘟的流行状况，通过基因测序分析E0基因序列特征。建立的猪瘟RT—PCR检测方法对猪瘟病毒cDNA检测为阳性，而对其他病毒cDNA检测为阴性，甘肃省河西地区猪瘟流行广泛存在，流行率为26．92％，且流行毒株核苷酸同源性为80．2％～96．3％；氨基酸同源性为73．0％～95．4％。结果表明本研究建立的猪瘟RT—PCR检测方法特异性强，且甘肃河西地区猪瘟的流行毒株E0基因进化高度保守。
- 陈绍博曾巧英
- 关键词：猪瘟EO
- 小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗的构建及免疫原性被引量：4
- 2013年
- 为了寻求一种有效的疫苗用于预防小反刍兽疫(PPR),运用RT-PCR方法扩增PPRV的F基因并将其克隆到pCAGGS载体中,构建了真核表达质粒pCAGGS-F。将构建的重组质粒转染哺乳动物细胞上进行瞬时表达,通过Western-blotting、间接免疫荧光检测证实F蛋白得到了高效表达。将重组质粒作为DNA疫苗,通过脚掌皮内注射免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA检测抗体的产生情况。结果显示,pCAGGS-F重组质粒在有无佐剂CpG的情况下均能诱导小鼠产生较高的抗体水平。
- 杨香芳窦永喜王秋霞骆学农曾巧英朱启运才学鹏
- 关键词：小反刍兽疫病毒DNA疫苗F基因免疫印迹间接免疫荧光
