李俊玲
- 作品数：15 被引量：33H指数：3
- 供职机构：山东省医药生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目国家高技术研究发展计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 重组人成骨蛋白－1的“一步纯化”法
- 本发明公开了一种基因工程菌所表达的重组人成骨蛋白－1的“一步纯化”法，其方法是，利用获得的人成骨蛋白－1的成熟肽基因片段，通过DNA重组技术构建表达质粒，转化工程菌，发酵收集，将工程菌破碎，包涵体洗涤，重组蛋白变性，一步...
- 王世立韩金祥车睛张更林赵甜娜王国栋孙杰李俊玲
- 文献传递
- 肌源干细胞研究进展被引量：5
- 2007年
- 目前已证实肌肉是具有多向分化潜能的成体干细胞的一个储存库。研究者认为骨骼肌中至少有两种干细胞:肌卫星细胞(muscle satellite cells)和肌源干细胞(muscle-derived stem cells,MDSCs),并且使用几种方法从肌肉中分离获得不同类群的MDSCs。研究发现分离这些细胞的方法影响干细胞的特征。对MDSCs的行为、生物学特征、分离、分化及其在治疗组织器官修复和再生中应用的可能性等作一概括介绍。
- 李俊玲王世立韩金祥
- 关键词：分化
- 重组人成骨蛋白-1复性条件的优化
- 2007年
- 目的优化重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)包涵体蛋白的复性条件。方法将表达rhOP-1的大肠杆菌菌体在冰浴下超声裂解,分离提取包涵体,用8mol/L尿素溶解,纯化后进行梯度透析复性。利用TotalLab软件分析目的蛋白二聚体的含量,用体内法和体外法测定其生物学活性。结果经纯化后,目的蛋白纯度达97%以上。最佳复性条件为4℃,pH9.0,蛋白浓度为0.4～0.8mg/ml,尿素浓度为2mol/L,L-Arg浓度为0.4mol/L;目的蛋白复性率达75%以上,复性后蛋白具有较高的生物学活性。结论已确定了rhOP-1包涵体梯度透析复性的最佳条件。
- 李俊玲王世立韩金祥王国栋赵甜娜
- 关键词：包涵体复性
- 重组人成骨蛋白-1（rhOP-1）的复性
- 目的优化大肠杆菌表达的重组人成骨蛋白-1（rhOP-1）包涵体蛋白的复性的条件。方法将表达rhOP- 1的E．coli菌体冰浴下超声裂解,分离提取包涵体,用8 mol／L尿素溶解、纯化后进行梯度透析复性并利用TotolL...
- 李俊玲王世立韩金祥王国栋孙杰
- 关键词：包涵体复性
- 文献传递
- 重组人成骨蛋白-1的纯化及其生物学活性研究被引量：1
- 2006年
- 目的 获得高纯度的重组人成骨蛋白-1（rhOP-1），探讨大肠杆菌表达rhOP-1的生物学活性。方法 表达rhOP-1工程菌经发酵后，裂菌、提取包涵体，层析法纯化蛋白并逐步降低尿素浓度透析复性。采用改良MTT法检测rhOP-1对NIH3T3细胞增殖和对硝基苯酚法（PNPP）检测rhOP-1对细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的影响，同时在体内通过小鼠肌袋埋植实验测定rhOP-1活性。结果 经纯化的rhOP-1纯度可达98％。体外rhOP-1浓度在0．06～6μg／ml可明显促进细胞生长和ALP活性；体内rhOP-1埋植剂植入小鼠肌间隙2周后，可明显提高体内钙含量，且成骨趋势明显。结论 原核表达的rhOP-1具有良好的生物学活性。
- 王国栋王世立韩金祥孙杰车婧赵甜娜李俊玲
- 关键词：纯化细胞增殖碱性磷酸酶生物学活性
- 南极磷虾对大鼠骨质疏松模型的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察不同剂量南极磷虾粉及其与钙联合对骨质疏松模型大鼠的作用。方法将大鼠随机分为10组,即虾粉低、中、高剂量组、钙组、联合低、中、高剂量组、氟化钠组、假手术组、模型对照组,每组10只,通过切除双侧卵巢建立骨质疏松模型,假手术组仅切除卵巢附近部分脂肪组织。各实验组分别灌胃低、中、高剂量虾粉、钙、低、中、高剂量虾粉+钙、氟化钠,假手术组与模型对照组正常饮食。12周后,经腹动脉取血,分离血清,检测钙离子浓度及碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性;取股骨观察骨密度及生物力学差异,并检测骨灰分含量;取胫骨检测骨氟含量。结果虾粉低、中、高剂量组及联合低、中、高剂量组大鼠血钙浓度随虾粉剂量的增加逐渐降低,虾粉高剂量组与模型对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而联合低、中、高剂量组大鼠血钙浓度高于模型对照组;虾粉低、中、高剂量组ALP活性均高于模型对照组(P<0.05),且随着虾粉剂量的增加,ALP活性增强。联合低、中、高剂量组大鼠骨密度均高于模型对照组(P均<0.05),且优于低、中、高剂量虾粉组;与模型对照组相比,虾粉低剂量组及联合中、高剂量组均可明显增加骨最大力学载荷值(P均<0.05);与模型对照组相比,低、中、高剂量虾粉组随虾粉剂量增加骨氟含量增多,与钙联合应用后,降低了骨氟含量(P均<0.01),联合低、中、高剂量组与相同剂量的虾粉组相比,骨氟含量均降低;虾粉低、中、高剂量组与模型对照组相比,骨灰分含量升高(P均>0.05)。结论使用虾粉治疗骨质疏松时,低剂量效果最佳;若虾粉与钙联合治疗,中剂量虾粉加钙改善骨质疏松效果最佳。
- 蔡维望张俊忠佟加贝成航葛鲁娜李俊玲王世立
- 关键词：南极磷虾骨质疏松氟
- 一种富集和提取成体干细胞的方法
- 本发明提供一种从人或动物体内提取和富集成体干细胞的方法，即将一种生理上可接受的、多孔的三维组织工程材料埋植到人或动物体内，使成体干细胞在材料中富集，然后从材料中分离得到干细胞。纯化并增殖捕获的干细胞后，可实现自体移植。
- 王世立韩金祥丁宁李俊玲
- 文献传递
- 尿促性素的提取及其生物活性研究
- 2018年
- 建立人绝经期促性腺激素(HMG)提取及初步纯化工艺,提取不同地区绝经期妇女尿液中HMG成分,进行免疫效价和生物活性测定,以苏木精-伊红染色法观察大鼠卵巢经HMG中间体注射后的改变,比较不同地区原尿提取的HMG中间体的质量;以高岭土吸附,二级丙酮提纯得到HMG中间体,采用酶联免疫吸附测定试剂盒测定卵泡刺激素(FSH)的免疫效价,生物测定法测定FSH生物活性。结果发现,采自临沂、济宁、济南、泰安、德州5地的样品的HMG中间体免疫效价分别为0.92、1.06、1.57、1.08、0.9 IU/mg,生物活性分别为1.02、0.94、1.21、0.77、0.76 IU/mg;经HMG中间体注射后,大鼠卵泡体积、质量均变大,且随剂量增加更明显;相比传统方法,本文中提取的HMG中间体活性有显著提高,采自济南地区的样品的HMG中间体生物活性最高,临沂、济宁两地的次之;同时,除临沂外,其他地区样品的HMG中间体生物活性均低于免疫效价。
- 张夫永李俊玲李俊玲贺芳贺芳
- 关键词：人绝经期促性腺激素卵泡刺激素免疫效价生物活性
- 南极磷虾油酶解法提取工艺研究被引量：14
- 2015年
- 以复合蛋白酶为工具酶,研究采用酶解法从南极磷虾中提取油脂。采用单因素实验研究酶用量、酶解温度和酶解时间对南极磷虾油提取率的影响。在单因素实验基础上,采用响应面法进行工艺优化,得到最佳酶解条件为:中性环境,酶用量0.13%,酶解温度43.8℃,酶解时间4.9 h;在此条件下,南极磷虾油提取率为96.06%。所得南极磷虾油磷脂含量为28.7%,虾青素含量为150mg/kg,DHA含量为8.99%,EPA含量为16.90%。
- 徐晓斌李俊玲杨阳李颖王世立
- 关键词：复合蛋白酶酶解磷脂虾青素多不饱和脂肪酸
- 重组人骨靶向干扰素γ的骨靶向性和对巨噬细胞向破骨细胞分化的影响
- 2020年
- 目的对重组人骨靶向干扰素γ(rhIFNγ-D10)进行体外骨靶向性和促进巨噬细胞向破骨细胞分化的活性分析。方法采用羟基磷灰石体外结合实验分析钙亲和力,表征目的蛋白靶向骨组织能力。分别测定重组人骨靶向干扰素γ(rhIFNγ-D10)和非骨靶向性重组人干扰素γ(rhIFNγ)体外结合羟基磷灰石的能力并加以比较,分析天冬氨酸寡肽对干扰素γ骨靶向性的影响。用RANKL、RANKL+rhIFNγ-D10、RANKL+rhIFNγ、rhIFNγ-D10和rhIFNγ分别诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法评价rhIFNγ-D10对破骨细胞分化形成的影响。结果rhIFNγ-D10体外结合羟基磷灰石的能力明显高于rhIFNγ,说明天冬氨酸寡肽有助于将干扰素γ靶向骨组织。与RANKL对照组相比,RANKL+rhIFNγ-D10组和RANKL+rhIFNγ组破骨细胞分化染色细胞明显减少,说明在RANKL诱导破骨细胞分化条件下,rhIFNγ-D10和rhIFNγ对破骨细胞分化有抑制作用。结论采用大肠杆菌表达的rhIFNγ-D10具有骨靶向性,但未显示预期的促进小鼠巨噬细胞向破骨细胞分化的作用,相反表现出一定的抑制作用,其分子机制有待进一步研究。
- 王志宇曹广祥付加芳宗工理李俊玲张佩佩王世立
- 关键词：干扰素Γ破骨细胞
