李元
- 作品数：106 被引量：179H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国医学科学院基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 一种IL-4R拮抗剂以及产生所述IL-4R拮抗剂的微生物
- 本发明涉及一种式(I)所示的新型白细胞介素4受体(IL-4R)的拮抗剂，以及含有所述拮抗剂的药物组合物。本发明还涉及所述白细胞介素4受体(IL-4R)的拮抗剂用于制备治疗哮喘或肿瘤的药物的用途。本发明也涉及产生式(I)所...
- 李元吴剑波王柯郭连宏张洋
- 文献传递
- 人GM－CSF基因在昆虫细胞中表达的研究被引量：2
- 1995年
- 本工作构建的昆虫表达重组体ｐＡＣ６１０－ＧＭＴ，是在ＡｃＭＮＰＶ的Ｐｏｌｙｈｅｄｒｉｎ启动子控制下，表达去除了信号肽编码顺序的人ＧＭ－ＣＳＦ基因（ｃＤＮＡ）的转染载体。它与野生ＡｃＭＮＰＶ病毒ＤＮＡ共转染Ｓｆ２１细胞，经过筛选得到纯化的可表达人ＧＭ－ＣＳＦ的重组病毒株ｖＡｃＧＭＴ。其感染细胞总ＲＮＡ的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析结果表明，重组病毒在ｍＲＮＡ水平有人ＧＭ－ＣＳＰ特异性表达，其表达水平在感染后４８ｈ时达高峰，７２ｈ未见明显下降。感染细胞裂解物的Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ分析和活性测定也证实其蛋白水平的表达，并有人ＧＭ－ＣＳＦ的生物学活性。
- 李江陈卫东贾佩臣何平陈松森李晓平李元
- 关键词：GM-CSF昆虫杆状病毒
- 丁酰苷菌素生物合成酶基因的分子克隆Ⅰ.重组质粒No.2和No.11的构建及其性质
- 1989年
- 环状芽孢杆菌B.circulans NRRL-B 3312是丁酰苷菌素的产生菌。用鸟枪法克隆其抗生素生物合成关键酶——α-羟基-γ-氨丁酰酰化酶基因。用EcoR Ⅰ分别酶切其染色体DNA和pUB110质粒,经T4-DNA连接酶连接,转化至枯草芽孢杆菌B.subtilis 168的感受态细胞,以卡那霉素抗性标记挑选转化子。其中,No.2和No.11重组质粒对卡那霉素和新霉素的抗性较pUB110有所提高.构建了这两种重组质粒的限制性内切酶图谱。分子杂交实验确证,两个重组质粒DNA中均有B.circulans NRRL-B 3312的同源DNA序列。
- 李元石莲英刘伯英王硕昌
- 关键词：质粒
- 生米卡链霉菌丙酰化酶基因定位及其核苷酸序列测定被引量：1
- 1993年
- 我们已往的工作已经确定在重组质粒pIJM9中,生米卡链霉菌来源的4.16kb插入DNA片段带有丙酰化酶基因,为了进一步确定该基因在4.16kb插入片段中的位置,我们以BamHI对pIJM9进行酶切,在此基础上进行缺失重组亚克隆,在所获得的转化子中,No.5转化子含重组质粒pIJM95,分子量为5.0kb,插入DNA片段为0.53kb。以No.5转化子对螺旋霉素进行生物转化实验,其转化产物经薄层层析,生物显迹,高压液相色谱及质谱(FAB)分析表明,与标准丙酰螺旋霉素一致,这说明No.5转化子具有将螺旋霉素生物转化为丙酰螺旋霉素的能力,丙酰化酶基因位于重组质粒pIJM95 0.53kb插入DNA片段上。 DNA序列测定结果表明,该片段G+C含量为68.2%,70多种限制性内切酶具有酶切位点。从No.54至No.393核苷酸有一开放阅读框架,编码一个122个氨基酸的多肽,起始密码子为ATG,终止密码子为TGA。
- 崔丽微李元刘伯英
- 关键词：DNA
- 人肿瘤坏死因子基因在变铅青链霉菌中的克隆与表达
- 1993年
- 以质粒pIJ486为载体,将来源于质粒pHT1的肿瘤坏死因子(TNF-α)cDNA克隆至变铅青链霉菌(Streptomyces lividans TK54),以新毒素(30μg/ml)为选择标记,获得了数百转化子,实验表明No.7转化子S.lividans TK54-HT所含重组质粒pIJT7已克隆有TNFcDNA。L929细胞毒实验结果表明该转化子TNF表达量可达10^(?)活性单位/升以上,中和实验确证其表达产物为人TNF-α。 SDS—PAGE表明克隆菌株裂解上清液于17000遭尔顿处有明显蛋白带,与TNF-α分子量相当,这表明TNF基因在变铅青链霉菌中获得了成功的克隆与表达。
- 刘菊萍李元刘伯英
- 关键词：变铅青链霉菌肿瘤坏死因子基因
- 链霉菌sp.139编码糖基转移酶的Ste7基因和编码天冬酰胺合成酶Ste10基因在依博素生物合成中的功能研究
- 链霉菌是在工业上常用的微生物之一,能产生大量的次级代谢物,主要有抗生素,酶抑制剂,药物激动剂和除草剂等,然而有关链霉菌多糖产生、性质及生物合成研究除本实验室外国内外尚未见报道.本实验室利用重组的Ⅰ型白细胞介素1可溶性受体...
- 白利平李元
- 关键词：链霉菌糖基转移酶
- 文献传递
- ste3与ste4基因双敲除对依博素生物合成的影响
- 2015年
- 目的:以往研究已确定链霉菌胞外多糖依博素的生物合成基因簇(ste),生物信息学分析基因簇中ste3和ste4编码糖转运相关膜蛋白,现研究分析ste3和ste4与依博素生物合成的相关性。方法:通过基因同源重组双交换获得ste3和ste4双基因缺失突变株,经Southern杂交验证后,对该菌株进行了基因互补研究。分离提取各菌株发酵液的胞外多糖,并计算产量。结果:双基因缺失株产生的胞外多糖依博素与野生株相比,产量从319mg/L降低至153mg/L,平均产量降低52%以上;基因互补后,依博素平均产量上升到299mg/L,基本恢复至野生株依博素产量水平。结论:本研究首次阐明了编码糖转运相关膜蛋白基因ste3和ste4在依博素的生物合成中起重要作用,为研究链霉菌139的初级代谢和次级代谢之间的相关性奠定了基础。
- 白利平姜蓉郭连宏张洋李元
- 关键词：链霉菌
- 以炎症相关细胞因子受体为靶位的受体拮抗剂筛选模型构建及受体拮抗剂的研究
- 李元吴剑波王玲燕陈晶张洋郭连宏姜蓉李宝义
- 1994年7月-2004年9月，由国家自然科学基金6项、国家高技术研究发展计划“863”1项、科技部科研院所开发研究专项资金1项、国家重点科技项目计划专题基金等9项资助，进行了研究。炎症反应和免疫应答密切交织，参与炎症反...
- 关键词：
- 关键词：炎症细胞因子受体拮抗剂白细胞介素
- 链霉菌质粒pSGL1最小复制子序列测定及分析被引量：1
- 1999年
- 质粒ｐＳＧＬ１（７．４ｋｂ）是从球孢链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇｌｏｂｉｓｐｏｒｕｓ）中分离得到的一个高拷贝质粒，已证明其最小复制子位于Ｓａｕ３ＡＩ酶切的２０ｋｂ片段上。对该片段进行亚克隆，测序后数据表明该片段是一个新序列。仅有一个开放阅读框架（ＯＲＦＲ）位于最小复制子中，推测其编码的蛋白质含有滚环复制质粒复制酶的特定序列。
- 张华洪斌李元
- 关键词：质粒链霉菌
- 黑曲霉蛋白酶缺陷突变体的分离和鉴定被引量：10
- 2000年
- 对黑曲霉 (Aspergillusniger) 3.795进行紫外诱变和筛选 ,获得了胞外蛋白酶缺失的菌株。其中突变株 3 795 1、3 795 1 2 3和 3 795 1 30的生长特性与原株基本相同 ,胞外蛋白酶的活性明显低于原株 ,葡萄糖淀粉酶的活性与原株基本相同。突变株 3 795 1 2 3和3 795 1 30的胞外蛋白酶活性分别为原株的 5 4%和 8 4% ,可作为外源基因高效分泌表达的宿主菌。
- 洪斌张洋李元
- 关键词：黑曲霉胞外蛋白酶
