李守峰
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省社会发展科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 扭曲肉芝甲酯对人结肠癌LoVo细胞生长的抑制作用及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨扭曲肉芝甲酯抗结肠癌LoVo细胞增殖活性及其机制。方法将LoVo细胞随机分为对照组和处理组（10、30、50umol／L3个亚组）。对扭曲肉芝甲酯处理后LoVo细胞凋亡率、细胞周期、凋亡蛋白表达的改变进行定量分析。结果经10、30、50umol／L扭曲肉芝甲酯处理24h后，LoVo细胞凋亡率分别为（2．32±0．93）％、（11．03±0．14）％和（16．29±1．98）％，对照组凋亡率为（2．09±0．97）％，而50umol／L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为（2．67±0．97）％、（5．08±1．03）％、（5．04±0．83）％和（13．50±1．16）％（P〈0．05）。荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变；扭曲肉芝甲酯在0、10、50及100umoL／L时将LoVo细胞抑制在G2／M期（9．53±3．97）％、（10．26±1．89）％、（11．36±2．56）％、（15．39±1．56）％（P〈0．05），该期的比例逐渐增高；Westernblot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌kVo细胞的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-8、Caspase-3表达升高。结论扭曲肉芝甲酯以浓度依赖性和时间依赖性的方式抑制结肠癌LoVo细胞增殖，抑制细胞周期G2／M期，通过Caspase-8／Caspase-3来诱导细胞凋亡。
- 李守峰刘璐伍衡来伟曾育杰许鹤洋褚忠华
- 关键词：结肠癌细胞增殖脱噬作用
- 小分子干扰RNA干扰RhoGDI2基因表达对结肠癌细胞凋亡迁移的影响及其机制被引量：4
- 2012年
- 目的探讨小分子干扰RNA（siRNA）干扰RhoGD12基因的表达对结肠癌细胞株凋亡侵袭的影响及其机制。方法运用Westernblot和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测结肠癌细胞株LoVo、SW480、CaC02、DLD1、RKO、HT-29的RhoGD12表达。设计及合成RhoGD12 siRNA干扰序列，通过Lipofectamine“2000转染到筛选细胞，细胞分为干扰组和空白对照、阴性对照组；膜联蛋白V／碘化丙锭（Annexin V／PI）双染流式细胞仪检测细胞凋亡率，细胞划痕试验和Transwell实验检测细胞迁移能力，Westemblot检测上皮问质转化（EMT）相关E一钙黏蛋白（E—cadherin）／波形蛋白（Vimentin）、Snail转录因子表达水平。结果野生型人结肠癌细胞株RhoGDl2表达量由高到低依次是DLD1、HT29、RKO、CaC02、LoVo、SW480；LoVo细胞siRNA干扰后RhoGD12表达抑制率大于70％；干扰组、阴性对照组、空白对照组细胞凋亡率分别是（2．67±0．97）％、（2．45±0．74）％、（2．35±0．43）％（P〉0．05）；干扰组及对照组的细胞划痕24h愈合度分别是90％、50％（P〈0．05）；Tran．swell实验24h迁移细胞数目：干扰组为55．7±9．5，阴性对照组和空白对照组分别为25．1±8．6、32．3±12．9（P〈0．05）；siRNA后结肠癌细胞E—cadherin蛋白表达下调，Vimentin蛋白、Snail转录因子表达上调。结论结肠癌RhoGD12基因沉默可能通过引起EMT促进细胞迁移。
- 李守峰刘璐伍衡许鹤洋来伟褚忠华
- 关键词：小分子干扰RNA结肠癌上皮间质转化细胞迁移
- 结肠癌组织标本Rho解离抑制因子2的表达及其与临床病理的关系被引量：2
- 2012年
- 目的探讨结肠癌Rho解离抑制因子2（RhoGDl2）基因的表达及其与临床病理的关系。方法运用组织芯片技术、免疫组织化学法检测75例结肠癌患者原发癌灶和癌旁正常结肠组织的RhoGDl2的表达及其与相应结肠癌临床病理参数之间的关系。运用Westernblot和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测18例配对结肠腺癌原发灶组织和癌旁5cm正常结肠组织的RhoGDl2的表达。结果RhoGDl2阳性率在结肠癌原发癌灶和癌旁正常组织分别为73．33％和33．33％（P〈0．05）；RhoGDl2阳性率与临床TNM分期相关（P〈0．01），与原发灶T分期范围相关（P〈0．05），与淋巴结N分期、远处转移M无明显相关（P〉0．05）。18例结肠癌RhoGDl2Westernblot灰度值高于正常组织的4．8倍（P〈0．05）。Real-timePCR结果显示癌灶组RhoGDl2相对表达量高于癌旁对照组（P〈0．05）；RhoGDl2表达阳性率与临床TNM分期明显相关（P〈0．01），与原发灶T分期明显相关（P〈0．05）。结论RhoGDl2在结肠癌中表达上调，与临床TNM分期明显相关。
- 李守峰刘璐伍衡曾育杰许鹤洋来伟褚忠华
- 关键词：结肠癌组织芯片
- 扭曲肉芝甲酯对人结肠癌细胞侵袭、迁移的抑制作用
- 2015年
- 目的 观察扭曲肉芝甲酯对人结肠癌细胞侵袭、迁移的抑制作用.方法 随机将LoVo细胞分为对照组和处理组（10、30、50 μmol/L）,扭曲肉芝甲酯处理LoVo细胞后对凋亡率、迁移能力、凋亡信号通路蛋白改变进行测定.结果 经10、30、50 μmol/L扭曲肉芝甲酯处理24 h后,LoVo细胞凋亡率分别为（2.30±0.93）％、（11.03±0.14）％和（16.29±1.98）％,对照组凋亡率为（2.09±0.97）％,而50μmol/L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为（2.67±0.97）％、（5.08±1.03）％、（5.04±0.83）％和（13.50±1.16）％（P＜0.05）;利用Transwell小室检测提示扭曲肉芝甲酯可抑制结肠癌细胞的迁移、侵袭（P＜0.05）.Western blot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌细胞磷酸化的c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38蛋白升高（P＜0.05）.结论 扭曲肉芝甲酯通过激活凋亡信号通路丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）,从而诱导结肠癌细胞的凋亡,并进一步抑制结肠癌细胞的迁移、侵袭.
- 蓝球生曾育杰许鹤洋张旸李守峰褚忠华
- 关键词：结直肠癌细胞迁移脱噬作用
- 蛋白质组学方法分析PRL-3功能相关蛋白被引量：6
- 2011年
- 目的蛋白质组学方法分析转染肝再生磷酸酶-3（PRL-3）后结肠癌细胞kVo的蛋白表达改变。方法构建绿色荧光蛋白载体PAcGFP—C3-PRL-3并转染至结肠癌细胞LoVo中，获得稳定表达GFP—PRL-3的结肠癌细胞LoVo—PRL-3。Westernblot检测转染后细胞的PRL-3表达。采用双向凝胶电泳（2-DE）分离LoVo—PRL-3细胞及转染空载体PAcGFP—C3的LoVo-Control细胞总蛋白，从中选取差异表达蛋白质点，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-TOF-MS）鉴定差异表达的蛋白质。结果Westernblot结果显示PRL-3在LoVo—PRL-3细胞中高表达，而未检测到在LoVo—Control细胞中表达。通过双向凝胶电泳图谱分析发现20个差异蛋白质斑点，质谱成功鉴定出17种蛋白。与LoVo—Control细胞比较，10种蛋白在LoVo-PRL-3细胞中高表达，而7种蛋白在 LoVo—PRL-3细胞中表达降低。结论成功鉴定出PRL-3功能相关蛋白，为进一步研究PRL-3促进结直肠癌转移机制奠定基础。
- 关玉峰刘璐伍衡来伟李守峰褚忠华
- 关键词：结肠癌蛋白质组学肝再生磷酸酶-3
- 受翻译调节的肿瘤蛋白在PRL-3促进结肠癌转移中的作用被引量：5
- 2011年
- 目的:研究受翻译调节的肿瘤蛋白(TCTP)在肝再生磷酸酶-3(PRL-3)促进结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。方法:构建载体pAcGFP-C3-PRL-3及pAcGFP-C3并分别转染至结肠癌LoVo细胞中,获得稳定表达PRL-3的LoVo-PRL-3细胞及对照细胞LoVo-control。Western blotting及real-time PCR检测2种细胞PRL-3及TCTP表达。设计并合成特异性干扰TCTP mRNA的siRNA序列(TCTP-siRNA)和阴性对照序列(control-siRNA),并将siRNA瞬时转染至LoVo-PRL-3细胞。在转染siRNA后24 h、48 h和72 h,Western blot-ting及real-time PCR检测LoVo-PRL-3细胞TCTP表达。CCK8-8和Transwell方法检测LoVo-control、LoVo-PRL-3及转染TCTP-siRNA和转染control-siRNA的LoVo-PRL-3细胞间增殖、迁移和侵袭能力差异。结果:转染PRL-3可以显著上调LoVo细胞TCTP mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。TCTP-siRNA在转染后的24 h、48h和72 h可以有效抑制LoVo-PRL-3细胞TCTP mRNA表达(P<0.01),同样TCTP蛋白在转染后的48 h和72 h也显著受到抑制(P<0.01)。转染PRL-3能显著促进LoVo细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05),然而siRNA干扰抑制上调的TCTP表达后又能显著抑制LoVo-PRL-3细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论:PRL-3通过上调TCTP表达促进结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。用siRNA靶向抑制TCTP表达可能是预防和治疗结肠癌转移的有效手段。
- 褚忠华刘璐来伟李守峰曾育杰关玉峰
- 关键词：肝再生磷酸酶-3结肠肿瘤肿瘤转移
