目的探讨经腹腔联合应用阿加曲班和依达拉奉对脑出血大鼠神经损伤的影响。方法建立大鼠自体血脑出血模型,随机分为脑出血组、阿加曲班组、依达拉奉组、阿加曲班联合依达拉奉组,每组18只。阿加曲班组术后即刻和12 h分别经腹腔给予阿加曲班干预1次;依达拉奉组术后经腹腔注入依达拉奉,12 h 1次,连用3 d;阿加曲班联合依达拉奉组术后即刻和12 h分别经腹腔给予阿加曲班干预1次,术后12 h经腹腔注入依达拉奉,12 h 1次,连用3 d;脑出血组术后经腹腔注入生理盐水,12 h 1次,连用3 d。造模后及处死前进行神经功能缺损评分(NDS),处死后检测4组TUNEL阳性细胞数、Caspase-3免疫反应细胞数及脑组织水含量、血肿周围脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果阿加曲班组、依达拉奉组和阿加曲班联合依达拉奉组处死前NDS、TUNEL阳性细胞数、Caspase-3阳性细胞数、脑组织水含量、MDA含量均低于脑出血组,SOD活性高于脑出血组,且阿加曲班联合依达拉奉组上述指标改善情况优于阿加曲班组和依达拉奉组(P<0.05,P<0.01)。结论经腹腔应用阿加曲班或依达拉奉均可有效地减轻脑出血后的脑水肿、细胞凋亡性损伤以及自由基损伤,二者联合应用效果更佳。
为探究miR-124在胶质瘤细胞免疫逃逸中的作用及分子机制,qPCR法检测胶质瘤患者肿瘤组织及正常组织中miR-124表达量;ELISA和qPCR检测IL-2刺激下NK细胞系(NK-92)中IFN-γ和miR-124表达量;共培养NK细胞与胶质瘤U251细胞,细胞毒实验检测NK细胞中过表达miR-124对细胞毒性及IFN-γ水平的影响;生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀实验验证miR-124和信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)的靶向调控关系;Western blotting检测过表达和抑制miR-124表达对STAT3蛋白水平的影响;细胞毒实验检测共转染过表达pcDNA-STAT3载体对miR-124作用下NK细胞对U251细胞细胞毒性及IFN-γ水平的影响。结果显示,与正常组织相比,miR-124在患者胶质瘤组织中的表达量显著降低(P<0.05);与对照组相比,IFN-γ和miR-124在IL-2激活的NK-92细胞中表达量显著增加(P<0.05);miR-124过表达通过促进NK细胞分泌IFN-γ显著促进NK细胞细胞毒性;miR-124与STAT3存在直接靶向作用;过表达miR-124显著抑制IL-2作用下NK-92细胞STAT3蛋白水平,抑制miR-124表达则促进STAT3蛋白表达;转染pcDNA-STAT3可逆转过表达miR-124对NK细胞细胞毒性、IFN-γ分泌的影响。以上结果表明,miR-124通过靶向抑制STAT3抑制胶质瘤细胞U251免疫逃逸。
