李志敏
- 作品数:98 被引量:112H指数:6
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- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 重组大肠杆菌表达双功能谷胱甘肽合成酶的发酵工艺研究被引量:2
- 2013年
- 对重组表达双功能谷胱甘肽合成酶(GshF)的大肠杆菌进行了5L罐的发酵工艺探索,分别考察了不同培养基、诱导剂种类、诱导时机、诱导温度、补料流加碳源类型等对菌体生长、GshF蛋白表达及其酶活的影响。结果表明,采用葡萄糖进行补料流加,在优化工艺条件下,GshF表达量达到1.94g.L-1。
- 张松王德正李娓李志敏叶勤
- 关键词:发酵工艺蛋白表达
- 果糖和麦芽糖作为有氧碳源对大肠杆菌NZN111两阶段发酵中厌氧发酵的影响被引量:3
- 2011年
- 为了了解磷酸转移酶转运系统(PTS)依赖和非PTS依赖代谢的糖类对大肠杆菌生产琥珀酸的影响,进行了两阶段培养,有氧阶段采用PTS依赖型的果糖或非PTS依赖型的麦芽糖作为丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)和乳酸脱氢酶(LDH)双突变株NZN111的碳源,研究其对NZN111厌氧阶段代谢葡萄糖的影响。5 L罐发酵结果表明,以果糖和麦芽糖为碳源有氧培养的细胞恢复了在厌氧条件下快速代谢葡萄糖的能力,琥珀酸和丙酮酸成为主要代谢产物,最终琥珀酸得率分别为0.84和0.75 mol/mol,丙酮酸得率分别达到了0.65和0.83 mol/mol,琥珀酸和丙酮酸终浓度比分别为1.73∶1和1.21∶1。果糖和麦芽糖培养的NZN111与葡萄糖培养的菌体代谢的明显差异推测是cyclic AMP(cAMP)依赖型和非cAMP依赖型的分解代谢物阻遏调控这两种机制共同作用的结果。
- 吴辉李志敏叶勤
- 关键词:代谢调控
- 根癌农杆菌介导的VHb异源表达及其对里氏木霉的影响
- 2014年
- 里氏木霉是生产纤维素酶的重要菌株,在其浸没式发酵过程中,氧传递是重要影响因素。为了减轻溶氧的限制,本研究借助根癌农杆菌将透明颤菌血红蛋白基因vgb引入里氏木霉。qPCR结果表明,pki及gpd启动子均可以有效启动vgb在里氏木霉中的表达。进一步实验结果表明,在摇瓶培养中,供氧充足情况下野生菌和转化株的生长无明显差异,但是在静止培养条件下,氧气供应受限,转化菌株的干重是野生菌的17.8—25.5倍。
- 张倩李志敏叶勤
- 关键词:里氏木霉纤维素酶透明颤菌血红蛋白
- 有机酸对肺炎克雷伯杆菌厌氧代谢甘油的影响被引量:1
- 2011年
- 在肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的过程中,大量的副产物,特别是乳酸和乙醇等副产物的生成,导致1,3-丙二醇的浓度和得率下降。为了进一步了解有机酸加入后菌体的代谢情况,在菌体生长期同时加入柠檬酸、琥珀酸和延胡索酸三种有机酸的混合液,使其浓度达到3.8 mmol·L-1。5 L罐发酵结果显示,产物的生成发生显著变化。同时,发酵动力学分析表明,有机酸加入后,甘油的比消耗速率和1,3-丙二醇的比生成速率显著提高,而乳酸和乙醇的比生成速率则明显下降。进一步对甘油代谢过程中的碳流分配分析表明,有机酸加入后,甘油进入还原途径的碳流比例由0.45显著增加为0.62,氧化途径的碳流比例由0.53减为0.35。
- 薛学东李伟李志敏周利夏月兰叶勤
- 关键词:有机酸肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油
- 一种热稳定的双功能谷胱甘肽合成酶突变体及其应用
- 本发明公开一种双功能谷胱甘肽合成酶的突变体,所述突变体为将SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.1的氨基酸序列进行重组,和/或对重组体进行定点突变,获得如SEQ ID NO.3所示氨基酸序列或其突变体。本发明的优点...
- 李志敏崔向伟
- 文献传递
- 以乙酸为碳源生长菌体的两阶段培养生产L-半胱氨酸合成酶
- 2014年
- 假单胞菌F12能够将DL-2-氨基-△^2-噻唑啉4-羧酸(DL-2-amino-△^2-thiazoline-4-carboxylicacid,DL—ATC)转化为L-半胱氨酸。将该微生物转化过程分为以乙酸和氨为碳源和氮源的菌体生长阶段和利用DL—ATC诱导L-半胱氨酸合成酶产生阶段。考察了乙酸对菌体生长的影响以及菌体比生长速率对L-半胱氨酸合成酶诱导的影响。结果表明,当乙酸浓度大于4g/L时对菌体生长有显著抑制作用,乙酸的存在对L-半胱氨酸合成酶的诱导有抑制作用,菌体比生长速率较高时更有利于酶系的产生。在5L罐中进行的两阶段培养,最高体积酶活达到283U/mL,比优化前提高了150%,比分批培养提高了130%。
- 范翠丽李志敏叶勤
- 关键词:乙酸假单胞菌
- 一种嗜热核苷激酶突变体及其应用
- 本发明提供一种嗜热核苷激酶突变体,所述突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.1所示的野生型核苷激酶相比,在第153位,第156位,第175位,第220位,第221位,第238位,第241位和第248位的氨基酸进行单点突...
- 李志敏李宗霖
- 利用四碳二元酸发酵固定CO<Sub>2</Sub>的方法
- 本发明利用四碳二元酸发酵固定CO<Sub>2</Sub>的方法,包括:将具有四碳二元酸生产能力的微生物在具有气体吸入功能的发酵罐中厌氧发酵,在发酵罐内充入CO<Sub>2</Sub>,利用发酵罐内安装的搅拌器将发酵液上方...
- 叶勤李志敏吴辉
- 文献传递
- 四种酵母甘露聚糖合成与释放特性的比较被引量:1
- 2015年
- 比较了产朊假丝酵母、毕赤酵母、面包酵母和啤酒酵母培养过程中细胞壁甘露聚糖的合成与释放特性。结果表明:四种酵母的甘露聚糖合成均为生长偶联型;不同类型酵母的甘露聚糖合成能力差异显著(p<0.05),合成能力最强的啤酒酵母细胞壁甘露聚糖含量最高可达0.62g/L发酵液,而合成能力最弱的毕赤酵母仅为0.47g/L发酵液。四种酵母的甘露聚糖最大释放量均出现对数生长中期,并且不同类型酵母释放效率差异较大,最高值毕赤酵母甘露聚糖释放量达到了0.27g/L发酵液,最低值啤酒酵母仅有0.15g/L发酵液。乙醇显著刺激四种酵母的甘露聚糖释放(p<0.05),其中对产朊假丝酵母的影响最显著且在5%乙醇浓度下,与对照相比,其甘露聚糖释放量和释放率分别大幅提高了152%和120%。
- 刘金龙倪靖岳赵国群李志敏
- 关键词:酵母甘露聚糖
- 重组肺炎克雷伯菌发酵联产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇被引量:6
- 2014年
- 对表达了高效醛脱氢酶的重组肺炎克雷伯氏菌以甘油为底物生产3.羟基丙酸和1,3-丙二醇的过程进行优化,将发酵过程中补料阶段甘油浓度分别控制为0-10,10-20,20-30g/L,并分3次间歇性补加甘油.结果表明,发酵过程中补料阶段控制甘油浓度在20~30g/L,发酵26h得到47.20g/L3-羟基丙酸和43.90g/L1,3一丙二醇;而间歇性补加甘油产物得率最高,发酵26h时3.羟基丙酸和1,3-丙二醇相对甘油的得率分别为0.35和0.38mol/m01.3-羟基丙酸和1,3-丙二醇联产可实现辅因子烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的再生平衡,从而提高碳回收率.
- 李清黄艳娜李志敏叶勤
- 关键词:肺炎克雷伯氏菌羟基丙酸丙二醇