李振勇
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脐带Wharton's jelly间充质干细胞的分离培养及诱导分化为多巴胺能样神经元研究
- 一、概述
帕金森病(Parkinson’s Disease PD)是一种以锥体外系黑质多巴胺(Dopamine DA)能神经元进行性损害为主要病理表现的中枢神经系统退变性疾病。研究发现,当黑质DA神经元数量减少70...
- 李振勇
- 关键词：脐带间充质干细胞多巴胺能神经元诱导分化
- 文献传递
- 脐带间充质干细胞的分离培养及诱导分化为多巴胺能样神经元被引量：3
- 2011年
- 目的 探索脐带间充质干细胞（MSCs）的分离培养及将其诱导分化为多巴胺能神经元的方法。方法 分离脐带间充质组织，Ⅳ型胶原酶消化分离脐带MSCs．原代培养于含10％FBS的DMEM／F12培养基中，观察细胞形态并应用流式细胞仪检测细胞表面标志物和细胞周期，CCK8法绘制细胞生长曲线；采用二步法诱导分化P3代脐带MSCs，培养3、6、9d后终止诱导，应用免疫荧光染色和Westernblotting检测分化后细胞酪氨酸羟化酶（TH）、神经元特异性烯醇化酶ⅢSE）的表达。结果 分离培养的脐带MSCs形态呈相对均一的成纤维样细胞，平行排列或旋涡状生长。P3代细胞CD29、CD44、CD73、CD90、CDl05、CDl66表达阳性，而CD34、CD45、CDl9、CD31、HLA—DR表达阴性。对数生长期细胞倍增时间为48h，处于GO～G1期细胞占91．13％；诱导分化后细胞多数为两级．形态与神经元相似．免疫荧光染色检测结果显示诱导9d时细胞NSE、TH染色阳性率分别为19．5％和8．9％，Weston blotting检测结果显示诱导6d时细胞NSE表达明显，TH仅有弱表达，诱导9d时TH、NSE均表达明显。结论 脐带间充质组织中能分离出MSCs，且能分化成多巴胺能神经元。
- 李振勇李明卢国辉刘晓平张世忠
- 关键词：脐带间充质干细胞多巴胺能神经元
- 人胎盘底蜕膜间充质干细胞的分离培养及其多向分化潜能的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨人胎盘底蜕膜间充质干细胞(MSCs)体外生物学特性,并验证其多向分化潜能。方法通过酶消化和密度梯度离心法从人足月胎盘底蜕膜中获取MSCs,倒置显微镜下观察其形态变化和生长特点;CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期及表面抗原(CD29、CD44、CD73、CD90、CD34、CD45、CD14)的表达;在特定诱导条件下,使其向成骨、成脂、成软骨方向分化,鉴定其多向分化潜能。结果人足月胎盘底蜕膜中分离的MSCs呈克隆样生长,形态类似于骨髓MSCs,传代后细胞增殖迅速,细胞倍增时间为(2.21±0.21)d;大于70%的细胞处于静止期(G0/G1期),阳性表达CD29、CD44、CD73、CD90,不表达CD34、CD45、CD14;经诱导后茜素红染色、油红O染色和Alcian blue染色均呈阳性表现。结论胎盘底蜕膜中含有丰富的MSCs,易于体外分离培养,且具有多向分化潜能,有希望成为另一新颖的干细胞来源。
- 卢国辉张世忠陈强王雪峰卢凤飞刘剑李明李振勇
- 关键词：间充质干细胞多向分化
- 硬脑膜动静脉瘘介入栓塞治疗被引量：5
- 2011年
- 目的 探讨血管内栓塞治疗硬脑膜动静脉瘘（DAVF）的临床技巧与治疗效果.方法 收集珠江医院自2000年至2009年收治的DAVF患者50例,应用微导管技术,以各种不同材料在数字减影血管造影辅助下行血管内栓塞治疗,通过影像学检查及临床症状随访来评价临床疗效.结果术后即刻造影显示43例瘘口完全闭塞,6例瘘口绝大部份不显影,1例瘘口部分消失.随访6个月至7年,临床症状消失34例,症状明显缓解6例,复发7例,症状加重3例;无一例发生并发症.结论 应用微导管技术栓塞是治疗DAVF的有效手段,正确选择栓塞途径、材料和提高术者技术水平是治疗成功的关键.
- 刘晓平饶强李西锋何旭英段传志李振勇
- 关键词：硬脑膜动静脉瘘介入治疗
- pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体的构建及在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体并转染骨髓间充质干细胞(MSCs),观察其在MSCs内的表达。方法设计并合成SDF-1α基因引物,用RT-PCR法从小鼠平滑肌细胞中扩增出带有XhoI与EcoRI酶切位点的SDF-1α基因片段,将SDF-1α基因片段克隆到真核表达载体pDsRed2-N1上,酶切和测序鉴定。培养小鼠MSCs并Vimentin蛋白免疫荧光鉴定。通过脂质体将pDsRed2-N1-SDF-1α转染入小鼠MSCs。免疫荧光检测转染后的MSCs表达SDF-1α蛋白的情况。结果扩增出的基因片断大小与基因文库中已知的SDF-1α序列大小完全相符,酶切也得到目的基因片断,测序结果显示与已知的SDF-1α序列相同,成功构建pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体。培养的细胞经Vimentin蛋白免疫荧光检测为阳性,pDsRed2-N1-SDF-1α表达载体转染到MSCs,24h后细胞免疫荧光检测可见SDF-1α融合蛋白表达。结论pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体能够在小鼠MSCs中表达SDF-1α蛋白。
- 李明张世忠邹志浩郭燕舞卢凤飞姜晓丹寇盛斌卢国辉李振勇
- 关键词：骨髓间充质干细胞真核表达载体
