李继东
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- RAPD技术在我国食用菌研究中的应用被引量：14
- 2002年
- 食用菌 (edibleFungi)是一种大型真菌 ,营养丰富 ,具有极高的食用价值和药用价值 ,能预防和治疗包括一些肿瘤在内的多种疾病。本文主要就RAPD技术原理、在我国食用菌中的应用、及其研究进展做一综述展望。
- 李继东林跃鑫
- 关键词：RAPD技术食用菌研究杂交育种菌种鉴定基因定位
- 热带小奥德蘑深层发酵工艺研究被引量：3
- 2003年
- 通过对热带小奥德蘑深层发酵培养基碳源、氮源和无机盐的筛选 ,利用正交试验得到了优化发酵培养基配方 ,在此基础上对发酵条件进行了探索。试验结果表明 ,热带小奥德蘑的适宜发酵培养基为 :葡萄糖 3%,蛋白胨 0 .4 %,KH2 PO40 .1%,MgSO4·7H2 O 0 .2 %,VB10 .0 1%。其适宜发酵温度为 2 8℃ ,起始pH5 .0～ 6.0 ,摇瓶装量 60mL 2 5 0mL ,接种量 10 %。
- 李继东林跃鑫
- 关键词：深层发酵发酵工艺培养基配方
- 重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在毕赤酵母中的表达、纯化及生物活性研究
- 该论文研究了重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)的毕赤酵母发酵工艺优化、蛋白纯化工艺及生物活性分析,并利用生物软件和Inte...
- 李继东
- 关键词：蛋白纯化凋亡生物活性毕赤酵母
- 文献传递
- 心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用被引量：5
- 2003年
- 目的 :观察小分子多肽类物质心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用。方法 :建立培养心肌细胞阿霉素 (ADM)损伤模型 ,观察心肌肽素对心肌细胞肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)及线粒体脱氢酶活性的影响 ,以荧光染料Fura- 2 -AM定量测定细胞内游离Ca2 + 浓度。结果 :心肌肽素可剂量依赖性降低细胞培养液中CPK和LDH活性及对抗细胞内线粒体脱氢酶活性下降 ,可剂量依赖性地降低培养心肌细胞 [Ca2 + ]i。结论 :心肌肽素对阿霉素损伤培养心肌细胞具有保护作用。
- 李茹冰付泳航万华印潘韵李继东李恕梁强孔祥平
- 关键词：心肌肽素阿霉素心肌钙
- 毕赤酵母工程菌高密度发酵肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的研究
- 2004年
- 目的研究重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)巴斯德毕赤酵母工程菌发酵工艺。方法首先用摇瓶对工程菌的甲醇诱导周期、甲醇浓度、pH进行研究 ,在此基础上 ,采用 5L发酵罐补料培养进行中试研究。结果人可溶性TRAIL巴斯德毕赤酵母菌在pH 6 .0、甲醇诱导浓度 1%的条件下诱导 96h ,目标蛋白质浓度最高 ,可达 72 .8mg/L。 5L发酵罐培养放大 ,可以达到 184mg/L。结论此发酵工艺可以较好地提高人可溶性TRAIL工程菌的分泌表达。
- 李继东林跃鑫李茹冰佟明华万华印孔祥平
- 关键词：毕赤酵母发酵
- Pichia酵母表达重组人可溶性TRAIL的纯化与生物活性被引量：5
- 2006年
- 目的分离纯化Pichia酵母表达的重组人可溶性TRAIL,并检测其生物活性。方法以Pichia酵母分泌型表达TRAIL,采用硫酸铵沉淀和柱层析纯化可溶性TRAIL蛋白。以SDSPAGE、ESIMS和Westernblot法鉴定其纯度及特异性。以细胞透射电镜、DNALadder和MTT法检测其诱导肿瘤细胞凋亡活性。结果目的蛋白以可溶形式存在,蛋白相对分子质量22000,纯化后纯度95%。Westernblot证实为TRAIL蛋白。电镜、DNALadder和MTT均证实其具有诱导肿瘤细胞凋亡活性。结论Pichia酵母表达rhsTRAIL可用柱层析法纯化,并具有诱导肿瘤细胞凋亡的生物活性。
- 李茹冰傅泳航李继东佟明华杨联萍孔祥平
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体生物活性
- 表达重组人可溶性TRAIL的毕氏酵母发酵工艺被引量：1
- 2005年
- 目的优化rhsTRAIL毕氏酵母工程菌在5L发酵罐中的发酵表达工艺参数。方法研究培养基种类、细胞密度、甘油含量、pH值、甲醇浓度、甲醇流加速率及诱导时间等参数对工程菌生长及目的蛋白表达的影响,并用电镜观察其诱导肿瘤细胞凋亡特征。结果在无机盐培养基中,按10%接种A600=8～12的种菌后,24h酵母菌增殖至A600=76;甘油含量为1%时,菌体生长速度快(A600=160);培养基pH值5.0,甲醇终浓度为1%时,诱导96h表达量最高达到120mg/L,并具有诱导肿瘤细胞凋亡特征。结论rhsTRAIL毕氏酵母的发酵工艺参数为无机盐培养基,pH值5.0,接种10%A600=8～12的种菌,甘油含量1%,甲醇终浓度1%,诱导96h。
- 付泳航李茹冰佟明华李继东孔祥平
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体发酵毕氏酵母发酵工艺TRAIL培养基种类肿瘤细胞凋亡
