李郁
- 作品数：43 被引量：77H指数：4
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 抗SARS-CoV人源Fab抗体的表达及鉴定
- 2006年
- 为进一步研究抗SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)的中和抗体2g7,对其进行了原核表达,将2g7转入琥珀突变的非抑制性菌株(SupE-)的大肠杆菌Top10F'中进行可溶性表达。用HPLC纯化后,SDA-PAGE显示2g7的轻重链均存在,ELISA,Westernblot检测显示2g7能与SARS-CoV的S1蛋白结合。BIAcore测定其与抗原的亲和力为2.67×10-8mol。竞争ELISA显示该抗体能与SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)结合并阻断该蛋白与其受体ACE2的结合。实验结果表明:利用免疫噬菌体抗体库能在小库容的情况下筛选获得高亲和性的人源抗体,并可以在大肠杆菌中获得高效表达,这一实验结果为有效性地防治病毒性疾病提供了思路。
- 李郁陈江浩包国强张思河宋斐谢丽杨红
- 关键词：刺突蛋白噬菌体抗体FAB
- 靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G／CD147双模态单光子发射计算机断层成像-MRI探针的构建与表征被引量：1
- 2015年
- 目的探讨靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G／CD147双模态单光子发射计算机断层成像（SPECT）-MRI显像探针的构建方法，并研究其理化性质及体外生物特性。方法将超顺磁性氧化铁（SPIO）纳米颗粒与HAb18G／CD147的抗体片段HAb18F（ab’）：通过化学偶联法共价结合，得到复合物SPIO—HAb18F（ab’）：，采用Iodogen法对复合物进行^125I标记，制得双模态靶向探针^125I-SPIO—HAb18F（ab’）z。采用SPIO及^125I-HAb18F（ab’）2作对照。对分子探针进行表征，包括记录纳米粒子形态、大小、水合粒径；测定SPIO和^125I-SPIO—HAb18F（ab’）：溶液的T2横向弛豫率；测量^125-SPIO—HAb18F（ab’）：及^125I-HAb18F（ab’）：的放射化学纯度及脂水分配系数；分析不同Fe^2＋浓度（1、5、10、20、40μg／ml）的^125I-SPIO—HAb18F（ab’）2溶液对乳腺癌细胞系MDA-MB-231（实验组）及MDA-MB-468（对照组）存活率的影响。然后行靶向探针^125I-SPIO—HAb18F（ab’）：的体外细胞结合实验，分别行MRI检查和SPECT检查。对与靶向探针^125I-SPIO—HAb18F（ab’）：共同体外培养后的实验组、对照组及未作处理的MDA—MB-231细胞悬液（空白组）行MRI检查，测量其信号强度，计算MRI信号变化率。将实验组及对照组细胞悬液，在不同时间（20min、40rain、1h、2h、4h）经过处理，用1计数仪测量每管放射性计数，分别计算其细胞结合率。采用单因素方差分析比较不同Fe^2＋浓度的^125I-SPIO—HAb18F（ab’）：溶液对各组细胞增殖的抑制作用及SI值的差异。结果靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G／CD147的双模态SPECT—MRI探针构建成功。SPIO纳米颗粒核心粒径为（10．32±1．30）nm，SPIO及^125I-SPIO—HAb18F（ab’）：水合粒径分别为44．80、52．64nm。SPIO和^125I-SPIO-HAb18F（ab’）：溶液的T2横向弛豫率分别为38．79、106．73mM^-1·s^-1。^125I-SPIO—HAb18F（ab’）。溶
- 刘先平张明如梦遥乔瑞瑞康晓伟李国权李郁蒋建利高明远印弘汪静魏光全
- 关键词：乳腺肿瘤分子影像学
- 转录因子FOXM1在卵巢癌细胞中的表达及其对侵袭转移能力的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:研究上皮性卵巢癌细胞中FOXM1的表达,探讨FOXM1与MMP9之间的相关性以及与卵巢癌细胞侵袭、转移的关系。方法:采用Real-time RT-PCR、Western blotting技术检测pcDNA3.1-FOXM1和FOXM1-siRNA分别转染卵巢癌细胞株HO-8910(低转移)和HO-8910PM(高转移)前后FOXM1的表达水平,用Transwell方法检测转染该序列后HO-8910和HO-8910PM细胞侵袭能力的改变,并用荧光素酶双报告基因分析技术检测FOXM1对MMP9的调控作用。结果:与对照组和空载组相比,转染了pcDNA3.1-FOXM1的HO-8910细胞FOXM1 mRNA、蛋白表达显著升高,而转染了FOXM1-siRNA的高转移细胞株HO-8910PM FOXM1 mRNA、蛋白表达显著降低(P<0.05);相对于空载体组和空白组,pcDNA3.1-FOXM1转染组细胞的侵袭能力明显增强,而FOXM1-siRNA转染细胞的侵袭能力明显降低(P<0.05);FOXM1参与对MMP9的转录调控作用(P<0.05)。结论:FOXM1可能是一个潜在的治疗靶点,通过下调FOXM1的表达,从而抑制卵巢癌的浸袭和转移。
- 魏翻艳李郁陈必良董曦文吴娟杨红
- 关键词：卵巢癌FOXM1MMP9
- Sp1调控FoxM1在卵巢癌中的表达被引量：3
- 2014年
- 探讨Sp1调控转录因子FoxM1在卵巢癌中的表达。免疫组织化学染色验证FoxM1在卵巢癌组织中高表达,Spearman'rho秩相关分析Sp1与FoxM1在卵巢癌组织中的表达相关性;双荧光素酶报告系统检测Sp1对FoxM1的调控作用;Real-time quantitative RT-PCR和蛋白免疫印迹技术验证Sp1对FoxM1的调控作用。FoxM1在大于60%的卵巢癌组织中呈阳性表达(阳性率33/42≈79%),并且与Sp1的表达显著相关(r=0.809,P<0.01);Sp1可以结合并激活Foxm1启动子(P<0.05);上调Sp1表达可以激活FoxM1在卵巢癌中的表达(P<0.05),而干扰Sp1后可以下调FoxM1的表达(P<0.05)。Sp1参与调控增殖相关转录因子FoxM1在卵巢癌中的表达。
- 赵静吴娟杨丽娜李郁张芳琳杨红
- 关键词：SP1FOXM1卵巢癌
- 抗乳腺癌多形上皮黏蛋白1单克隆抗体的制备及初步应用被引量：1
- 2015年
- 目的 制备并鉴定抗多形上皮黏蛋白1（MUC1）单克隆抗体,将抗体应用于人乳腺癌组织、纤维腺瘤、囊性增生症及正常乳腺组织的临床鉴别,采用免疫组化方法进行检测.方法 用合成的MUC1重复序列短肽与钥孔血蓝蛋白（KLH）及牛血清白蛋白（BSA）偶联后作为抗原免疫Balb/c小鼠,杂交瘤技术筛选出稳定分泌单克隆抗体的细胞株.制备单克隆抗体,以ELISA、Western blot、流式细胞术、免疫荧光法对抗体进行特异性鉴定及亚类分析;将抗体应用于人乳腺癌组织、纤维腺瘤、囊性增生症及正常乳腺组织的临床鉴别,采用免疫组化方法进行检测.结果 获得4株稳定分泌抗MUC1的杂交瘤细胞株,第1株反应性最强,效价1∶10 7以上.抗体亚型3株为IgG1,1株为IgM,轻链均为κ型.经Western blot、流式细胞术、免疫荧光、免疫组化检测证实抗体与乳腺癌细胞株MCF-7特异性结合,单抗检测MUC1在乳腺癌组织与纤维腺瘤、囊性增生症及正常乳腺组织之间表达差异明显（均P＜0.01）.结论 抗MUC1单克隆抗体经检测效价高、特异性强,为乳腺癌早期诊断和靶向治疗的进一步研究奠定了基础.
- 李航袁时芳凌瑞贠军李永平王辉李郁宋朝君刘佩娟
- 关键词：乳腺肿瘤黏蛋白类
- 膜泡运输揭秘——解读2013年诺贝尔医学/生理学奖
- ＜正＞～～
- 李郁
- 文献传递
- 抗HIV-1 gp120人源mAb重链CDR区分子特性分析
- 2005年
- 目的 :分析gp12 0表面不同抗原决定簇诱导产生的人抗体重链可变区序列 ,探讨各类抗体胚系基因家族利用率、CDRs残基利用率及平均pI值与其空间结构和生物学功能的关系 .方法 :收集人抗gp12 0抗体重链可变区序列 ,按照序列参考文献的标注将其分至不同表位组并建立相关数据库 .将其与Kabat数据库中的所有人源抗体进行比较 ,统计不同表位组抗gp12 0抗体的家族利用率、残基利用率以及不同位点的平均pI值的差别 ,并用SWISS MODEL工具进行结构验证 .结果 :人抗gp12 0抗体中VH1家族利用率最高 ,约占 4 9% ,较普通人群的 2 2 %显著增高 .各表位组间的残基利用差别主要集中于CDR2区 ,且以CD4i组与V3组间的残基利用率差异最为显著 .结论 :人抗gp12 0抗体一级序列所蕴含信息的不同 ,直接决定了其三级结构和生物功能的差异 .这些序列差异的发现 ,将为以后通过抗体改造提高该类抗体特异性和亲和力提供一定的参考信息 .
- 冯媛邢金良李郁陈志南
- 关键词：GP120CDR
- FoxM1与癌发生的相关剪接机制的探讨被引量：1
- 2015年
- FoxM1是一种原癌基因。它也是癌发生、发展密切相关的重要的转录因子。Fox M1是Forkhead Box转录因子家族重要成员,定位于染色体12p13.3,特异性表达于增殖期细胞中,在细胞终末分化时消失,是一个典型的与细胞增殖相关的转录因子,在细胞G/S及G/M期转换过程中发挥重要作用。它具有Fox M1A、B和C三种剪接异构体。Fox M1B和C在癌组织中高表达,发挥转录激活、促癌发生和发展的作用,而Fox M1A在癌组织中低表达,发挥转录抑制功能。癌组织中Fox M1B/C的优先选择对于Fox M1发挥促癌作用非常关键。因此对这一现象的成因即Fox M1癌相关选择性剪接机制的研究非常重要。
- 吴娟赵静杨丽娜李郁杨红
- 关键词：FOXM1剪接异构体
- 膜相关抗原HAb18抗原基因在荷人肝细胞肝癌裸鼠模型的表达及其意义被引量：3
- 2006年
- 目的研究膜相关抗原HAb18抗原基因(HAb18G)在荷人肝细胞肝癌裸鼠模型中的表达,探讨其在分子成像中的应用价值。方法将对数生长期人肝细胞肝癌FHCC98制成细胞悬液(1×107/ml),取0.2ml分别注射于16只裸鼠胁部皮下(1处/只),建立裸鼠肝癌动物模型。对照组(3只)裸鼠仅注射无血清RPMI1640培养液。应用MR平扫及增强扫描观察其生长。扫描后处死裸鼠,取肿瘤标本,漂洗、固定、石蜡连续切片,应用免疫组织化学方法从蛋白质水平观察膜相关抗原HAb18G在该模型上的表达。结果应用该方法建立动物模型的成瘤率高(16/16),肿瘤生长良好。对照组无肿瘤生长。MRI主要表现为长T1、长T2信号。膜相关抗原HAb18G免疫组织化学染色阳性表现为胞膜与胞质内出现棕黄色颗粒。在16只荷人肝细胞肝癌裸鼠模型中均呈强阳性表达,而对照组裸鼠肝组织则无HAb18G表达(P<0.01)。结论荷人肝细胞肝癌裸鼠模型高表达膜相关抗原HAb18G,是基于HAb18G为靶的活体分子成像研究的理想动物模型。
- 魏光全宦怡贺洪德刘燕丽楼朝阳李郁赵海涛吴怀玉葛雅丽
- 关键词：肝细胞抗原肿瘤相关
- RhoA基因转染对QZG肝细胞生物学行为的影响及其机制的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨RhoA基因转染QZG肝细胞系后细胞骨架和体外侵袭能力的变化。方法构建持续激活型的RhoA真核表达载体,以脂质体介导转染肝细胞系QZG,用RT-PCR检测RhoA mRNA表达水平,观察细胞骨架的变化和体外侵袭能力。结果RT-PCR表明稳定转染细胞株中有RhoA mRNA高表达,而且在荧光显微镜下可见到细胞株绿色荧光,细胞形态和骨架发生变化。Boyden小室体外侵袭试验中实验组比空白对照组侵袭能力增加41.4%(P=0.006)。结论RhoA影响细胞的骨架变化和侵袭能力,在肝癌发生和发展中发挥重要作用。
- 王德盛李郁杨薛康董伟宋振顺窦科峰
- 关键词：细胞运动转染细胞骨架RHOA
